甜菊糖JECFA标准-欧美国际标准
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以上图谱中每种糖甙的出峰时间（分钟）和对应的糖甙名称如下： 3.42 (Rebaudioside D 莱包迪甙 D)，7.60 (Rebaudioside A 莱包迪甙 A),8.08 (Stevioside 甜菊甙), 9.72 (Rebaudioside F 莱包迪甙 F)，10.72 (Rebaudioside C 莱包迪甙 C), 11.73 (Dulcoside A 杜尔克甙 A),15.62 (Rubusoside 悬钩子甙), 21.57(Rebaudioside B 莱包迪甙 B)，23.23 (Steviolbioside 甜菊双糖甙)。 附件：(1) 欧美食品饮料著名企业在以上规格基础上，对有害金属残留特别要求如下：
峰值识别和计算 将样品溶液的出峰与含有 9 种甜菊糖甙的基准溶液的出峰时间（见附后图谱）相对比，确定 样品溶液中各个出峰对应的糖甙。算出样品溶液中 9 种糖甙对应的峰面积，算出甜菊甙标准 品溶液和莱包迪甙 A 标准品溶液的峰面积。
按照以下公式，计算样品中莱包迪甙 A 之外的 8 种糖甙中每一种糖甙的百分比： %X = ［Ws/W］x ［fxAx/As］x 100
流动相：比例为 32:68 的乙腈和磷酸钠缓冲液（规格：10mmol/L,pH 值 2.6）的混合液。 磷酸钠缓冲液的配置方法：将 2.76 克磷酸二氢钠溶解到 2 升水中，加入磷酸将 pH
值调整到 2.6
流速：1 毫升/每分钟。 检测器：210 nm 紫外检测。 色谱柱温度：40℃ 记录大约 30 分钟的检测图谱。
检测成分含量： 干重基础上以上 9 种糖甙的含量总和不少于 95%。
产品说明：白色或浅黄色粉末，无味或者具有轻微特有的味道。比蔗糖甜 200-300 倍。 功能用途：用作甜味剂。
溶解性：易溶于水
甜菊甙和莱包迪甙 A： 通过下述步骤得到的液相色谱的主峰符合甜菊甙和莱包迪甙 A。 pH 值: 4.5-7.0 之间 (1/100 的溶液)。
标准品溶液的配制：精确称取 50 毫克甜菊甙标准品和 50 毫克莱鲍迪甙 A 标准品，分别放入 50 毫升的容量瓶中，然后加入 7:3 的水乙腈溶液进行溶解至 50 毫升刻度。
样品溶液的配制：精确称取 50－100 毫克甜菊甙样品，放入 50 毫升的容量瓶中，然后加入 7:3 的水乙腈溶液进行溶解至 50 毫升刻度。
β-Glc-β-Xyl(2→1) │ β-Glc(3→1)
杜尔克甙 A
β-Glc
β-Glc-α-Rha(2→1)
悬钩子甙
β-Glc
β-Glc
甜菊双糖甙
H
β-Glc-β-Glc(2→1)
注：甜菊醇(R1=R2=H)是甜菊糖甙的配糖基。Glc、Rha 和 Xyl 分别表示葡萄糖、鼠李糖和木 糖。
分子量：甜菊甙 ：804.88 莱包迪甙 A: 967.03
总灰分： 不超过 1%。 干燥失重：不超过 6% (105℃, 干燥 2 小时) 溶剂残留：甲醇不超过 200 mg/kg，乙醇不超过 5000 mg/kg。 砷： 不超过 1 mg/kg。用原子吸收法测定。 铅： 不超过 1 mg/kg。用 AAS/ICP-AES 技术测定。
2
检测步骤：按照以下液相色谱条件检测每种糖甙的含量。
甜菊糖甙国际标准
甜菊糖甙的国际标准是在 2010 年召开的 JECFA 第 73 届会议上制定的，并在 FAO JECFA 出版的(2010)第 10 本专著中发表，用于替代 2008 年召开的 JECFA 第 69 届会议上制定并在 FAO JECFA 出版的(2008)第 5 本专著中发表的甜菊糖甙的摄入规格。在 2008 年召开的 JECFA 第 69 届会议上，确定了每日允许摄入量为 0-4 mg/kg 体重 (以甜菊醇表示)。
按照以下公式，计算样品中莱包迪甙 A 的百分比： %莱包迪甙 A = ［WR/W］x ［Ax/AR］x 100
