糖化血红蛋白在糖尿病诊治中的应用
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糖化血红蛋白检测方法
色谱法※ 离子交换层析法 亲和层析法
免疫凝集法
高压液相法※
离子捕获法 电泳法
亲和层析法
1.特异性强
2.不受异常血红蛋白的干扰
3.适合于临床科室
免疫凝集法
抗原抗体直接测定总血红蛋白Hb中的糖化血红蛋白HbA1c的百分含
量测定吸光度来表示凝集量,可用于全自动生化分析仪上进行测定。 专用的仪器也有Bayer的DCA-2000
胰岛素治疗 胰岛移植
糖化蛋白测定
定义 组成
糖类物质通过非酶促作用将糖基加到蛋白质的 氨基酸集团上形成的糖基化物
(1)糖化血红蛋白:HbA (95%-97%) HbA1(HbA1a、HbA1b、HbA1c)(5%-7%) HbA0 难以与普通血红蛋白分离(90%) HbA2 (<3%) HbF (<1%) (2)糖化血清蛋白:GS与其他蛋白(清蛋白、膜蛋白、晶状体) 结合形成酮胺,又称果糖胺(FA)。
电泳法 电泳方法如毛细管电泳也能分离检测 糖化血红蛋白和血红蛋白质的变异体
但目前尚无商品化和具有批量样本通 过能力的仪器面世
临床尚未应用
糖化血红蛋白检测注意事项
1
注意溶血、贫 血、透析患者 样本和干扰因 素和Hb检测浓 度范围例如:
NycoCard®READER Ⅱ(6-18g/100ml)
糖尿病诊断步骤
高危人群:肥胖高血压高血脂
DM疑似者
临床“三多一少”者
随机血糖PRG(mmol/L)
<6.1
6.1—11.1
>11.1
OGTT(75g)
糖耐量减低IGT
正常
每年检查PRG、糖尿病相关指标和心血管危险因子
DM
糖尿病治疗
原则:早期治疗、长期治疗、综合治疗、措施个体化 教育治疗 糖 总热量(kcal)=(身高cm-105cm)×(20~30) 饮食治疗 尿 蛋白质(g)=总热量×15%÷4
TOSOH HLC-723G7型全自动糖化血红蛋白分析仪 基于高效液相层析法原 理,使用阳离子交换柱 通过与不同带电离子作 用来将血红蛋白组份分 离。利用3种不同盐浓 度所形成的梯度洗脱液 使得包括血红蛋白A1c、 A1、F等在内的血红蛋 白中的多种成份很快被 分离成6个部分,并用 检测器对分离后的各种 血红蛋白组分的吸光度 进行检测。
2
注意GHbA1降 低:溶血性及 失血性贫血, 慢性肾衰,慢 性持续性低血 糖症等
3
NycoCard®REA DERⅡ仪器显 示“Hb浓度太 低或太高”纠 正方法。
问题?
糖化血红蛋白(我们科室现有检测方法)单位?
参考值范围(我们科室现有检测方法)??
