植物血凝素试验
常用抗肿瘤用药——植物血凝素
抗肿瘤药
药物小类
常ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ抗肿瘤用药
药物名称
植物血凝素
英文名
Phytohemagglutinin
适应症
1.为肿瘤的辅助治疗剂，与放疗、手术及抗肿瘤药物合用。
2.用于绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、乳腺癌等，与自体或异体瘤苗或卡介苗合用。
3.肿瘤、再生障碍性贫血、迁延性肝炎等。
用法用量
1.用于肿瘤 每天20～40mg，溶于5%葡萄糖盐水注射液250～500ml中静滴，或溶于5%葡萄糖注射液或O.9%氯化钠注射液40ml中静脉缓推，或溶于生理盐水2～3ml肌注。宜与手术、放疗、化疗进行综合治疗。或在化疗后使用5～10天。按此序，其疗法一般需用2-3个疗程。
不良反应
1.少数患者用药后可出现一过性过敏反应，如喉水肿、荨麻疹。可应用抗过敏药等处理。
2.偶见过敏性休克。
注意事项
1.用药前作过敏试验。对过敏者禁用。
2.贮于2～8℃冰箱中，使用时新鲜配制。
疗效评价
1.为肿瘤的辅助治疗剂，与放疗、手术及抗肿瘤药物合用，可提高疗效。
2.与自体或异体瘤苗或卡介苗合用，对绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、乳腺癌等有一定疗效。
2.用于迁延性肝炎 一日量为10～20mg，每日1次静滴，20日为一疗程。
药理学
PHA能促使淋巴细胞转化为淋巴母细胞，继而分裂增殖，释放淋巴因子，并能提高巨噬细胞的吞噬作用。尚能促进骨髓造血功能，提升白细胞；对病毒侵袭的细胞有杀伤作用，并能诱生干扰素。在体外能抑制人体食管癌及肝癌细胞株，对艾氏腹水癌亦有抑制作用，可延长带瘤小鼠的生存期。
3.对免疫功能受损的疾病如肿瘤、再生障碍性贫血、迁延性肝炎等有效。
植物血球凝集素
植物血球凝集素
华越洋
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华越洋-植物血球凝集素说明：生化研究，可用于有丝分裂的研究。
血型测定和红细胞凝集实验。
别名：Phaseolus vulgaris agglutinin；Lectin；PHA
特性：来源：菜豆
效价：<62.5 μg /ml 凝集活性<10 μg/ml促有丝分裂活性
S：22-24/25
溶解性：溶于PBS(PH7.2), 参考浓度：1 mg/ml
储存条件：2-8℃
植物血球凝集素（PHA）phytohaemagg lutinin 对原来从植物中发现的，具有凝集红血球作用的物质，而命名的，后来发现了很多具有同样作用的物质，扩大其含义为细胞凝集素中植物来源的总称——植物凝集素（phytoagglutinin，plant agglutinin）或凝集素（lectin）的同义词涵义模糊。
缩写pHA的多数是指从菜豆属（Phaseolus Vulgaris）和金雀花（P．Communis）中提取的凝集素。
提纯后蛋白质含量多的称为PH A－P，糖蛋白多的称为PHA－M。
它具有凝集红血球，促进淋巴球（主要是T细胞）的幼化和分裂的作用。
类似细胞凝集素作用的物质还有伴刀豆球蛋白A，美国商陆（phytolacca am－ericana）的促细胞分裂剂（mitogen）及革兰氏阴性菌的脂多糖。
血凝实验步骤
4单位抗原
物品准备
病毒抗原、PBS缓冲液、1%鸡红 细胞、单道和多道移液器及吸头 、20ml青瓶及塞子、96孔微量血
凝板。
测定病毒滴度
血凝法确定病毒滴度为2的8次方， 根据此滴度计算四单位病毒的稀释 倍数，即64倍稀释。
抗原配制
取19.7ml缓冲液加入20ml小青瓶中 ，再加入0.312ml病毒抗原液，充 分混匀，四单位抗原即完成配制。
小心地吸去上层的白细胞血浆等，并记录离 心管中的液体体积。注意保留最后一滴液体 ，因为这可能是红细胞液。
血凝
物品准备
待检测的样品、1%鸡红细胞、96孔血凝板、移液器及吸头、 恒温箱。
试验步骤
用PBS（生理盐水）铺板。倍比稀释：依次加入待检样品， 吹打后吸出并弃去。加红细胞：每孔加50微升1%红细胞，置 于37℃温箱或室温反应20-40分钟。读数：出现完全凝集的 孔作为病毒的血凝滴度。
抗原原液*稀释倍数=所需抗原体积。
计算需要PBS缓冲液的体积，可利用公式
抗原原液*稀释倍数=所需PBS缓冲液体积。
04
血凝实验应用与局限
Chapter
应用领域
01 02
医学
在医学上，血凝实验通常用于检测病毒、细菌等微生物的存在。例如， 检测流感病毒、艾滋病病毒等。此外，血凝实验还可以用于检测细菌毒 素，如破伤风毒素等。
离心管操作
03
将抗凝血和PBS或生理盐水混合，轻轻颠倒混匀，以获得均衡的
血液稀释。
1%红细胞准备
第一次离心
第二次离心
盖上离心管盖，放入低速离心机中，设定 转速为1500rpm，5分钟。
取出离心机，小心地吸去上层的白细胞血 浆等，并记录离心管中的液体体积。
植物凝集素(PHA)的提取及血凝效果研究
植物凝集素(PHA)的提取及血凝效果研究
于敏;王志德;董志芳
【期刊名称】《安徽科技学院学报》
【年(卷),期】2002(016)001
【摘要】凝集素是一类具有糖专一性、可促使细胞凝集的蛋白质或糖蛋白,本文通过提取8种豆科植物种子中的凝集素,分别与人的四种血型红细胞悬液发生凝集反应(A型、B型、O型、AB型),通过血凝反应的强弱程度来验证不同凝集素的血型专一性,并进一步测定其相对含量.