公式中：
3
X 代表每种糖甙 Ws 是甜菊甙标准品溶液中甜菊甙的干重(mg) WR 是莱包迪甙 A 标准品溶液中莱包迪甙 A 的干重(mg) W 是样品溶液中样品的干重(mg) As 是甜菊甙标准品溶液的峰面积 AR 是莱包迪甙 A 标准品溶液的峰面积 Ax 是样品溶液每种糖甙的峰面积 fx 是每种糖甙的分子量与甜菊甙分子量的比值： 1.00 (甜菊甙), 1.20 (莱包迪甙 A), 1.00 (莱包迪甙 B)，1.18 (莱包迪甙 C), 1.40 (莱包迪甙 D)，1.16 (莱包迪甙 F)， 0.98 (杜尔 克甙 A), 0.80 (悬钩子甙), 0.80 (甜菊双糖甙)。 计算甜菊糖甙总量的百分比(将 9 种糖甙的百分比相加) 含有 9 种糖甙的基准溶液图谱供参考： 使用的色谱柱规格：Capcell pak C18 MG II 样品溶液浓度：莱包迪甙 A 浓度 0.1 毫克/毫升，其它糖甙浓度 0.5 毫克/毫升。
1
│ β-Glc(3→1)
莱包迪甙 B
H
β-Glc-β-Glc(2→1)
│
β-Glc(3→1)
莱包迪甙 C
β-Glc
β-Glc-α-Rha(2→1) │ β-Glc(3→1)
莱包迪甙 D
β-Glc-β-Glc(2→1)
β-Glc-β-Glc(2→1) │ β-Glc(3→1)
莱包迪甙 F
β-Glc
食品添加剂国际编码系统分配给甜菊糖甙的代码：INS No.960
产品定义： 甜菊糖甙是从甜叶菊的叶子提取的。甜叶菊叶子经热水浸泡提取后，含水提取 物经吸附树脂吸附和浓缩甜菊糖甙成分。吸附在树脂上的甜菊糖甙用溶剂醇洗脱，产品在甲 醇或者含水酒精中重结晶。可采用离子交换树脂方法对产品进行提纯，最终产品可采用喷雾 Leabharlann Baidu燥塔进行干燥。
铅 Pb<100 ppb, 砷 As<20 ppb, 汞 Hg<10 ppb, 镉 Cd<10 ppb (2) 对于重结晶提纯的莱包迪甙 A 产品，３种杂甙限量如下：莱包迪甙 B<0.3%, 甜菊 双糖甙<0.3%, 莱包迪甙 D<1% (3) 常温下在水中的溶解度>1% （即：100 毫升水至少溶解１克甜菊糖甙）。
试剂：乙腈，在 210nm 下检测透光度>95%.
标准品规格： 甜菊甙标准品：干重纯度>99% 莱鲍迪甙 A 标准品：干重纯度>99% 含有 9 种甜菊糖甙的基准溶液：包含甜菊甙、莱鲍迪甙 A、莱鲍迪甙 B、莱鲍迪甙 C、莱鲍迪 甙 D、莱鲍迪甙 F、杜尔克甙 A、悬钩子甙和甜菊双糖甙。用 7:3 的水乙腈溶液将含有 9 种甜 菊糖甙的标准溶液进行稀释，以便用来确定各个糖甙的出峰时间。标准品可在日本 Wako 公司 和美国 ChromaDex 公司买到。
检测步骤： 在以下条件下注入 5μl 的样品溶液。
色谱柱：Shiseido 公司的 Capcell pak C18 MG II 型色谱柱或者 Phenomenex 公司的 Luna 5μ C18(2) 100A 型色谱柱或者相当规格的色谱柱(长度：250 毫米;内径：4.6 毫米,填 料粒度：5μm)。
C.A.S.登录号：甜菊甙：57817-89-7 莱包迪甙 A：58543-16-1
化学分子式： 甜菊甙：C38H60O18 莱包迪甙 A：C44H70O23
化学结构式： 甜菊糖甙 9 种成分的结构式如下：
化合物名称
R1
R2
甜菊甙 莱包迪甙 A
β-Glc β-Glc
β-Glc-β-Glc(2→1) β-Glc-β-Glc(2→1)
4
甜菊甙和莱包迪甙 A 是甜菊糖甙的主要糖甙成分，其它相关的糖甙包括莱包迪甙 B、莱 包迪甙 C、莱包迪甙 D、莱包迪甙 F、杜尔克甙 A、悬钩子甙和甜菊双糖甙。甜菊糖甙中这几 种成分的含量通常低于甜菊甙和莱包迪甙 A。
