培养液中酵母菌种群数量的变化探究实验(公开课)

血细胞计数板的使用方法步骤
① 镜检计数室： 在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物， 则需清洗，吹干后才能进行计数。 ② 加样品： 将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻 片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘， 让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生 气泡，充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片 之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去。 ③ 计数： 稍待片刻（约5min），待酵母菌细胞全部沉降到计数 室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找 到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。
3、计算
以1mm×1mm×0.1mm型为例
计数室容积为0.1mm3，则每个小方格的容积 为1/4000 mm3 。
酵母细胞个数／1Baidu NhomakorabeaL =
100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数
80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数
例1 通常用血球计数板对培养液中酵母 菌进行计数，若计数室为 1mm×1mm×0.1mm方格，由400个小 方格组成。若多次重复计数后，算得每个 小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该 培养液中酵母菌总数有 个。
问题3：需要做重复实验吗？
要重复，获得平均值。（也可分组实验）
问题4：怎样记录结果？记录表怎样设计？
第 1天 第2天 第3天
第1组 第2组 -----第n组
第4天 第5天 第6天 第7天
平均值
问题5：如果一个小方格内酵母菌过多，难 以计数，应采取怎样的措施？ 摇匀试管取1mL酵母菌培养液稀释几倍 后，再用血球计数板计数。
探究：培养液中酵母菌种群数量的变化
目的要求 1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法 2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化 3、注意样方法的应用 4、体会影响种群数量变化的因素
探究过程
• 1．提出问题： 培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？
酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长，随着时间 • 2．作出假设： 的推移，由于资源和空间有限，呈“S”型增长。
血细胞计数板
大方格的长和宽各为1mm，深 度为0.1mm，即 1mm×1mm×0.1mm，其容积为 0.1mm3； 大方格的长和宽各为2mm，深 度为0.1mm，即 2mm×2mm×0.1mm，其容积为 0.4mm3
计数室通常也有两种规格
16×25型： 即大方格内分为 16中格，每一中格 又分为25小格
问题1：从试管中吸出培养液进行计数之前，
建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么？ 使培养液中的酵母菌分布均匀，减少
误差。
问题2：本探究需要设置对照吗？如果需要 请讨论对照组应怎样设计和操作；如果不 需要，请说明理由。
不需要，本实验旨在探究培养液中酵母菌在 一定条件下的种群数量变化，只要分组实验， 获得平均数值即可。
不管计数室是哪一种构造，其每一大方格都是由 16×25=25×16=400个小方格组成。
25×16型： 即大方格内分为 25中格，每一中格 又分为16小格。
2、计数
16×25型： 一般取四角的 四个中方格（100 个小方格）计数 25×16型： 一般计数四个角 和中央的五个中方 格（80个小方格） 的细胞数。
问题6：对于有压在小方格界线上的酵母菌 应当怎样计数？
相邻两边及顶角 “左上原则”
四）分析结果，得出结论： 将所得数据用曲线图表示出来，分析结 果是否支持你所做的假设。
探究结论：
三）设计并完成实验： （1）实验材料：
酵母菌菌种，无菌马铃薯培养液或肉汤培养液， 试管，血细胞计数板，滴管，显微镜
（2）实验原理：
①酵母菌是兼性厌氧微生物，有氧条件下能产生 较多CO2，在无氧条件下产生酒精和少量的CO2。 ②在理想环境中，酵母菌种群呈“J”型增长；自 然界中，酵母菌呈“S”型增长。 ③计算酵母菌数量可用抽样检测的方法。
2×108
例2 检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样 检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片 放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自 行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知 每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳 液体的总体积为0．1 mm3。
现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个 小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 5n×105 个／mL。
• 3．设计实验：
连续培养5天，每天用显微镜和血球计数 • 4．进行实验：
板计数出酵母菌种群密度
• 5．分析结果和
表达交流：
•
各小组汇报实验结果，结合前4天的结果， 画出酵母种群增长的曲线图并进行分析。
酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长，但 6．得出结论：随着时间的推移，由于资源和空间有限， 将呈“S”型增长，并最终将全部死亡。
（3）实验步骤：
①配制培养基：将10ml一定浓度的马铃薯培养液 或肉汤培养液加入试管中。 ②接种：将酵母菌接种到试管中的培养液中，并 放在适宜条件下连续培养培养7天。 ③计数：每天定时取样，采用抽样检测法，用血 细胞计数板计数。
一、血细胞计数板
血细胞计数板
血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数 量的仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻 片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽， 其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方 格网。