【总页数】3页(P23-25)
【作者】于敏;王志德;董志芳
【作者单位】安徽大学生命科学院,安徽,合肥,230039;安徽大学生命科学院,安徽,合肥,230039;安徽大学生命科学院,安徽,合肥,230039
【正文语种】中文
【中图分类】Q946.1
【相关文献】
1.红芸豆植物凝集素凝胶剂杀精与凝集精子效果的实验研究 [J], 王静静;姚娅婷;李阔;郑永;张田;王敏康
2.黑豆凝集素的提取及血凝效果研究 [J], 唐超;王清吉
3.芸豆植物凝集素的提取及血凝效果研究 [J], 郭春生;于蕾妍;葛蔚;张丽;唐超;王清吉
4.植物血凝素（PHA）治疗非典型新城疫效果好 [J], 李志国;王希臣;耿援非;梁奎
平
5.蒜头果凝集素的提取及血凝效果研究 [J], 袁燕;袁再美;岑晓江;程霞
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植物血凝素对仔猪免疫功能的影响试验
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高 （ ＜ ．５ ， Ｐ ００ ） 以高 剂量 组 效果 最 好 。 关 键 词 ： 物 血 凝 素 凝 效价 ； 瘟 疫苗 ； 植 血 猪 Ｔ淋 巴细 胞
Ｅｘ ｅ ｉ ｅ ｏ ｆｅ ｔ ｐ ｔ ｈｅ ａ ｌ ｉ ｎ ｏ ｈｅ ｍｍ ｕｎｅ ｆ ｃ ｏｎ ｆ ｐ ｇ ｅ ｐ ｒ ｍ ｎｔ ｆ ｅ ｃｓ ｏｎ ｈｙ ｏ ｍ ｇｇ ｕｔｎｉ ｔ ｔ ｉ ｕｎ ｔ ｏ ｉ ｌ ｔ ｉ ｓ
细胞生物学实验报告——凝血
图1. 凝集素介导的细胞与分子或细胞间相互作用模型（引自Chapman and Hall 1989）。
A. 同种细胞间相互作用。
B. 不同种细胞间相互作用。
在本实验中，土豆块茎凝集素介导的红细胞凝集属于A 类中由上至下数第二种类型，即凝集素可溶，可以同时与两个红细胞表面的糖蛋白寡糖链结合，在两个红细胞之间形成连接。
山东大学细胞生物学实验报告植物凝集素介导的红细胞凝集反应姜政 2012/10/6实验目的：观察凝血的过程和凝血后红细胞的聚集状态，理解细胞间凝集反应与细胞膜表面结构的关系，了解植物凝集素使红细胞凝集的基本原理和凝集素的应用领域。
实验原理：凝集素（Lectins ）是一种能与细胞膜表面糖蛋白寡糖链特异性结合的蛋白质，多数含糖，广泛存在于植物提取物、动物组织、各种微生物包括病毒中，其中以植物凝集素（Phytohemagglutinin ，PHA ）分离到的种类最多。
植物凝集素在植物体内主要参与防卫机制[1]，识别入侵微生物和愈合伤口，在豆类植物中，凝集素还与植物与特定固氮菌形成共生有关[2]；在体外，凝集素最典型的效应是引起细胞凝集。
通常认为，凝集素介导细胞凝集的基本原理是：可溶性凝集素分子能与细胞膜表面的糖蛋白寡糖链特异性结合，使不同细胞的糖蛋白通过凝集素分子彼此连结，进而引起细胞间凝集（图1）。
红细胞膜表面有大量糖蛋白，其中一些糖蛋白具有特异性，比如人类A 型红细胞表面的α-N -乙酰-D-半乳糖胺和O 型红细胞表面的α-L-海藻糖就分别决定了人类的A 血型和O 血型[3]。
本实验就是利用植物凝集素与红细胞表面糖蛋白受体的特异性结合实现红细胞凝集。
土豆块茎凝集素（potato tuber lectin ）是一种能结合几丁质的富含羟脯氨酸的糖蛋白，单体分子量约50, 000，包含至少三个不同的结构域，其中富含胱氨酸的区域与麦胚凝集素（wheat germ agglutinin ，WGA ）等几丁质结合蛋白具有同源性[1, 4]。
PMA、PHA
PMA 、PHA1、PMA：佛波醇酯类多克隆刺激剂，是DAG（二酯酰甘油）的analog，脂溶性，自由通过细胞膜，直接作用于细胞活化信息传导通路上的PKC。
Ionomycin：钙离子载体，使细胞内Ca 2+浓度增加，激活calcineurin。
来自PKC和calcineurin的共同信号最终引起T细胞活化。
PMA一般与离子酶素共用，一般用于进一步刺激活化的免疫细胞。
在体内活化的淋巴细胞到体外之后，由于环境的改变，体外缺少刺激因素，所以，这些活化的淋巴细胞在体外不能主动合成和分泌相关的细胞因子，此时就可以加入PMA和离子酶素，提供类似体内环境的刺激因素，使其继续合成和分泌相关的细胞因子，这样就可以通过收集上清用ELISA法检测其分泌的细胞因子，用胞内染色法检测合成的细胞因子。
