食品中人工合成着色剂的检测解决方案
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(参考GB/T 5009.35-2003《食品中合成着色剂的测定》)
合成色素以苯、甲苯、萘等化工产品为原料,经过磺化、硝化、卤化、偶氮化等一系列有机反应制成合成着色剂,合成着色剂有一定毒性,过多食用会危害人体健康,但由于人工合成着色剂成本低、色泽鲜艳、着色力强、色调多样,故被广泛使用;合成着色剂有严格的控制使用范围和最大使用量,因此食品中合成色素的准确测定具有重要意义。
对于食品中合成着色剂的检测目前可借鉴国标GB/T 5009.35-2003《食品中合成着色剂的测定》,分别采用高效液相色谱法,薄层色谱法,示波极谱法进行定性定量分析,其中高效液相色谱法前处理采用聚酰胺吸附法或液-液分配法进行色素提取。
迪马科技在参考国标的基础上,推出食品中人工合成着色剂的解决方案,该方案前处理采用聚合物基质亲水亲脂平衡反相固相萃取柱ProElut PLS 进行色素的提取,比国标方法更简便易行,提取效率更高,净化效果更好;同时对高效液相色谱检测方法进行了改进,分别采用迪马科技Inspire 和Diamonsil 两款反相色谱柱,梯度洗脱检测食品中人工合成着色剂,分离效果更优异,增加定性定量的准确性。
该方案特别适用于食品中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红和亮蓝等人工合成着色剂的检测。以下为迪马科技开发的食品中人工合成着色剂的检测解决方案,供您参考!
1 样品准备 1.1 可乐样品
取1 g 可乐(加热超声驱除二氧化碳),40 μL 甲酸于试管中,摇匀,作为上
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1.2 红薯粉样品
(1) 取2 g 样品 与20 mL 提取剂*混合,涡旋2 min ,超声提取10 min ,6000 rpm 下离心3 min ,收集上清液;
(2) 将下层残留物依次用10 mL 、10 mL 提取剂重复提取两次,合并三次提取上清液;
(3) 将上清液在45℃水浴条件下,减压蒸馏至6 mL ,再加入80 μL 甲酸,混匀,待净化。
提取剂*
:氨水+70%乙醇(1+99,体积比)。
2 SPE 柱净化——ProElut PLS 500 mg/6 mL (Cat.#:68005) 2.1 可乐样品SPE 柱净化流程
(1) 活化/平衡: 5 mL 甲醇活化,5 mL 水平衡,流出液弃去; (2) 上 样: 将待净化液加入小柱,流出液弃去;
(3) 淋 洗: 5 mL 2%甲酸水溶液,流出液弃去,将小柱抽干; (3) 洗 脱: 4 mL 2%氨水-甲醇溶液洗脱,收集流出液,2%氨水-甲醇溶
液调至中性;
(4) 重新溶解: 在40 ℃下用减压蒸馏将收集液浓缩至近干,然后用50%甲醇
水溶液定容至1 mL 后供HPLC 分析。
2.2 红薯粉样品SPE 柱净化流程
(1) 活 化: 5 mL 甲醇,5 mL 水活化; (2) 上 样: 加入待净化液,弃去流出液;
(3) 淋 洗: 加入4 mL 水,弃去流出液,将SPE 柱抽干; (4) 洗 脱: 加入6 mL 2%氨水甲醇溶液,收集流出液;
(5) 重新溶解: 将洗脱液在45 ℃下氮气吹至约0.5 mL ,再用水定容至1 mL ,
微孔滤膜过滤后供HPLC 分析。
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3 分析条件 色谱柱:
Inspire C18,250 × 4.6 mm ,5 μm (Cat#:81006) Diamonsil C18(2) 250 × 4.6 mm ,5 μm (Cat #:99603)
流 速: 1.0 mL/min 检测器:* UV 254 nm 柱 温: 35℃ 进样量: 20 μL
流动相: A :乙腈,B :0.02 mol/L 乙酸铵溶液
梯度
4添加回收结果
4.1 红薯粉添加回收结果
红薯粉中人工合成着色剂(添加水平为5 mg / kg )的添加回收结果 010
2030
Time (min)
0.000.020.040.060.08
V o l t s 1
2
3
4
5
6
人工合成着色剂10 ug/mL 的标准液相色谱图
Inspire C18,250 mm×4.6 mm ,5 μm (Cat#:81006)
1柠檬黄 2 苋菜红 3 胭脂红 4 日落黄 5 诱惑红 6 亮蓝
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010
2030
Time (min)
0.000.020.040.060.08
V o l t s 1
2
3
4
5
6
红薯粉中人工合成着色剂(添加水平5 mg / kg )的液相色谱图
010
2030
Time (min)
0.000.020.040.060.08
V o l t s
红薯粉中人工合成着色剂(空白)的液相色谱图
4.2可乐添加回收结果
*n :平行样品的数量
Inspire C18,250 mm×4.6 mm ,5 μm (Cat#:81006)
1柠檬黄 2 苋菜红 3 胭脂红 4 日落黄 5 诱惑红
6 亮蓝
Inspire C18,250 mm×4.6 mm ,5 μm (Cat# 81006)