卫生检验基础

第一章分析工作的质量保证

1、测定方法的检验和评价有以下7个方面：

1）准确度是反映该方法系统误差和随机误差大小的综合指标，它决定着分析结果的可靠性。

其评价方法通常有：

对标准物质进行测定；

加标回收率的测定；

用标准方法或不同类型的方法进行对照试验。

2）精密度指同一个人在同一实验条件下用同一方法重复分析同一均匀样品的结果之间的符合程度，分连续测定(日内)和重复测定(日间)两种。

3）灵敏度指试样单位浓度的改变所引起的测定信号的变化程度，亦即标准曲线的斜率b，b值越大，方法的灵敏度越高。

4）检出限是指对某一特定的分析方法，在给定的置信水平内，可以从样品中检测待测物质的最小浓度或最小量。

5）标准曲线的线性范围

6）干扰试验

7）稳定性试验

2、质量控制图用平均数±2s为警告限，平均数±3s为控制限

3、标准物质是已确定某一种或几种特性，用于校准测量器具、评价测量方法或确定材料特性量值的物质。

4、标准物质的作用：

①建立测量的溯源性；

②方法的研制和评价；

③制备标准曲线；

④校准分析仪器；

⑤分析研究的质量保证。

5、标准物质的选用原则：

基体组成——所选标准物质的基体应与样品接近；

浓度水平——上限和下限；准确度水平——无论何种标准物质，其准确度应比被测样预期的准确度高3~10倍。

第二章电位分析法

电位分析法的原理：原电池中的电动势与溶液的离子浓度呈线性关系。

第三章紫外-可见分光光度计

1、定性原理：化合物的分子结构不同，对光的吸收也不同。

定量原理：即郎伯-比尔定律当平行的单色光透过一定浓度的稀溶液时，溶液的吸光度和物质的浓度成正比。

2、紫外-可见分光光度计的基本结构：

1）光源

2）单色器即色散装置，常用的色散原件是棱镜和光栅。

3）吸收池

4）检测器

3、干扰校正方法：双波长分光光度法；背景模型法；内参比法；三点校正法；导数光谱法。

第四章荧光分析法

1、光致发光现象：指某些物质吸收了紫外或波长较短的可见光后会发射出与同分子吸收波长相同或不同的光的现象。

2、影响荧光强度的因素中，一般来说，溶液的荧光强度随着温度的降低而增强。

3、荧光熄灭是指由于荧光物质分子与溶剂分子或其他物质分子的相互作用而引起的荧光强度降低的现象。

4、时间分辨荧光分析的原理：由于不同分子的荧光寿命不同，可在激发和检测之间延缓一段时间，使具有不同荧光寿命的物质得以分别检测。

优点：如果选择适合的延缓时间可测定被测组分的荧光而不受其他光的干扰，在测定混合物中某一组分时的选择性比用化学法处理样品时更好，而且省去前处理的麻烦。

第五章原子发射光谱法

1、原子发射光谱法是将试样用热或电能激发，然后测量被测试样所发射的光辐射。根据它发射的谱线的波长可以进行定性分析，测量谱线的强度可以进行定量分析。

2、原子发射光谱分析的仪器主要由光源、进样系统、分光系统、检测系统组成。

3、光源的两个作用：

能使待测物质充分原子化，以便获得自由原子（通常指基态）；

能使原子激发到较高的能态。

第六章原子吸收分光光度法

1、原子吸收光谱：当原子被外界能量激发时，最外层电子吸收一定能量而跃迁到较高的能级上，原子即处于激发态，原子对辐射能选择性吸收产生的光谱称为原子吸收光谱。

2、原子发射光谱：而激发到较高能级的电子很不稳定，在极短时间内又跃回到原能级，同时辐射出原吸收的能量，产生原子发射光谱。

3、原子吸收光谱变宽的原因：

第一，自然变宽

第二，热变宽，又称多普勒变宽，是由于原子在空间作无规则热运动所引起的。

第三，碰撞变宽，又称压力变宽，在一定蒸气下粒子间相互碰撞引起的谱线变宽。

4、原子吸收分光光度计的四大组成部分：光源、原子化器（反映器）、分光系统和检测系统。