所以，PMA和离子酶素只是刺激已经活化了的淋巴细胞，使其在体外环境下继续合成和分泌细胞因子而已，与体外实验中直接活化初始淋巴细胞完全是两个概念。
2、PHA：植物血凝素类多克隆刺激剂，作用于TCR－CD3复合体引起T细胞活化。
PMA+Ion由于直接作用于T细胞活化信号传导通路的中游，细胞活化快，2h大部分细胞已活化，4h基本全部活化，作用强劲。
PHA作用6h的效果大致相当于PMA+Ion活化2h的效果，作用温和一些。
PHA（或ConA）适合刺激人的T细胞增殖，ConA则对小鼠T细胞增殖作用更强一些。
它们诱导细胞活化、增殖后都会在培养72 h后发生明显的AICD（活化诱导的细胞死亡）现象。
3、单独anti-CD3包被在板上能刺激纯化T细胞增殖，加入anti-CD28作用更强。
正常机体的T淋巴细胞在体外培养过程中，受到特异性抗原或有丝分裂原（植物血凝素或刀豆素等）刺激，细胞的代谢和形态可发生一系列变化。
主要表现为电荷的改变，细胞内蛋白质和核酸合成增加，及以细胞形态可转化为淋巴母细胞。
为此，在体外利用各种刺激剂激发淋巴细胞，根据其转化程度可测定T淋巴细胞的应答功能。
植物血凝素的提取
植物血凝素也称为植物凝集素（PHA），可自制也可购自商品。
自制的方法常用生理盐水提取法。
（A）干品制备法（1）选广东鸡子豆10g，用蒸馏水冲洗，置培养皿内用75%酒精一次性浸洗，倒掉酒精留间隙置37℃。
恒温箱内24-48小时；（2）在无菌条件下研碎鸡子豆，加生理盐水30ml，摇匀后放入4℃冰箱24小时，第二天再加生理盐水70ml，再置4℃冰箱内24小时。
每8-12小时摇荡一次。
（也可一次性加100ml生理盐水）；（3）无菌条件下移入10-50ml离心管内，3000-4000rpm30分钟。
在无菌箱内把上清液分装于10ml小瓶，置冰箱冷冻层备用；（4）效价：外周血染色体制备每100ml培养基加PHA约2ml。
注：若整个过程未在无菌条件下进行，分装时用G5玻砂漏斗除菌即可。
（B）鲜品制备法：（1）选择完整无破皮鲜菜豆20g，用75%酒精浸泡10分钟；（2）在净化工作中用无菌盐水或蒸馏水漂洗二次，然后置无菌乳钵中捣成糊状，用100ml无菌盐水浸泡封口；（3）移入4℃冰箱中置24小时，中间摇动数次，次日3000rpm30分钟，在无菌情况下分装上清液于10ml小瓶内，置冰箱冷冻层备用。
（4）效价：正式使用前先用一定量作效价测定，按效价使用。
青豌豆的提取：取青豌豆100克，加含0.15M氯化钠的0.01M pH7.0磷酸缓冲液200ml浸泡过夜，经膨胀后用组织捣碎机捣碎，倒入布袋中压榨出水提液，在沉渣中再力0入磷酸缓冲液100ml搅拌，浸泡1时，压榨出水提液，合并水提液，量出总体积。
加0.01％叠氮钠防腐。
2．蛋白质沉淀：边搅边加入固体硫酸铵达80％饱和（每升溶液加硫酸铵561克）冷藏过夜。
吸取上清液，沉淀再用二层滤纸抽气过滤至干，即得粗制青豌豆素蛋白沉淀物硫酸铵糊。
置冰箱保存。
3．亲和层析分离(1)装柱：取直径为1.0 cm，长度为25 cm的层析柱，按（实验十五）操作，自顶部缓缓加入稀薄的Sephadex G25悬液，待凝胶上升至距顶柱约3-5 cm即可，用1M NaCl溶液平衡10分钟。
植物血凝素皮内试验
植物血凝素皮内试验植物血凝素皮内试验是一种用来检测植物血凝素对人体的过敏反应的方法。
本文将着重介绍植物血凝素的概念、应用、执行步骤、结果解读以及存在的问题和前景。
植物血凝素是一种存在于许多植物中的蛋白质，它具有促进血液凝固的作用。
当人体接触到这些植物血凝素时，可能会出现过敏反应。
因此，通过植物血凝素皮内试验可以评估一个人是否对某种植物血凝素过敏。
植物血凝素皮内试验主要用于评估花粉过敏症、食物过敏相似物反应以及相关的植物过敏反应。
执行植物血凝素皮内试验的步骤通常包括：1. 收集需要测试的植物血凝素；2. 给受试者进行皮内注射；3. 观察注射部位是否产生变红、肿胀或者瘙痒等反应。
根据反应的强度和时间来评估对植物血凝素的过敏程度。
当植物血凝素皮内试验显示正常反应时，这表明受试者对该种植物血凝素并无过敏反应。
然而，当植物血凝素皮内试验显示异常反应时，可能说明受试者对该植物血凝素过敏或者敏感。
需要注意的是，皮内试验仅仅是一种初步判断方法，可能存在误差。
因此，正式的诊断应该结合临床症状、过敏原检测以及其他相关检查结果综合分析。
目前，植物血凝素皮内试验在临床上的应用还不十分广泛。
一方面，植物血凝素的提取和制备工作较为繁琐，需要一定的实验条件和技术。
另一方面，植物血凝素皮内试验存在一定的操作难度，需要专业的人员执行。
