糖类检测方法
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糖类检测方法
一、糖类检测方法
1)气相色谱法:气相色谱法也可用于糖类测定,但由于糖类本身不具挥发性,须进行
衍生化处理后才能用气相色谱检测。
2)化学分析法:目前常规的糖类检测方法如斐林氏法、高锰酸钾法等化学分析方法只
能测定总还原糖,不能测定其他糖含量。
3)(3)高效液相色谱法。高效液相色谱法(HPLC)更适用于糖类检测,样品无需衍生化,
分辨率高,重现性好,特别适用于某些热敏性糖类和多糖分子量的检测。迪信泰检测平台提供HPLC、LC-MS检测多种糖类服务。
二、检测器
1)蒸发光散射检测器:对于没有紫外吸收、不产生荧光或电活性的物质均能检测,通
用性好,灵敏度高,可用于梯度洗脱。
2)紫外检测器或光检测器:灵敏度较高,但由于糖类本身在紫外区没有吸收或不产生
荧光,因此样品需提前进行衍生化,操作较复杂。
3)示差折光检测器:可直接测定,操作简便,但灵敏度较低;
三、流动相
1)一般为水、乙腈和甲醇的混合溶液,影响流动相的因素主要有以下几种:
2)检测温度:会影响色谱的检测结果,有研究发现提高温度,可以缩短保留时间,但
分离效果下降,降低温度更有利于峰分离。
3)配比:由糖类的组分含量、分子量范围、结构组成等决定,且有研究表明水的比例
越高,分离速度越快,但若出现果糖和葡萄糖色谱峰重叠,分离效果则会下降。4)pH:一般使用中性的有机溶剂或水进行提取。为了避免离子化,检测物质呈碱性时,
可以增大流动相pH,检测物质呈弱酸性时,可以降低流动相pH。
5)流速:也是影响分离效果的主要因素之一,若流速增大,保留时间缩短但分离效果
下降,若流速过快,则会缩短色谱柱的使用寿命,不同的色谱柱,其配合柱效的最
佳流速也不同。