5、对光源的要求是：发射谱线的半宽度要小于吸收线半宽度，辐射强度大，稳定性好、光源纯度高、使用寿命长。常用空心阴极灯和无极放电灯等。

第七章毛细管气相色谱法

1、色谱法的原理主要是利用物质在流动相与固定相之间分配系数的差异而实现分离的。

2、保留时间：由进样开始到某个组分的色谱峰的顶点时间间隔称为该组分的保留时间。

第八章反相高效液相色谱法

高效液相色谱法对流动相的一般要求：

①对待测样品有适当的溶解度；

②不与样品和固定相发生化学反应；

③与检测器相匹配；④黏度低；⑤纯度高。

第九章毛细管电泳

1、电泳：在电解质溶液中，带电粒子以不同的速度向其所带电荷相反方向迁移的现象。

2、电泳迁移速度不仅与电场强度和介电性质有关，还与粒子的有效电荷及其大小和形式有关。

3、电泳淌度是单位场强度下粒子的平均电泳强度。

第十章质谱法

1、质谱是按照物质的质量(m)和电荷数(z)的比值(称电荷比，m/z)顺序排列成的图谱。

2、质谱仪器的主要性能指标有两个：

一是，质谱仪的质量范围，质量范围越大的仪器可测定范围越大；

二是，质量分析器的分辨率。

第十一章色谱-质谱联用法

气-质联用时对载气的要求主要有：

①必须是化学惰性；

②必须不干扰质谱图；

③应该具有能使载气气流中的样品富集的某些物质；

④不干扰总离子流的检测。

第十二章元素分析中的样品处理技术

毛发样品制备：清洗的原则是既要保证将头发外部的金属元素清洗干净，又要保证头发内部的金属元素不受损失。

第十三章微量有机分析中的样品处理技术

1、将样品预处理的主要作用：

1）将待测物质有效地从样品基质中释放出来；

2）除去杂质、纯化样品；

3）富集浓缩样品或进行衍生化；

4）使样品的形式及所用的溶剂符合分析仪器方法的要求。

第十四章卫生微生物学概论

1、微生物种群之间相互作用的类型：种间共处、偏利共生、互利共生、互同共生、竞争、拮抗、捕食、寄生。

2、例如：流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在同一血琼脂平板上培养时既是偏利共生关系。

第十五章卫生指标菌及卫生微生物检验原则

1、指标菌或称指示菌是在常规卫生监测中用于指示卫生状况及安全性的指示性微生物。

2、常用指示菌：

①一般卫生状况指标菌，包括菌落总数等；

②粪便污染指标菌，包括大肠菌群等；

③其他指标菌。

3、菌落总数是指被测样品在一定条件下(如培养基成分、培养时间、温度、PH、需养性等)培养后，单位重量(g)、体积(ml或m³)、表面积(cm²)内所含菌落的总数。

4、大肠菌群系指一群能在37℃、24h内发酵乳糖、产酸产气，需氧或兼性厌氧的革兰阴性无芽胞杆菌。

5、大肠菌群细菌主要来源于人畜粪便。

6、根据耐热性区别大肠菌群：在自然环境中生后的大肠菌群培养的最适温度为25℃左右，如在37℃培养仍可生长，但如将培养温度再升高至44.5℃则不再生长。而直接来自粪便的大肠菌群细菌，习惯于37℃左右生长，如将培养温度升高至44.5℃亦仍可继续生长。

7、控制菌是指在某些检品中规定不得检出的菌类。

8、样品的采集与送检的原则：

采集的样品必须有代表性；采集必须在无菌操作下进行；

采集数量视不同种类、按国家标准或有关规定而定；采集前或后应立即做好标记；

采集后样本应及时送到微生物检验室，一般不超过3h。

第十六章水微生物学

1、水中细菌的共同特征：

1）革兰阴性菌占绝大多数，约为90%；

2）细菌结构上一般具有鞭毛和纤毛，适于运动和黏附、聚集；

3）细菌在水中常附着于悬浮颗粒上或底泥、淤泥上，也常相互聚集在一起形成星状、片状或球状体；

4）可在低营养环境中生长，营养要求较低。

2、副溶血性弧菌主要生活于海水、海底沉积物、海产品中，有嗜盐性。

3、水细菌学检验指标：细菌总数；大肠菌群数；致病菌检验。