糖化血红蛋白的测定结果以百分率(4.5-5.7%)表 示,指的是和葡萄糖结合的血红蛋白占全部血红蛋 白的比例。非糖尿病患者的糖化血红蛋白的水平为 4-6%;许多研究发现糖尿病患者如查能将糖化血红 蛋白水平降低至8%以下,糖尿病的并发症将大大降 低,如果糖化血红蛋白>9%,说明患者待续性高血糖, 会发生糖尿病性肾病,动脉硬化,白内障等并发症, 并有可能出现酮症酸中毒等急性合并症。
病 饮 脂肪(g)=总热量×25%÷9 食 碳水化合物(g)=总热量×60%÷4 处 方 按1/5、2/5、2/5三餐分配
运动锻炼 口服药物治疗 1.磺脲类(sulfonylureas,SUs)
2.双胍类(biguanides) 3.α葡萄糖苷酶抑制剂 4.噻唑烷二酮(thiazolidinedione,TZD)
意义
(1) GHbA1:①糖尿病诊断和监测指标(反映4-12W血糖); ②鉴别糖尿病及应激性高血糖 (2) FA:①反映2-3W血糖; ②当血红蛋白异变体如HbS或HbC时会使RBC寿命下 降,GHbA1意义不大,而FA很有价值
糖化蛋白在DM诊治中的意义
可为较长时间段的血糖提供回顾性评估,而不受短 期血糖浓度波动影响并不能用于糖尿病的诊断 监测糖尿病微小血管并发症、慢性并发症的发生和 发展都有积极意义 在糖尿病筛选普查中对轻型、“隐性”糖尿病有早 期提示作用 在细胞死亡前,血液中糖化血红蛋白含量保持相对 不变,而与抽血时间,病人是否空腹,是否使用胰 岛素等因素无关
高血糖 糖尿
能量不足饥饿感 胆固醇合成↑
易感染
多
食 乏力
高脂血症 动脉硬化
多
尿
脱水
电解质丢失↑ 口渴 血容量↓ 循环失代偿 肾功能损伤
多 体重↓
饮
酸中毒
糖尿病实验室检查
检查项目 尿糖测定 血糖测定 方法与临床意义 与肾阈高低有关 血浆、血清糖化比全血高15% 备注 肾糖阈↑—DM肾病;肾糖阈↓—妊娠 反应瞬间血糖
NycoCard®READERⅡ糖化血红蛋白检测仪
红蛋白和总血红蛋白的比率检测。
离子交换层析法
英 国 REWSCIENTIFIC 公 司 DS5 糖 化 血 红 蛋 白 仪 取 得 NGSP认 证 (全美国糖化血红
蛋白标准化项目 ),NGSP和
IFCC两种标准可供选择,取 得DCCT相同检测方法(美国 糖尿病控制及并发症试验)。
血糖高于正常范围而又未达到诊断糖尿 病标准者
①RBC中Hb N端的缬氨酸与GS结合形成 ②RBC半衰期为120天 ①血浆白蛋白与GS反应形成FA ②白蛋白半衰期为19天 受外源性胰岛素的影响 胰岛素与C肽从胰岛素细胞中等分子生成 和释放,故查C肽/胰岛素不受外源性胰 岛素影响
其他
不同类型糖耐量实验
糖化血红蛋白在糖尿病诊治Hale Waihona Puke Baidu的应用
糖尿病定义
糖尿病是由于多种原因引起以慢性高血糖为特征的临床综合征。
糖尿病病理生理
胰 岛 素 分 泌 绝对(相对) 不 足
蛋白质合成↓、分解↑ 生长停滞伤 提抗力↓ 口难以愈合
葡萄糖利用↓、肝糖原分解↑、糖异生↑
脂肪合成↓、分解↑ 脂肪酸↑ 脂肪酸氧化↑ 酮体生成↑ 酮症
离子捕获法
糖化血红蛋白与相应抗体 结合后,联以荧光标记 物,而在I M X反应孔中的 玻璃纤维预先包被了高分 子的四胺合物,使纤维表 面带正电,使前述的反应 复合物吸附在纤维表面, 经过一系列的清洗后测定 其荧光强度,从而得到糖 化血红蛋白的浓度。
Abbott公司IMX
高压液相法
高压液相方法的仪器有Bio-Rad公司的VariantⅡ等,可全自动分离测定 糖化血红蛋白及血蛋白的变异体和亚型,但仪器的操作保养要求较高。
色谱法
微粒色谱的测试原理:
当全血样品加入到带有锌离子的
甘氨酸酰氨(Glycinamide)缓冲 液配制的与兰色染料结合的硼酸
复合物的R1试剂中时,红细胞将
被全部破坏、溶解,血红蛋白全 部被沉淀,形成微粒,其中糖化
血红蛋白HbA1c特异地与硼酸复合
物结合呈兰色,而未被糖化的血 红蛋白呈红色。通过计算糖化血
葡萄糖耐量实验 (OGTT、IVGTT)
糖化血红蛋白测定 (GHbA1) 果糖胺测定(FA) 血浆胰岛素测定 血浆C肽测定
GS 75g P.O.(50% GS 0.5g/kg I.V.),不同时间测血糖
与血糖浓度、病情控制正相关, 反应4~12W血糖总水平 与血糖浓度正相关,反映取血前 2~3W血糖总水平 评价B细胞功能 检查胰岛素、C肽可反应B细胞功 能,但不能作为诊断依据 抗体,尿酮体、微量白蛋白,血 脂、血酮、血液流变学等