化学名称： 甜菊甙: 13-[(2-O-β–D-glucopyranosyl-β–D-glucopyranosyl)oxy] kaur-16-en-18-oic acid, β-D-glucopyranosyl ester 莱包迪甙 A: 13-[(2-O-β–D-glucopyranosyl-3-O-β–D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosyl)oxy] kaur-16-en-18-oic acid, β-D-glucopyranosyl ester
峰值识别和计算 将样品溶液的出峰与含有 9 种甜菊糖甙的基准溶液的出峰时间（见附后图谱）相对比，确定 样品溶液中各个出峰对应的糖甙。算出样品溶液中 9 种糖甙对应的峰面积，算出甜菊甙标准 品溶液和莱包迪甙 A 标准品溶液的峰面积。
按照以下公式，计算样品中莱包迪甙 A 之外的 8 种糖甙中每一种糖甙的百分比： %X = ［Ws/W］x ［fxAx/As］x 100
流动相：比例为 32:68 的乙腈和磷酸钠缓冲液（规格：10mmol/L,pH 值 2.6）的混合液。 磷酸钠缓冲液的配置方法：将 2.76 克磷酸二氢钠溶解到 2 升水中，加入磷酸将 pH
值调整到 2.6
流速：1 毫升/每分钟。 检测器：210 nm 紫外检测。 色谱柱温度：40℃ 记录大约 30 分钟的检测图谱。
检测成分含量： 干重基础上以上 9 种糖甙的含量总和不少于 95%。
产品说明：白色或浅黄色粉末，无味或者具有轻微特有的味道。比蔗糖甜 200-300 倍。 功能用途：用作甜味剂。
溶解性：易溶于水
甜菊甙和莱包迪甙 A： 通过下述步骤得到的液相色谱的主峰符合甜菊甙和莱包迪甙 A。 pH 值: 4.5-7.0 之间 (1/100 的溶液)。
标准品溶液的配制：精确称取 50 毫克甜菊甙标准品和 50 毫克莱鲍迪甙 A 标准品，分别放入 50 毫升的容量瓶中，然后加入 7:3 的水乙腈溶液进行溶解至 50 毫升刻度。
样品溶液的配制：精确称取 50－100 毫克甜菊甙样品，放入 50 毫升的容量瓶中，然后加入 7:3 的水乙腈溶液进行溶解至 50 毫升刻度。
β-Glc-β-Xyl(2→1) │ β-Glc(3→1)
杜尔克甙 A
β-Glc
β-Glc-α-Rha(2→1)
悬钩子甙
β-Glc
β-Glc
甜菊双糖甙
H
β-Glc-β-Glc(2→1)
注：甜菊醇(R1=R2=H)是甜菊糖甙的配糖基。Glc、Rha 和 Xyl 分别表示葡萄糖、鼠李糖和木 糖。
分子量：甜菊甙 ：804.88 莱包迪甙 A: 967.03
总灰分： 不超过 1%。 干燥失重：不超过 6% (105℃, 干燥 2 小时) 溶剂残留：甲醇不超过 200 mg/kg，乙醇不超过 5000 mg/kg。 砷： 不超过 1 mg/kg。用原子吸收法测定。 铅： 不超过 1 mg/kg。用 AAS/ICP-AES 技术测定。
2
检测步骤：按照以下液相色谱条件检测每种糖甙的含量。
甜菊糖甙国际标准
甜菊糖甙的国际标准是在 2010 年召开的 JECFA 第 73 届会议上制定的，并在 FAO JECFA 出版的(2010)第 10 本专著中发表，用于替代 2008 年召开的 JECFA 第 69 届会议上制定并在 FAO JECFA 出版的(2008)第 5 本专著中发表的甜菊糖甙的摄入规格。在 2008 年召开的 JECFA 第 69 届会议上，确定了每日允许摄入量为 0-4 mg/kg 体重 (以甜菊醇表示)。
按照以下公式，计算样品中莱包迪甙 A 的百分比： %莱包迪甙 A = ［WR/W］x ［Ax/AR］x 100
公式中：
3
X 代表每种糖甙 Ws 是甜菊甙标准品溶液中甜菊甙的干重(mg) WR 是莱包迪甙 A 标准品溶液中莱包迪甙 A 的干重(mg) W 是样品溶液中样品的干重(mg) As 是甜菊甙标准品溶液的峰面积 AR 是莱包迪甙 A 标准品溶液的峰面积 Ax 是样品溶液每种糖甙的峰面积 fx 是每种糖甙的分子量与甜菊甙分子量的比值： 1.00 (甜菊甙), 1.20 (莱包迪甙 A), 1.00 (莱包迪甙 B)，1.18 (莱包迪甙 C), 1.40 (莱包迪甙 D)，1.16 (莱包迪甙 F)， 0.98 (杜尔 克甙 A), 0.80 (悬钩子甙), 0.80 (甜菊双糖甙)。 计算甜菊糖甙总量的百分比(将 9 种糖甙的百分比相加) 含有 9 种糖甙的基准溶液图谱供参考： 使用的色谱柱规格：Capcell pak C18 MG II 样品溶液浓度：莱包迪甙 A 浓度 0.1 毫克/毫升，其它糖甙浓度 0.5 毫克/毫升。
