经HE染色的细胞涂片上再行免疫组化染色法简介
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肺 气肿 基 础 和 临床 研 究 提 供 一 种更 确 切 实用 的工
具。
【 参考 文献 】
［】Ｒ ｎ ａａ ｙＴ Ｃ ｏＣ ， ｈｍｍ ｌｐ ａＲ ， ｔａ． ｅ ｅｃａ ｌｔ ｎ １ ａｇｓｍ ， ｈ Ｙ Ｔ ｉ ｕａ ｐ Ｋ ｅ １ Ｇ ｎ ｔ ｂａｉ ｉ ｏ
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索 出一 种 在 一 张 涂 片 上 同 时 进 行 多种 抗 体 的免 疫 组 织 化 学 染 色 ， 保 留一 部 分 ＨＥ染 色 的方 法 ． 以 １ 会 诊 的 Ｈ 并 现 例 Ｅ涂 片 为 例介 绍 如 下 。
材 料 和 试 剂 ： 疫 组 化 油 笔 、 抗 和 试 剂 盒 。方 法 ： 切 免 一 将
Ｌ ｅｌＪ． ｕ ｉｅｅ ，２ ０ ，７ （） ７ ７ １６ ． ２ ｃｌ［ Ｅ ｒＪＢｏｈ ｍ ０ ４２ １９： ５ — ７ ７ ｓ］ １
［０ ０ ０ — ２收 稿 ，０ ０ ０ — ０修 回】 ［ 文 编 辑 ： 仲 琪 ２ １—６２ ２ １— ７ ２ 本 韩 王 庆法 】
个 案 与 短 篇
（ 迈新 公 司 的 Ｍａ Ｖ ｓ ｎ Ｍ 试 剂 盒 编号 Ｋ Ｔ ０ ０ 孵 育 １ ｉ ； ｘ ｉｏＴ ｉ Ｉ５ ２ ） ５ ｎ ｍ
经Ｈ Ｅ染 色 的细胞 涂 片上 再行免疫组化染 色法简介
成玉霞 ． 孙 青
＠Ｐ Ｓ ３ｍ ｎ ３次 ； Ａ Ｂ 洗 ｉｘ ⑨Ｄ Ｂ显色。
显 色 后 的 切 片 用 苏 木 素 复 染 核 ２ｍ ｎ 脱 水 透 明 后 ， 免 ｉ， 将
用 医药杂志 ２ １ 年 Ｑ 筮 鲞 箜 Ｑ 塑 ０１ ２ ２ ｒ 丛 ａ 』
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１ ７・ ５
成炎症 反应 。吸 烟 可 以激活 巨 噬 细胞 释放 炎性 介 质 ， 如肿 瘤坏 死 因子一 ｔＩ一 、 核 细胞 趋化 肽一 诸 Ｏ、 ８ 单 Ｌ １ 和 白三烯 Ｂ 。巨噬细 胞也 产生 蛋 白水解酶 ， 基质 ４ 如
键 是 用 免 疫 组 化 油笔 圈定 细胞 的 时 候 一 定 得 严 密 ， 证 抗 体 保 之间不能有交叉 ， 以保 证 结 果 的 可 靠 性 。这 种 方 法 同样 适 用
自福州迈新公 司 ）室温 １ ； Ｂ ， ⑥Ｐ Ｓ洗 ３ｍｉｘ ｈ ｎ ３次 ； 加二抗 ⑦
【 者单 位 ］２ ０ １ 山东 济 南 ， 佛 山 医 院病 理 科 （ 玉 霞 ， 青 ） 作 ５０４ 千 成 孙
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疫 组 化 染 色 部 分 用 小 盖 玻 片 封 片 ， 热 干 燥 。然 后 将 盖 玻 片 加
外 部 分 再 行 伊 红染 色 ，脱 水 透 明 的 同 时将 小 盖 玻 片 去 掉 ， 重
新 用 一 大 盖 玻 片封 片 。如 此 ， 张 同时 具 有 ３种 免 疫 组 化 染 １ 色 ， 且保 留了部分 Ｈ 而 Ｅ染 色 结 果 的细 胞 涂 片 成 功 完 成 （ 图 ［ 图 分 类 号】 Ｒ ４ ： ７ ０２ 中 ４ ６Ｒ ３ ． 【 献标 识 码 ］ Ｂ 文
金 属 蛋 白 酶 一 、 ９和 一 ２ 组 织 蛋 白 酶 Ｋ、 ２一 １， Ｌ及 Ｓ 。
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女： Ｊ ：
片 放 人 二 甲苯 中浸 泡 ， 到 盖 玻 片脱 落 （ 存 太 久 的 切 片 可 直 封 先 将 盖 玻 片 加 热 取下 再 放 入 二 甲苯 中 ） 溶 解 掉 中性 树 胶 后 ， 。 经 梯 度 乙 醇 水 化 后 ， 人 盐 酸 酒 精 （ ０ 乙醇 ， ％盐 酸 ） 去 放 ７％ １ 中 除Ｈ Ｅ染 色 。 片 经 水 洗 后 ， 免 疫 组 化 油 笔 （ 自福 州 迈 新 切 用 购 公 司） 圈定 ３处 需 要 行 免 疫 组 化 标 记 的 区 域 （ 据 原 Ｈ 根 Ｅ染
色涂片细胞情况确定 ） ，行免疫组化染色 ，步骤 如下 ：①用
０ １ ｒｏＸ一 ０ ．％Ｔｉ ｎ １０处 理 ３ ｎ 在 细 胞 膜 上 打 孔 ； Ｐ Ｓ洗 ｔ ０ｍｉ， ② Ｂ ３ｍ ｎ３次 ， Ｔ ｉｎ 一０ ｉｘ 把 ｒｏ Ｘ １０彻底 洗 掉 ； ３ ２２ 理 １ ｍｉ， ｔ ③ ％ＨＯ 处 ０ ｎ 去 除 内源 性 过 氧 化 物 酶 ； Ｐ Ｓ洗 ３ｍ ｎ ３次 ； 在 ３个 圈 ④ Ｂ ｉ￣ ⑤
１ ５ ～ ）
胸 腹 水 细 胞 涂 片通 常 行 ＨＥ染 色诊 断 ， 时 需 再 进 行 免 有
疫 组 织 化 学 染 色 以 满 足 鉴 别 诊 断 之 用 。但 由 于 再 次 取 材 受
限， 往往 使 工 作 陷 于 被 动或 无 法 进 行 。笔 者 在 工 作 中成 功摸
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４ ３． ７
Ｌｒ ｉ ｎ等研 究证 明慢 性阻 塞性肺 疾病 患者 巨噬细 胞合
成释放 炎 性介 质 的能 力更 强 ， 随着 反 复 的烟 草烟 并 雾暴露 ， 这种 活性会 进一 步加 强圈 。近年研 究认 为细
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于经过 Ｈ Ｅ染 色 的组 织 切 片 再 进 行 免 疫 组 化 染 色 ． 是 需 根 只
据 抗 体 要求 进行 修 复 ， 用 ｔ Ｘ １ ０处理 。 不 ｏ 一０ ｎ
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定 区域 分 别 加 上 不 同 的 一 抗 （ Ｋ５６、 Ｃ 和 Ｃａｒｔ ｉ 购 Ｃ ／ ＬＡ ｌ ｉ ｎ均 ｅｎ
图 ４ Ｃ ｌ ｔ ｉ 间 图 ５ 保 留 的 ＨＥ ａｒ ｉ ｎ ｅｎ
皮 细胞 （ ＋）
染 色 细 胞
这 种 染 色 方 法 在 取材 受 限 的情 况 下 不 失 为 一 种 良策 ． 关
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胞 凋亡 是肺 气肿 发 生机 制 之一 ， 已有 资料 证 实 吸烟
可诱 发 Ⅱ型肺 泡上 皮细胞 凋 亡［ ６ １ 。 由于 肺 气 肿 患病 者 数 多 、 死 率 高 ， 病 已成 为 全 球 性 的公 共 卫生 问题 ， 因此 深 入肺 气肿 发 病机 理 研 究具 有重 要 的临床 和社会 意义 。 全球 ８ ％的肺气 肿 ０ 患者 与长 期大量 吸 炯有关 。吸烟诱 发 的小 鼠肺气 肿 模 型能较 好地 模 拟人 类肺 气 肿 的发 病过 程 ， 能 为 可
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肺 气肿 基 础 和 临床 研 究 提 供 一 种更 确 切 实用 的工
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【 参考 文献 】
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［０ ０ ０ — ２收 稿 ，０ ０ ０ — ０修 回】 ［ 文 编 辑 ： 仲 琪 ２ １—６２ ２ １— ７ ２ 本 韩 王 庆法 】
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（ 迈新 公 司 的 Ｍａ Ｖ ｓ ｎ Ｍ 试 剂 盒 编号 Ｋ Ｔ ０ ０ 孵 育 １ ｉ ； ｘ ｉｏＴ ｉ Ｉ５ ２ ） ５ ｎ ｍ
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金 属 蛋 白 酶 一 、 ９和 一 ２ 组 织 蛋 白 酶 Ｋ、 ２一 １， Ｌ及 Ｓ 。
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Ｌｒ ｉ ｎ等研 究证 明慢 性阻 塞性肺 疾病 患者 巨噬细 胞合
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可诱 发 Ⅱ型肺 泡上 皮细胞 凋 亡［ ６ １ 。 由于 肺 气 肿 患病 者 数 多 、 死 率 高 ， 病 已成 为 全 球 性 的公 共 卫生 问题 ， 因此 深 入肺 气肿 发 病机 理 研 究具 有重 要 的临床 和社会 意义 。 全球 ８ ％的肺气 肿 ０ 患者 与长 期大量 吸 炯有关 。吸烟诱 发 的小 鼠肺气 肿 模 型能较 好地 模 拟人 类肺 气 肿 的发 病过 程 ， 能 为 可
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