人骨髓间充质干细胞体外培养模型的建立和表型分析

经验交流

文章编号１００６－８１４７（２０11）０4-0458-03

人骨髓间充质干细胞体外培养模型的建立和表型分析

刘长乐1，李广平1，郑心田1，孟恒星2，邱录贵2，娄建石3

（1.天津医科大学第二医院心脏科，天津300211；2.中国协和医科大学血液病学研究所，天津300020；3.天津医科大学药理学教研室，天津300070）

关键词骨髓间充质干细胞；流式细胞术；培养模型中图分类号

Q813

文献标识码

B

骨髓（bone marrow ，BM ）

中包含有两类干细胞，即造血干细胞和间充质干细胞(mesenchymal stem cells ，MSCs)。MSCs 属混杂细胞群，其表面抗原标志尚未完全确定。MSCs 作为多能干细胞具有可塑性，有报道显示在细胞因子作用下可以在体外诱导分化为骨骼肌细胞、脂肪细胞、心肌细胞、上皮细胞和血管内皮细胞，并且参与体内组织新生、损伤修复

和重建[1]。本实验应用改进的密度梯度离心法、差异

贴壁法和酶消化法建立MSCs 的体外培养扩增模型，寻找高度特异性的表面抗原，以利于干细胞移植的广泛应用。1材料与方法

1.1材料（1）BM ：39岁男性健康志愿者5mL 。（2）仪器：FACScar 流式细胞仪（Beckman -Coulter ），倒置相差显微镜（OLYMPUS ），荧光显微镜（OLYM －PUS ）

，恒温培养箱（Forma Scientific ），高速低温离心胞系MHCC97-H 的增殖。骨髓间充质干细胞旁分泌物质或许通过分泌细胞因子影响肝癌细胞某一信号通路促进细胞增殖的。

AFP 是CBRH-7919肝癌细胞分泌的一种蛋白，本研究发现随着骨髓间充质干细胞旁分泌物质浓度的升高，AFP 也逐渐升高，表明骨髓间充质干细胞旁分泌物质也增强了7919肝癌细胞分泌AFP 的功能。

骨髓间充质干细胞促进肝癌细胞增殖的具体机制目前尚未明确，目前有以下几种学说：免疫抑制影响肿瘤基因的表达，分泌细胞因子以及参与肿瘤血管形成等[4-7]。邵志红等[5]发现大鼠骨髓间充质干细胞能通过影响Walker-256肝癌细胞VEGF 和nm23的表达,促进肝癌细胞的增殖。Li 等[6]发现人骨髓间充质干细胞是通过分泌细胞因子进而影响TGFβ信号通路促进肝癌细胞增殖的。尽管骨髓间充质干细胞对肝癌增殖的确切机制尚未明确，但有效地抑制骨髓间充质干细胞的促增殖作用具有重要的意义，其有可能成为新的抗癌靶点。笔者将继续研究骨髓间充质干细胞旁分泌物质促进肝癌细胞增殖的内在机制，为肝癌治疗带来新的希望。

参考文献：

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［2］乔玲，赵铁军，山长亮，等.人间充质干细胞抑制肝癌细胞增殖

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［3］陈双庆，王培军，李铭华，等.磁标记骨髓间充质干细胞对肝细

胞癌的抑制作用[J].临床放射学杂志，2009，28(10):1454

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mesenchymal stem cells favors tumor growth in allogeneic animals [J].Blood，2003,102(10):3837

［5］邵志红，王培军，李铭华，等.大鼠骨髓间充质干细胞移植对

Walker-256肝癌生长影响的实验研究[J].中华医学杂志，2009，89(7):491

［6］Li GC,Ye QH,Xue YH,et al.Human mesenchymal stem cells in-hibit metastasis of a hepatocel lular carcinoma model using the MHCC97-H cell line [J].Cancer Sci,2010,101(12):2546

［7］Zhu W,Xu W,Jiang R,et al.Mesenchymal stem cells derived from

bone marrow favor tumor cell growth in vivo [J].Exp Mol Pathol,2006,80(3):267

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cellular origin of hepatocellular carcinomas in a mouse model of carcinogenesis[J].World J Gastroenterol,2008,14(19):3015

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（2011-04-27收稿）

作者简介刘长乐（1979-），男，主治医师，硕士，研究方向：冠心病、心律失常；通信作者：李广平，Email ：tjcardiol@ 。

Ｖｏｌ．１7熏Ｎｏ．4Dec.２０11

天津医科大学学报

Journal of Tianjin Medical University

第１7卷4期２０11年12月

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