1
│ β-Glc(3→1)
莱包迪甙 B
H
β-Glc-β-Glc(2→1)
│
β-Glc(3→1)
莱包迪甙 C
β-Glc
β-Glc-α-Rha(2→1) │ β-Glc(3→1)
莱包迪甙 D
β-Glc-β-Glc(2→1)
β-Glc-β-Glc(2→1) │ β-Glc(3→1)
莱包迪甙 F
β-Glc
食品添加剂国际编码系统分配给甜菊糖甙的代码：INS No.960
产品定义： 甜菊糖甙是从甜叶菊的叶子提取的。甜叶菊叶子经热水浸泡提取后，含水提取 物经吸附树脂吸附和浓缩甜菊糖甙成分。吸附在树脂上的甜菊糖甙用溶剂醇洗脱，产品在甲 醇或者含水酒精中重结晶。可采用离子交换树脂方法对产品进行提纯，最终产品可采用喷雾 Leabharlann Baidu燥塔进行干燥。
铅 Pb<100 ppb, 砷 As<20 ppb, 汞 Hg<10 ppb, 镉 Cd<10 ppb (2) 对于重结晶提纯的莱包迪甙 A 产品，３种杂甙限量如下：莱包迪甙 B<0.3%, 甜菊 双糖甙<0.3%, 莱包迪甙 D<1% (3) 常温下在水中的溶解度>1% （即：100 毫升水至少溶解１克甜菊糖甙）。
试剂：乙腈，在 210nm 下检测透光度>95%.
标准品规格： 甜菊甙标准品：干重纯度>99% 莱鲍迪甙 A 标准品：干重纯度>99% 含有 9 种甜菊糖甙的基准溶液：包含甜菊甙、莱鲍迪甙 A、莱鲍迪甙 B、莱鲍迪甙 C、莱鲍迪 甙 D、莱鲍迪甙 F、杜尔克甙 A、悬钩子甙和甜菊双糖甙。用 7:3 的水乙腈溶液将含有 9 种甜 菊糖甙的标准溶液进行稀释，以便用来确定各个糖甙的出峰时间。标准品可在日本 Wako 公司 和美国 ChromaDex 公司买到。
检测步骤： 在以下条件下注入 5μl 的样品溶液。
色谱柱：Shiseido 公司的 Capcell pak C18 MG II 型色谱柱或者 Phenomenex 公司的 Luna 5μ C18(2) 100A 型色谱柱或者相当规格的色谱柱(长度：250 毫米;内径：4.6 毫米,填 料粒度：5μm)。
C.A.S.登录号：甜菊甙：57817-89-7 莱包迪甙 A：58543-16-1
化学分子式： 甜菊甙：C38H60O18 莱包迪甙 A：C44H70O23
化学结构式： 甜菊糖甙 9 种成分的结构式如下：
化合物名称
R1
R2
甜菊甙 莱包迪甙 A
β-Glc β-Glc
β-Glc-β-Glc(2→1) β-Glc-β-Glc(2→1)
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甜菊甙和莱包迪甙 A 是甜菊糖甙的主要糖甙成分，其它相关的糖甙包括莱包迪甙 B、莱 包迪甙 C、莱包迪甙 D、莱包迪甙 F、杜尔克甙 A、悬钩子甙和甜菊双糖甙。甜菊糖甙中这几 种成分的含量通常低于甜菊甙和莱包迪甙 A。
化学名称： 甜菊甙: 13-[(2-O-β–D-glucopyranosyl-β–D-glucopyranosyl)oxy] kaur-16-en-18-oic acid, β-D-glucopyranosyl ester 莱包迪甙 A: 13-[(2-O-β–D-glucopyranosyl-3-O-β–D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosyl)oxy] kaur-16-en-18-oic acid, β-D-glucopyranosyl ester