因此，在临床实践中，往往会结合其他过敏测试方法来进行综合评估。
植物血凝素皮内试验的局限性也需要我们关注。
一方面，该试验只能检测特定的植物血凝素，无法对其他过敏原进行评估。
另一方面，植物血凝素皮内试验对于不同人群的敏感度可能存在差异，如儿童和老年人可能相对更加敏感。
因此，在实施该试验时，需要综合考虑受试者的个体差异。
尽管存在以上问题，植物血凝素皮内试验仍然具有广阔的应用前景。
首先，随着对植物过敏反应的研究不断深入，相关的植物血凝素也将越来越多地被发现和应用。
其次，植物血凝素皮内试验在评估过敏反应和过敏性疾病方面具有一定的准确度和实用性。
80%植物血凝素
植物血凝素
【主要成份】植物多肽、稳定剂
【性状】本品为白色或微黄色固体。
【适应症】1、可配合广谱抗生素用于防治鸡非典型新城疫、温和型流感、传染性法氏囊病初期、各
型传染性支气管炎、鸡痘、传染性喉气管炎，在其他病毒性病重时，可配合头孢霉素 注射使用，注射使用比饮水效果更为明显。
2、与鸭病毒性肝炎血清配伍使用可防治鸭病毒性肝炎，与头孢霉素配合用于防治鸭瘟。
【用法用量】混饮或注射本品10g 供1500羽成禽成3000羽雏禽使用，每天一次，连用2-3天，重症加倍。
【规格】10g ：含PHA 不低于80mg
相关内容请参考： 南京旭润生物科技有限公司【 】。
植物血凝素-说明书
功能：激活吞噬细胞、诱导产生干扰素
【主要成份】植物血凝素、黄芪多糖、氨基酸、免疫增强剂。
【性状】本品为黄褐色粉末
【药理作用】1、植物血凝素为广谱抗病毒药，可刺激T淋巴细胞增殖分化产生大量效应TX细胞和细胞毒T细
胞，效应T细胞分泌产生大量细胞因子（如干扰素等）杀伤病毒，细胞毒T细胞可直接杀伤病毒。
2、植物血凝素可同时刺激B细胞转化为浆母细胞后增殖分化为浆细胞，浆细胞产生大量非特异
性抗体来中和病毒。
【适应症】1、植物血凝素可作为动物免疫增强剂进行治疗、辅助用药或用于免疫功能受损引起的疾病，用来增强动物机体免疫力、提高药物的疗效。
2、广谱抗病毒药，可用于防制家禽、家畜病毒性疾病，如鸡的传支、传喉、新城疫、传染性法
氏囊病、鸡痘；鸭瘟、鸭病毒性肝炎；猪圆环病毒病、蓝耳病、猪传染性胃肠炎、猪病毒性
腹泻、猪繁殖与呼吸综合征、非典型猪瘟；犬、水貂的犬瘟热、犬细小病毒等病毒性疾病。
【用法用量】混饮：本品100g兑水400kg集中饮用，效果更佳。
混饲：本品100g拌料200kg，连用3-5天。
重症酌加，预防量减半。
【注意事项】本品可与广谱抗生素配合使用，效果更佳。
【停药期】无
【规格】100g：20g：30g：8g
【包装】100g/袋x10袋/桶×8桶/件
【贮藏】避光、密闭保存。
植物血凝素对猪病毒性疾病的治疗.doc
植物血凝素对猪病毒性疾病的治疗概述：2005年后造成大流行的无名高热病，几乎所有养殖户（场）都难以幸免，给养殖朋友们带来巨大的损失，我们曾将病死猪送至华中农业大学、湖北省农科院兽医研究所、哈尔滨兽医研究所等技术权威单位进行实验室检验。
初步认定引起高热病的病因有蓝耳病、附红细胞体、猪瘟、猪肺疫、猪丹毒、猪胸膜肺炎、弓形体病、猪链球菌等。
我们用植物血凝素（白细胞干扰素）配合适量抗菌药物，解热剂辅助治疗，均获得满意效果，报道如下：1．发病特点及症状该病2004年在我国部分省市均有发生。
患猪有断奶，甚至60KG大猪，一年中以5-8月份为高发期，农村散发猪或猪舍通风不良，潮湿、氨气浓度高，不经常消毒者多发。
死亡前出现抽搐等神经症状。
2．尸体检验患猪尸体脱水、消瘦、胸腔可见多量黄色积液，并有纤维素性渗出物，肺脏肿大，肺间质增宽，个别出现肺萎缩；有灰黄色坏死灶，胆汁充盈，个别见胆汁干枯现象；全身淋巴结肿大，呈现大理石变化，脾脏略肿大，有出血性丘疹，肾脏黄白色，有针尖大小出血点。
3．细菌血检查病死猪的肺、肝和心血接种于普通琼脂平板及血平板，37摄氏度培养两天，发现有巴氏杆菌，丹毒杆菌等许多病菌。
4．治疗方法植物血凝素（武汉农大生物科技有限公司）按大猪1支，小猪半支用量，在猪左侧颈部肌肉注射，24小时一次，连用3次，同时配合阿莫西林，右颈部肌肉注射，12小时1次，连用6次。
第二天，注射病猪体温正常，精神状况大为好转，第三天猪有半饱食欲，排便正常，第四天，病猪精神、食欲、排便恢复正常。
对病猪同圈又不能隔离的健康猪只按大猪1支，小猪半支的剂量，注射植物血凝素给予预防高热病的发生，但同时要在饲料中添加喘呼宁（10%磺胺间甲氧10%氟苯尼考）或万特肺康全群饲喂，以控制继发感染，每天两次，连喂一周。
