甘油三酯测定
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4、妊娠后期,糖原累积病。
TG降低:
甲亢、肾上腺皮质功能降低、肝功能严重低下等。
甲 亢
4. 用72-1型分光光度计测出红色化合物吸光度,再利用公式 求出甘油三酯含量。
三、实验器材与试剂
(一)实验器材
(1)试管 (2)水浴箱 (3)试管架 (4)洗耳球 3支 1台 1个 1个
(5)微量五档可调移液器 2支
(6)刻度吸量管(5ml) 1支
(7)72-1型分光光度计 1台
微量五档可 调移液器 使用方法:
1、血清(样本) 2、蒸馏水 3、工作液 4、甘油三酯标准液(标本):2.26 mmol/L
四、实验内容和操作过程
1、取3支干净试管,分别标明测定(T)、标准(S) 和空白管(O),然后按表加入试剂: 加入物 血清(ml) 标准液(ml) 工作液(ml) 1.5 测定管T 15 15 1.5 1.5 标准管S 空白管O
1.将吸嘴套在移液器头上轻轻转动,以保证密封。
2.使用前应先将移液器吸液和排液几次,润洗吸嘴和保持 腔内外气压一致。
3.选择量程。
4.垂直地握住移液器,将按钮按到第一停止点,然后把吸 嘴浸入到液面下2~3mm,再缓慢放松按钮,使之复位,等 待1~2秒后,从液体中取出,并避免碰撞任何物体。 5.将吸液嘴移至加样容器壁上,缓慢地把按钮按到第一停 止点,等待1~2秒,再把按钮全部按下去,排尽液体后,吸液
实验项目 甘油三酯的测定(72-1) 3学时
一、实验目的
掌握:血清甘油三酯(三酰甘油)测定的 原理、操作方法和临床意义。
二、实验原理
1. 甘油三酯
2、 甘油 3、 H2O2
脂肪酶
甘ห้องสมุดไป่ตู้+脂肪酸
磷酸二羟基丙酮 + H 2O2
红色醌类化合物 + H 2O
甘油激酶
磷酸甘油
磷酸甘油氧化酶
过氧化物酶
+ 氨基安替比林 + 酚
×标准液浓度(2.26 mmol/L)
【结果分析】
经过计算得到的血清中甘油三酯浓度为多
少,是否在人体的正常范围内(空腹甘油三酯
浓度为0.45~1.36mmol/L )。
六、临床意义
TG升高:
1、随年龄增长有上升趋势,体重超标者。 2、高脂血症、糖尿病、肾病综合症、动脉粥样硬化、 甲状腺功能减退等。 3、先天性脂蛋白脂酶缺陷,脂肪肝及其他肝病。
A=K· C· L
(K为吸收系数,对同一物质来说为一常数)
使用方法:
1.检查 :指针位于“0”。 2.打开电源,打开比色皿暗箱盖,预热20分钟。
3.加样:夹毛面,擦干。
4.放置好比色皿,选择波长、调灵敏度。
5.反复调0、调100至稳定。 6.合盖,读数,记录,取样,清洗,关闭仪器。
(二)实验试剂
2 、 将 样 品 混 匀 后 , 置 于 37℃ 水 浴 箱 中 水 浴 10min。 3、用分光光度计在波长546nm处,以空白管O
调零,分别读取两管吸光度值,记录测定管T、标
准管S的吸光度值AT、AS 。
五、实验结果计算及分析
计算公式: 测定管吸光度 A T 甘油三酯(mmol/L)= 标准管吸光度AS
嘴应沿容器壁上滑动取出,再放松按钮,使之复位,即完成。 6.最后,打掉用过的吸液嘴,调回最大量程,仪器放置好保存。
72-1型分光光度计
工作原理
物质对光的吸收具有选择性,不同的物质都有各 自的吸收波长。在一定波长下,某物质的溶液对光的 吸收强弱(吸光度A)与溶液的浓度C和液层的厚度L 的乘积成正比,即遵循朗伯-比尔定律: