高效液相色谱常见故障排除及维护保养PPT课件
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排气泡，溶剂需脱气 更换密封垫 清洗或更换混合器 拧紧接口 更换
（二）、从色谱图的异常情况
推测
1.峰前沿
现象 判断
故障排除
柱性能下降
更换色谱柱
保护柱失效 峰前沿
换柱芯
进样体积太大或 降低进样体积或降低 样品浓度太高 样品浓度
2.峰拖尾
现象 判断
柱性能下降
故障排除 更换色谱柱
保护柱失效
换柱芯
色谱柱或保护柱 清洗柱或保护柱，必
判断 缓冲液浓度太低 系统没到达平衡 进样器问题 环境温度变化
峰变宽 漏夜
出现两个或多个 未被完全分离的 物质的峰
检测器时间常数 太大
故障排除 增加浓度 使系统到达平衡 检查进样器 使用柱温箱 检查漏夜的位置并维 修
选择其它色谱条件以 改善分离效果
使用较小的时间常数
4.峰分叉
现象 判断
故障排除
柱性能下降
检测池被污染或 用甲醇或其他强极性
有气体
的溶剂冲洗流通池
现象 判断
测定的波长选择 有误 基线漂 移
系统泄漏 样品中有强保留 的物质
故障排除
使用分光光度计说明 背景吸收，如背景值 高，说明流动相含有 紫外吸收化合物导致 基线漂移。使用的流 动相应在紫外截止波 长以外，或更换溶剂
检查并进行维修
用强度合适的溶剂清 洗色谱柱
泵流速设定太低 设定正确的流速
色谱柱选择不恰
当
压力值 低
柱温过高
更换恰当的色谱柱 降低柱温
系统漏液
检查漏液位置并维修
流动相使用不当 改变流动相
4.压力不稳
现象 判断
压力变 化重现 采用梯度 性不好
泵内有 气泡
溶剂脱气不适当
压力波 泵密封垫损坏
动
溶剂混合器故障
漏液
连接口太松 管路损坏
故障排除
所引起的压力是正常
解
流动相脱气不充 分
故障排除 分析之前应有足够的 时间使系统平衡 使用柱温箱、将系统 置于恒温、空气对流 小的环境 清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂
脱气重新平衡系统
现象
判断
故障排除
流动相配比不当 或流速变化
更改配比或流速
柱被污染
冲洗柱或更换柱
基线漂
移
固定相流失
为说明问题存在，用 一段连接管路代替色 谱柱，通流动相检测 基线
冲洗柱或更换柱
溶剂配比不合适 调节溶剂配比
进样体积太大或 样品浓度太高
减小进样体积
9.保留时间不断变化
现象 判断
流速变化
系统没有达到平 衡 保留时 间不断 柱被污染 变化 流动相被污染
故障排除 重新设定流速,检查泵 是否正常工作
分析之前应有足够的 时间使系统平衡
冲洗柱或更换柱
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂
高效液相色谱常见故障排除及 维护保养
一、高效液相色谱仪器出现故障可以 从多方面入手
1.从部件的运转情况推测，如压力、流速 的变化
2.从色谱图的异常情况推测，如出峰时间、 峰形
3.从数据结果中分析
（一 ）、从压力变化判断
1.压力无
现象 判断
故障排除
电源不通 面版灯 不亮 接头松脱
检查电源 拧紧接头
11.无规则基线噪音
现象 判断
系统不稳或没有 达到平衡
系统泄漏
无规则
基线噪 音
流动相污染或分 解
柱被污染
色谱柱填料流失 或阻塞
故障排除 分析之前应有足够的 时间使系统平衡
检查并进行维修
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂 冲洗柱或更换柱
泵流速设定太高 设定正确的流速
流动相使用不恰 当
使用恰当的流动相
缓冲结晶盐沉淀 冲洗
压力值 高
样品与流动相不 互溶
稀释或改变流动相
柱温太低
升高温度
色谱柱性能下降 换柱
现象 判断
溶剂贮液器中过
压力值 滤器脏
高
链接管路阻塞
故障排除 清洗 冲洗，必要时更换
进样阀阻塞
冲洗进样器
wenku.baidu.com
3.压力低
现象 判断
故障排除
7.鬼峰
现象
判断
样品前处理时产 生降解或混入杂 质
故障排除
用标准品对照、检查样 品处理过程，换新样品
色谱图
出现鬼 前一次进样的洗
峰
脱物
增加分析时间或梯度洗 脱、提高流速、如问题 仍存在，两次进样间用 强溶剂冲洗色谱柱
注射器脏
清洗注射器、冲洗进样 口
现象 判断
故障排除
流动相被污染
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂
系统泄漏
检查并进行维修
现象 判断
流动相脱气不够 充分
保留时
间不断 变化
室温变化
柱恒温箱设置有 误
故障排除
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂 使用柱温箱、将系统 置于恒温、空气对流 小的环境
设置正确的温度
10.基线漂移
现象 判断 系统不稳或没有 达到平衡
室温不稳
基线漂
移
流动相污染或分
柱被污染
色谱图 出现鬼
六通阀污染
峰
检测器污染
管路污染
流动相中含有稳 定剂或稳定剂变 化
清洗柱或更换柱 清洗六通阀 清晰检测器 冲洗
使用无防腐溶剂
8.保留时间变化
现象 判断
故障排除
系统不问或未达 分析之前应有足够的
到平衡
时间使系统平衡
室温波动大 保留时
间不重
复
柱被污染
使用柱温箱、将系统 置于恒温、空气对流 小的环境
无样品
加样品
检测器与数据处 理装置链接故障
检查并正确链接
6.负峰
现象 判断
故障排除
连接数据处理系 出现所 统信号线接反 有负峰 记录仪或检测器
信号极性相反
正确连接 改变极性设置
离子对分离体系
对峰的影响
出现一 个或几 个负峰
使用的流动相吸 收高
自动进样器注射
进空气
在流动相中溶解样品 使用流动相稀释样品 清洗自动进样器
峰拖尾 被污染
要时更换
色谱柱选择不当 选择恰当的色谱柱
流动相选择不当 选择恰当的流动相
3.峰变宽
现象 判断
故障排除
柱性能下降
更换色谱柱
保护柱失效
换柱芯
色谱柱或保护柱 峰变宽 被污染
色谱柱选择不当
清洗柱或保护柱，必 要时更换
选择恰当的色谱柱
流动相选择不当 选择恰当的流动相
流动相流速太低 调节流速
现象
更换色普柱
保护柱失效
换柱芯
色谱柱或保护柱 峰分叉 被污染
进样体积太大或 样品浓度太高
清洗柱或保护柱，必 要时更换
降低进样体积或降低 样品浓度
样品溶剂不溶流 改变溶剂或采用流动
动相
相溶解样品
5.无峰
现象
判断 检测器参数设置 错误
样品降解
故障排除
设置正确的检测器参 数
检查样品配制过程， 更换样品
无峰 自动进样器故障 检查进样器
泵头 漏液
接口太松 泵密封垫磨损
拧紧泵头螺丝 更换密封垫
现象
泵不送 溶剂
判断 泵头有气泡
使用的溶剂黏 性太高 溶剂贮液器中 过滤器脏 排空阀打开
控制器设定不 正确
流动相不够
故障排除 排气泡，溶剂需脱气 换低黏性溶剂 清洗贮液瓶、过滤器 关闭排空阀 设置正确 补足流动相
2.压力高
现象 判断
故障排除
（二）、从色谱图的异常情况
推测
1.峰前沿
现象 判断
故障排除
柱性能下降
更换色谱柱
保护柱失效 峰前沿
换柱芯
进样体积太大或 降低进样体积或降低 样品浓度太高 样品浓度
2.峰拖尾
现象 判断
柱性能下降
故障排除 更换色谱柱
保护柱失效
换柱芯
色谱柱或保护柱 清洗柱或保护柱，必
判断 缓冲液浓度太低 系统没到达平衡 进样器问题 环境温度变化
峰变宽 漏夜
出现两个或多个 未被完全分离的 物质的峰
检测器时间常数 太大
故障排除 增加浓度 使系统到达平衡 检查进样器 使用柱温箱 检查漏夜的位置并维 修
选择其它色谱条件以 改善分离效果
使用较小的时间常数
4.峰分叉
现象 判断
故障排除
柱性能下降
检测池被污染或 用甲醇或其他强极性
有气体
的溶剂冲洗流通池
现象 判断
测定的波长选择 有误 基线漂 移
系统泄漏 样品中有强保留 的物质
故障排除
使用分光光度计说明 背景吸收，如背景值 高，说明流动相含有 紫外吸收化合物导致 基线漂移。使用的流 动相应在紫外截止波 长以外，或更换溶剂
检查并进行维修
用强度合适的溶剂清 洗色谱柱
泵流速设定太低 设定正确的流速
色谱柱选择不恰
当
压力值 低
柱温过高
更换恰当的色谱柱 降低柱温
系统漏液
检查漏液位置并维修
流动相使用不当 改变流动相
4.压力不稳
现象 判断
压力变 化重现 采用梯度 性不好
泵内有 气泡
溶剂脱气不适当
压力波 泵密封垫损坏
动
溶剂混合器故障
漏液
连接口太松 管路损坏
故障排除
所引起的压力是正常
解
流动相脱气不充 分
故障排除 分析之前应有足够的 时间使系统平衡 使用柱温箱、将系统 置于恒温、空气对流 小的环境 清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂
脱气重新平衡系统
现象
判断
故障排除
流动相配比不当 或流速变化
更改配比或流速
柱被污染
冲洗柱或更换柱
基线漂
移
固定相流失
为说明问题存在，用 一段连接管路代替色 谱柱，通流动相检测 基线
冲洗柱或更换柱
溶剂配比不合适 调节溶剂配比
进样体积太大或 样品浓度太高
减小进样体积
9.保留时间不断变化
现象 判断
流速变化
系统没有达到平 衡 保留时 间不断 柱被污染 变化 流动相被污染
故障排除 重新设定流速,检查泵 是否正常工作
分析之前应有足够的 时间使系统平衡
冲洗柱或更换柱
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂
高效液相色谱常见故障排除及 维护保养
一、高效液相色谱仪器出现故障可以 从多方面入手
1.从部件的运转情况推测，如压力、流速 的变化
2.从色谱图的异常情况推测，如出峰时间、 峰形
3.从数据结果中分析
（一 ）、从压力变化判断
1.压力无
现象 判断
故障排除
电源不通 面版灯 不亮 接头松脱
检查电源 拧紧接头
11.无规则基线噪音
现象 判断
系统不稳或没有 达到平衡
系统泄漏
无规则
基线噪 音
流动相污染或分 解
柱被污染
色谱柱填料流失 或阻塞
故障排除 分析之前应有足够的 时间使系统平衡
检查并进行维修
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂 冲洗柱或更换柱
泵流速设定太高 设定正确的流速
流动相使用不恰 当
使用恰当的流动相
缓冲结晶盐沉淀 冲洗
压力值 高
样品与流动相不 互溶
稀释或改变流动相
柱温太低
升高温度
色谱柱性能下降 换柱
现象 判断
溶剂贮液器中过
压力值 滤器脏
高
链接管路阻塞
故障排除 清洗 冲洗，必要时更换
进样阀阻塞
冲洗进样器
wenku.baidu.com
3.压力低
现象 判断
故障排除
7.鬼峰
现象
判断
样品前处理时产 生降解或混入杂 质
故障排除
用标准品对照、检查样 品处理过程，换新样品
色谱图
出现鬼 前一次进样的洗
峰
脱物
增加分析时间或梯度洗 脱、提高流速、如问题 仍存在，两次进样间用 强溶剂冲洗色谱柱
注射器脏
清洗注射器、冲洗进样 口
现象 判断
故障排除
流动相被污染
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂
系统泄漏
检查并进行维修
现象 判断
流动相脱气不够 充分
保留时
间不断 变化
室温变化
柱恒温箱设置有 误
故障排除
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂 使用柱温箱、将系统 置于恒温、空气对流 小的环境
设置正确的温度
10.基线漂移
现象 判断 系统不稳或没有 达到平衡
室温不稳
基线漂
移
流动相污染或分
柱被污染
色谱图 出现鬼
六通阀污染
峰
检测器污染
管路污染
流动相中含有稳 定剂或稳定剂变 化
清洗柱或更换柱 清洗六通阀 清晰检测器 冲洗
使用无防腐溶剂
8.保留时间变化
现象 判断
故障排除
系统不问或未达 分析之前应有足够的
到平衡
时间使系统平衡
室温波动大 保留时
间不重
复
柱被污染
使用柱温箱、将系统 置于恒温、空气对流 小的环境
无样品
加样品
检测器与数据处 理装置链接故障
检查并正确链接
6.负峰
现象 判断
故障排除
连接数据处理系 出现所 统信号线接反 有负峰 记录仪或检测器
信号极性相反
正确连接 改变极性设置
离子对分离体系
对峰的影响
出现一 个或几 个负峰
使用的流动相吸 收高
自动进样器注射
进空气
在流动相中溶解样品 使用流动相稀释样品 清洗自动进样器
峰拖尾 被污染
要时更换
色谱柱选择不当 选择恰当的色谱柱
流动相选择不当 选择恰当的流动相
3.峰变宽
现象 判断
故障排除
柱性能下降
更换色谱柱
保护柱失效
换柱芯
色谱柱或保护柱 峰变宽 被污染
色谱柱选择不当
清洗柱或保护柱，必 要时更换
选择恰当的色谱柱
流动相选择不当 选择恰当的流动相
流动相流速太低 调节流速
现象
更换色普柱
保护柱失效
换柱芯
色谱柱或保护柱 峰分叉 被污染
进样体积太大或 样品浓度太高
清洗柱或保护柱，必 要时更换
降低进样体积或降低 样品浓度
样品溶剂不溶流 改变溶剂或采用流动
动相
相溶解样品
5.无峰
现象
判断 检测器参数设置 错误
样品降解
故障排除
设置正确的检测器参 数
检查样品配制过程， 更换样品
无峰 自动进样器故障 检查进样器
泵头 漏液
接口太松 泵密封垫磨损
拧紧泵头螺丝 更换密封垫
现象
泵不送 溶剂
判断 泵头有气泡
使用的溶剂黏 性太高 溶剂贮液器中 过滤器脏 排空阀打开
控制器设定不 正确
流动相不够
故障排除 排气泡，溶剂需脱气 换低黏性溶剂 清洗贮液瓶、过滤器 关闭排空阀 设置正确 补足流动相
2.压力高
现象 判断
故障排除