对全群猪用1：400百菌消或华威三号（复合碘）消毒剂带猪整体消毒，每天一次，连用7天。
5．总结根据植物血凝素（白细胞干扰素）具有广谱抗病毒及对机体的免疫调节的作用机理，我们不需要清楚致病的是哪几种病原，其实我们基层兽医根本没什么检验条件、也没去时间搞清楚，用植物血凝素配合抗菌素，解热剂分点注射就可以标本兼治了。
人类外周血培养及染色体核型分析
人类外周血培养及染色体核型分析一、实验目的：1.学习外周血淋巴细胞悬浮培养的原理和方法；2.利用培养后进行分裂的细胞制备人类染色体标本；3.利用人类染色体核型分析软件进行核型分析。
二、实验原理：1、植物血凝素的作用外周血中的淋巴细胞几乎都是处在G0或G1期，一般情况下是不分裂的。
当在培养基中加入植物血凝素(PHA)时，这种小淋巴细胞受到刺激后转化为淋巴母细胞，进而开始进行有丝分裂。
2、秋水仙素的作用：秋水仙素(colchicines)可以抑制细胞纺锤体的形成，使处在分裂的细胞停留在中期。
因此利用秋水仙素处理可以获得许多同步的中期分裂细胞。
使用秋水仙素处理会引起染色体在一定程度上的收缩，因此在处理时间和浓度上要合适。
3、低渗的原理：徐道觉(T.C.Hsu)等于1952年发现在固定细胞之前使用低渗液进行处理，可以使细胞的核膜吸水膨胀，滴片后细胞破裂，染色体分散开来，在显微镜下易于观察和统计，染色效果也明显提高。
这种技术被广泛采用后，使人类染色体分析技术得到了发展。
4、核型和带型：核型(karyotype)：是指染色体组在有丝分裂中期的表型, 是染色体数目、大小、形态特征的总和。
在对染色体进行测量计算的基础上, 进行分组、排队、配对, 并进行形态分析的过程叫核型分析。
将一个染色体组的全部染色体逐条按其特征画下来，再按长短、形态等特征排列起来的图称为核型模式图，它代表一个物种的核型模式。
带型（banding pattern）即染色体带型。
借助细胞学的特殊处理程序，使染色体显现出深浅不同的染色带。
染色带的数目、部位、宽窄和着色深浅均具有相对稳定性，所以每一条染色体都有固定的分带模式，即称带型。
常用的显带技术所显示的带有Q带、G带、C带、R带、T带等。
就每一种分带技术而言，每一染色体的带型是高度专一和恒定的。
三、实验用具及试剂：1.实验仪器及用具：恒温培养箱、离心机、恒温水浴箱、冰箱、显微镜、显微数码摄像系统、染色体分析仪；培养瓶、注射器、微量移液器、枪头、吸管、离心管(10ml)、载玻片、烧杯、量筒。
植物凝集素对红细胞的凝集反应
六、思考和讨论：
未溶血 溶血
植物材料马铃薯和韭菜的凝集效率差异：可用凝集细胞占总 细胞的比率、细胞产生凝集反应所需要时间作为比较依据。
下一次实验内容
“实验4 细胞骨架（微丝）的观察”
根据附录10和量得的溶液体积（韭菜研磨过滤后的溶液）： （1）能否计算出达到60%硫酸铵饱和度时硫酸铵的质量（g）？ （2）硫酸铵有60%饱和度提高到80%饱和度时又当如何计算？
注：硫酸铵应当一边 溶解，一边搅拌，直 至完全溶解，杜绝把 硫酸铵全部一下子都 加入溶液中。
四、实验操作 3. 细胞膜的渗透性
二、实验原理
细胞膜的渗透性
（ 1 ） 细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障 ，是一种半透膜，使细胞具有相对稳定的内环境，同时在细 胞与环境之间的物质运输、能量交换及信息传递过程中也起 着重要作用。
（ 2 ） 将红细胞放入低渗盐溶液中，水分子大量渗到细胞内 ，可以使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中，由不透明的红 细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象成为溶血 （hemolysis）。 （ 3 ） 由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同，因此，发 生溶血现象所需的时间长短可作为测量物质进入红细胞速度 的指标。
实验（三）植物凝集素对红细胞的 凝集反应与细胞膜的渗透性
一、实验目的 （1）了解细胞发生凝集反应的原理； （2）了解凝集素的生物学功能； （3）了解溶血现象及其发生机制。 （4）了解细胞膜的渗透性及各类物质进入
细胞的速度。
二、实验原理
植物凝集素 1. 植物凝集素最早发现于1888年，Stillmark在蓖麻籽萃取物中发 现了一种细胞凝集因子，它具有凝集红细胞、淋巴细胞、纤维细 胞等作用。 2. 凝集素（lectin）是一类具有特异糖结合活性的蛋白，具有一个 或多个可以与单糖或寡糖特异可逆结合的非催化结构域，能识别 糖蛋白和糖脂中，特别是细胞膜中复杂的碳水化合物结构，即细 胞膜表面的糖基。 3. 一种凝集素具有只对某一种特异性糖基专一性结合的能力，通 过与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”，从而使多个细 胞聚集成团块状，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞发生凝集。
植物血凝素PHA说明书
植物血凝素(PHA)植物血凝素(phytohaemagglutinin)(PHA)是一种有丝割裂原，要紧用于激活免疫细胞-淋巴细胞。
是一种干扰素诱导剂，不仅能够刺激机体产生白介素-2和干扰素；还能够刺激机体产生非特异性抗体；增强免疫细胞-浆细胞产生特异性抗体的质和量。
由于其较难提纯，且本钱极高，因此一直以来仅在实验室中作为刺激淋巴细胞增殖的试剂。
我公司共投资300万元，用4年的时刻通过量年实验终于试探出植物血凝素（PHA）的提取方式，利用国际最先进的超低温冷冻方式从红芸豆中提掏出纯度可达%的植物血凝素（PHA），填补了国内空白。
PHA的作用机理：1．PHA刺激T细胞增殖分化产生大量效应T细胞和细胞毒T细胞；效应T细胞分泌产生大量细胞因子（如白细胞介素、干扰素等）杀伤病毒；细胞毒T细胞可直接杀伤病毒。
2．PHA可刺激B细胞转化为浆母细胞然后增殖分化为浆细胞，浆细胞产生大量非特异性抗体来中和病毒。
同时能够刺激机体免疫细胞-浆细胞产生特异性抗体的质和量；提高机体的免疫力。
我公司研究植物血凝素（PHA）在动物疾病防治上的应用，要紧进行了以下实验：1．利用鸡白细胞、脾细胞、鸡胚成纤维细胞以有机锗Ce-132、新城疫弱毒株NDV-F、植物血凝素（PHA）、聚肌胞PolyI：C为诱生剂，对外源性干扰素IFN诱生条件如诱生剂量、诱生时刻及培育条件进行了比较分析和探讨，结果发觉以Ce-132诱生IFN的能力为最强，其他依次为PHA、NDV-Ｆ、PolyI：Ｃ；且鸡脾细胞和鸡白细胞产生的IFN效价高于鸡胚成纤维细胞；而且最正确诱生剂量依次为：Ce-132为70微克／毫升；鸡HDV-Ｆ为128HAU／毫升；PolyI：Ｃ为60微克／毫升；PHA为20微克／毫升。
该研究说明，植物血凝素（PHA）在机体内刺激机体产生干扰素的能力是聚肌胞的30倍，所产生的作用是直接服用干扰素的300倍，因此服用1mg植物血凝素（PHA）相当于服用30mg的聚肌胞和直接利用300mg干扰素。
植物血凝素的不同提取方法及活性测定
中图分类号：８２ ５ ￥ ５． ４
文献标识码 ： Ｂ
文章编号 ： ０ —９４ ２ １ ）８ ０２ — ２ １ １８ ６ （ １０ — ０４ ０ ０ ０
摘 要 ： 鸡子 豆 粉碎 后 ， 用 蒸馏 水 冷浸 提取 其 中的植 物 血 凝素 （ ＨＡ）浸提 后 的 上 清液 经 （ Ｈ ） Ｏ 将 采 Ｐ ， Ｎ ２ ４ Ｓ 沉 淀 ，０ Ｄ分 子量 的 中空纤 维超 滤膜 超 滤 ， １０Ｋ 然后 取 Ｐ ＨＡ上 清液 、Ｎ ） Ｏ 沉淀 液 、 滤液 和浓 缩液 测 定 （Ｉ ￣ Ｌ Ｓ 超
ｉ ｒ ｉ ｗ ｒ ｃ ｌ ｔｄ ｏ ｅｔ ｅ ｅ ｇ ｌｔ ｎ ｃｉ ｔ ＨＡ） ａ ｄ ｈ ＨＡ ｉ ｒ ｆ ｗ ｉｈ ｅｅ ｆｔ ｔ ｎ ｅｅ ｏｌｃｅ ｔ ｔｓ ｈ ｈ ｍａｇｕｉｉ ａ ｔ ｉ （ ｌａ ｏ ｅ ｔ ｎ ｖｙ ， ｎ ｔｅ ｔ ｅ ｏ ｈｃ ｗ ｒ ｔ
２ ， ７２ ， ｒ ｓ ｅ ｔｖ ｌ ． Ｔ ｅ ｏ ｃｕ ｉｎ ｎ ｉａｅ ｔａ ｕ ｒ ｆ ａｉｎ ｏ ｌ ｂ ｕ ｅ ａ ａ ｒ ｌ ｎ ｒ ｓ２ ， ９ ２ ｅ ｐ ｃｉｅｙ ｈ ｃ ｎ ｌｓｏ ｉｄ ｃ ｔｄ ｈ ｔ ｈ ａｉ ｔ ｃ ｕ ｄ ｅ ｓ ｄ ｓ ｐ ｅｉ ａｙ ｈｒ ｏ ｍｉ
陈元坤 －廖 明初 ２欧红 萍 ３李 超 ， 学渊 。 ， 吴
（ ．ｔｌ 新 兽药 工程 技术 研 究 中心 ， １Ｉ ｌ ￣Ｊ 省 四川 成都 ６ １ ３ ； １ １ ０ ２重庆 市 长寿 区凤 城 畜牧 兽 医站 ， ． 重庆 长寿 ４ １ ２ ０ ２ ０； ３成都 农 业科 技职 业学 院 ， ． 四川 成 都 ６ １ ３ ） １ １０
血凝素含量测定方法及其意义
血凝素含量测定方法及其意义李淑芬;张智慧【期刊名称】《河北联合大学学报（医学版）》【年(卷),期】2005(007)003【摘要】材料：①参比抗原：WHO提供的三型抗原参比品（标准品）B型：B／Shangdong／7／97，甲1型：A／Caledonia／20／99．甲3型：A／Panama ／2007／99；②测定抗原：通过鸡胚培养流感病毒并进行纯化的三型流感疫苗原液及纯化液；③阳性血清：由WHO提供免疫羊抗血清Anti-B／Shangdong／7／97，Anti-A／Caledonia．／20／99，Anti-A／Panama／2007／99；④阴性血清：10日鸡胚收获尿囊液，免疫健康羊，1个月后采集血清。
经56℃灭活30分钟，2℃～8℃保存备用；⑤抗原阴性对照：将10日鸡胚收获尿囊液，用提纯流感病毒同一工艺纯化而得。
蛋白含量：28μg/mL。
【总页数】1页(P291-291)【作者】李淑芬;张智慧【作者单位】河北省唐山怡安生物工程有限公司,河北唐山,063000;唐山华凯生物技术联合有限公司【正文语种】中文【中图分类】R373.13【相关文献】1.oxLDL对滋养细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1和凋亡基因表达的调控及意义 [J], 孟涛;杨秀华;任丽娜;关姝2.急性冠状动脉综合征患者血清可溶性血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1和胆红素表达水平及临床意义 [J], 郭瑞霞;张晓;朱记法;陈龙3.应用A—血凝素抗原与R—血凝素抗原进行流行性出血热疫区分型的探讨 [J], 杨占清;刘景山4.表达禽流感H5N1血凝素抗原(HA)和H9N2血凝素抗原(HA)融合基因重组腺病毒二价苗的构建 [J], 王增利;仇国明;张哲;李鹏坤;霍惠玲;李娥;甄理;董维亚;化金津;冯亚文5.营养不良对植物血凝素皮试反应的临床意义 [J], 冯大瑛;魏钰书因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
血凝素
植物血凝素（phytohaemagglutinin,PHA），是一种有丝分裂原，主要用于激活免疫细胞――淋巴细胞，是利用国际先进的超低温冷冻技术从红芸豆中提取的一种物质。
由于其较难提纯，且成本极高，因此一直以来仅在实验室中作为刺激淋巴细胞增殖的试剂。
一、主要成分植物血凝素的主要成分为植物多肽，是一种低聚糖(由D－甘露糖、氨基酸葡萄糖酸衍生物构成)与蛋白质的复合物。
二、药理作用1.植物血凝素为广谱抗病毒药，可刺激T淋巴细胞增殖分化产生大量效应T细胞和细胞毒T 细胞，效应T细胞分泌产生大量细胞因子（如干扰素等）杀伤病毒，细胞毒T细胞可直接杀伤病毒。
2.植物血凝素可同时刺激B细胞转化为浆母细胞后增殖分化为浆细胞，浆细胞产生大量非特异性抗体来中和病毒。
3.可增强机体免疫功能，提高骨髓造血机能，促进机体白细胞及多核白细胞数量明显增加；提高机体细胞诱生干扰素，增强机体免疫力，促进抗体形成，增强机体对病原微生物的吞噬作用。
4.植物血凝素与黄芪多糖、左旋咪唑、阿糖腺苷配伍，有明显的增效作用；与部分抗生素等配伍具有相加作用。
5.植物血凝素肌肉注射后约5~15分钟血药浓度达高峰，口服约1小时后血药浓度达高峰，代谢产物主要从尿液排出。
三、特点1.使用方便、广泛，可以与许多药物同时使用，具有协同作用或相加作用。
在粉、散剂中添加植物血凝素，具有明显提高原有产品疗效的作用，同时不干扰原产品的检测，且无种属特异性，可广泛应用于家禽、猪、牛等动物。
2.使用安全，首先使用植物血凝素后不影响机体抗体水平，可用于预防肉仔鸡后期常发的病毒性疾病，避免了由于加强免疫引起的抗体水平过高、疫苗应激反应、药残严重，影响家禽产品出口。
其次植物血凝素抗病毒谱广、毒性小、安全范围大。
3.可以与疫苗同时使用，能起到弥补免疫空白期、减缓疫苗应激反应、增强免疫效果的作用。
4.植物血凝素经特殊加工可口服给药，不受消化酶和胃酸的破坏，可常温保存两年（液体保存时一般6个月左右就开始出现浑浊现象，降低疗效）。
从植物的叶茎和果实中检测植物血凝素
从植物的叶茎和果实中检测植物血凝素
武廷春;李宗亮;张兴满
【期刊名称】《中国法医学杂志》
【年(卷),期】1992(000)001
【摘要】在法医工作实践中,经常遇到以植物为载体的血斑,在对其进行血型凝集素检验时,由于植物血凝素的干扰和影响,常出现假阳性结果,以致使血型检验出现不应有的误差。
本文实验目的,旨在提取有关检材,尤其是以植物为载体的检材进行血型凝集素检验时,务必考虑到植物血凝素的干扰,以利于正确进行血型
【总页数】2页(P51-52)
【作者】武廷春;李宗亮;张兴满
【作者单位】[1]河北省公安厅;[2]廊坊市公安局;[3]中国刑警学院石家庄 050051【正文语种】中文
【中图分类】D919
【相关文献】
1.人脐血多种细胞因子的含量检测及植物血凝素和脂多糖的影响 [J], 陈纯;黄绍良;吴燕峰
2.野生蘑菇植物血凝素成分的检测 [J], Kyu.,HJC;李景道
3.在日粮中添加葡萄糖氧化酶和植物血凝素防治仔猪早期断奶腹泻症的试验 [J], 田东霞;张玉坤;田泉成
4.结核病T细胞中结核特异性抗原和植物血凝素比值在活动性结核与潜伏结核鉴别诊断中的应用价值 [J], JIANG Qing-ming;SHEN Xue-qun;GAO Li-hua
5.结核感染T细胞斑点试验中结核特异性抗原/植物血凝素比值对肺外结核的诊断价值 [J], 黄健;孙冰;柴青峰;韩伟;崔秀琴
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植物血凝素试验
文章目录*一、植物血凝素试验的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、植物血凝素试验的正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、植物血凝素试验的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、植物血凝素试验的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状*五、植物血凝素试验的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群2. 不良反应植物血凝素试验的基本信息
1、定义本试验是测定非特异性细胞免疫较有价值的方法。
在前壁掌侧皮内注射,18及24小时后观察结果。
2、专科分类无
3、检查分类免疫检查
4、适用性别男女均适用
5、是否空腹非空腹
植物血凝素试验的正常值和临床意义
1、正常值用5μgPHA皮试,红肿直径为8.5±0.1mm为阳性;
用10μgPHA皮试,红肿直径11.2±0.4mm为阳性。
2、临床意义本试验阴性见于细胞免疫缺陷病、部分麻风病人(约50%-70%呈阴性)以及病情严重的急、慢性肝炎、亚急性肝坏死病例、麻疹、结核病等。
恶性肿瘤有转移者其阳性率仅为5%-10%;而良性肿瘤或无转移的恶性肿瘤病人其阳性率与正常人相仿。
晚期实体瘤、慢性淋巴细胞白血病等PHA反应可呈阴性。
植物血凝素试验的检查过程及注意事项
1、检查过程取PHA1支(含10mg/支)用生理盐水稀释成每0.1ml 5,10或20μg。
消毒前臂内侧皮肤用1ml注射器抽取适量药液,皮内注入0.1ml使局部形成白色小泡。
18～24h后测量局部红肿硬结的直径,一般5mm为阳性,但红肿常于24h开始逐渐消退,48h后已无明显红肿存在。
正常人用5μg PHA皮试,阳性率为100%,红肿直径为8.5±0.1mm用10μg PHA皮试,阳性率为100%,红肿直径为11.2±0.4mm。
女性皮试反应显著高于男性。
9岁以下反应最弱,随年龄增长反应逐渐增大。
30岁以上呈较一致的强反应期。
本试验可用于各种年龄组,对小儿更为适用。
2、注意事项极少数患者,可在皮肤试验时发生过敏性休克,
常于注射后数秒至5分钟内开始,先皮肤瘙痒、四肢麻木,继则气急、胸闷、发绀、心跳加快、脉细、血压下降、大量出汗等,如不及时抢救,可导致病人死亡。
故应做好抢救准备,如常备盐酸肾上腺素、氢化可的松、中枢兴奋药和抗过敏药。
植物血凝素试验的相关疾病和症状
1、相关疾病麻疹,生殖道肿瘤皮肤转移,脾脏原发性恶性肿瘤,肺结核、严重联合免疫缺陷病、慢性淋巴细胞性白血病
2、相关症状锥虫性“下疳”,消瘦,咳嗽,斑疹,鼻出血,阴道出血,发烧
植物血凝素试验的不适宜人群和不良反应
1、不适宜人群有过敏性休克病史的人。
2、不良反应极少数患者,可在皮肤试验时发生过敏性休克,常于注射后数秒至5分钟内开始,先皮肤瘙痒、四肢麻木,继则气急、胸闷、发绀、心跳加快、脉细、血压下降、大量出汗等,如不及时抢救,可导致病人死亡。
故应做好抢救准备,如常备盐酸肾上腺素、氢化可的松、中枢兴奋药和抗过敏药。