激素测定方法

甲状腺激素及有关蛋白测定

甲状腺分泌的激素包括甲状腺素(thyroxine,T4)和少量三碘甲腺原氨酸(triiodothyronine, T3)，它们都是含碘的氨基酸衍生物。甲状腺上皮细胞可通过细胞膜上的“碘泵”主动摄取血浆中的碘。经细胞中过氧化物酶的作用，碘可转变生成形式尚不清楚的“活性碘”，故临床常利用抑制过氧化物酶的药物如硫氧嘧啶、他巴唑等治疗甲状腺功能亢进（hyperthyroidism）。“活性碘”与存在于甲状腺滤泡上皮细胞内的甲状腺球蛋白（thyroglobulin，TG）上的酪氨酸残基结合（碘化），逐步缩合生成T4、T3。含有T4和T3的TG随分泌泡进入滤泡腔中储存。在垂体分泌的促甲状腺激素（thyroid stimulating hormone,TSH）的作用下，TG被蛋白酶水解，释放出T4、T3，扩散入血。

血液中的甲状腺激素中90%为T4，T3仅为2%。T3的主要来源是周围组织中T4在5’位脱碘后生成。但是T3的生理活性比T4高，占正常甲状腺激素总活性的2/3。如T4在5位上脱碘，则生成反三碘甲腺原氨酸（reverse T3, rT3），rT3基本没有甲状腺激素的生理活性，但在甲状腺疾病和许多非甲状腺疾病时出现有病理意义的变化。

血浆中的T3和T4绝大部分与血浆甲状腺素结合球蛋白（thyroxin binging globulin, TBG）结合运输，但只有游离的甲状腺激素才有生物活性。血清中甲状腺激素测定包括总T4（TT4），总T3（TT3），游离T4（FT4），游离T3（FT3）和反T3(rT3)，FT4和FT3不受血液TBG的影响，直接反映甲状腺功能状态。另外还有TBG和抗甲状腺自身抗体检测等。

㈠适应症：用于评价甲状腺功能状态以及对甲状腺功能亢进（甲亢）、甲状腺功能低下（甲低）、自身免疫性甲状腺疾病、其他疾病所致甲状腺功能异常等疾病的诊断、疗效观察及预后估计。

㈡标本采集：血清或血浆，一般多用血清。

㈢检测方法：甲状腺激素的测定大多采用标记免疫的方法直接测定血清中的激素浓度。包括放射免疫法(RIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、均相酶放大免疫法(EMIT)、化学发光免疫分析(LIA)及荧光免疫法等。

㈣参考范围

1、TT4：①新生儿 129~271 nmol/L，②婴儿90~194 nmol/L，③1~5岁 94~194 nmol/L，④6~10岁 83~172 nmol/L，⑤10~60岁65~155 nmol/L；⑥妊娠5个月 79~227 nmol/L；⑦＞60岁：男 65~129nmol/L，女 71~135 nmol/L（RIA）。

2、TT3：①脐带血 0.5~1.1 nmol/L，②新生儿 1.2~4.0 nmol/L，③1~5岁1.5~4.0 nmol/L，④6~10岁 1.4~3.7 nmol/L，⑤11~15岁 1.2~3.2 nmol/L，⑥15~60岁1.8~2.9 nmol/L，⑦大于60岁：男 1.6~2.7 nmol/L女 1.7~3.2 nmol/L （RIA）。

3、FT4：10.3~25.8 pmol/L，FT3 2.16~6.78 pmol/L，rT3 0.38~1.16 nmol/L，TBG 15~34 mg/L（RIA）。

㈤临床意义

1、 TT4、TT3

⑴血清TT4的增加见于甲亢和TBG增加，TT4降低见于甲低、TBG减少、甲状腺炎、药物影响（如服用糖皮质激素等）。

⑵血清TT3是诊断甲亢最可靠和灵敏的单项指标，尤其是对诊断T3型甲亢的病人有特殊意义，这类甲亢病人血清TT4浓度不高但TT3却显著增高。

⑶低T3综合征：在饥饿、慢性消耗性疾病（如肝硬化、未控制的糖尿病等）时，外周T4转变为rT3增加，转变为T3减少，此时血清T4正常而T3减少，即所谓的低T3综合征。

2、FT4、FT3

总的来说，FT4和FT3的临床意义与TT4和TT3相同，但因不受血清TBG影响，而是代表具有生物活性的甲状腺激素的含量，因而具有更重要的临床价值。

⑴甲状腺功能亢进：对于诊断甲亢，FT4、FT3均较TT4、TT3灵敏，对治疗中的甲亢病人的观察，FT4、FT3的价值更大。

⑵甲状腺功能减退：大多数口服T4治疗的病人，FT4在服药后1~6小时血液浓度达到高峰，而且与服药剂量有关。FT4可能是用甲状腺素做替代性治疗时最好的检测指标。

⑶妊娠：孕妇的血中TBG明显增加，因此FT4、FT3的检测较TT4、TT3更为准确。

3、rT3：

rT3与T3在化学结构上属异构体，但T3是参与机体代谢的重要激素，是耗氧的，而rT3则几乎无生理活性。rT3增加，T3减少，可以降低机体氧和能量的消耗，可能是机体的一种保护性机制。

⑴甲亢时血清rT3增加，与血清T4、T3的变化基本一致。而部分甲亢初期或复发早期仅有rT3的升高。

⑵甲低时血清rT3降低。rT3是鉴别甲低与非甲状腺疾病功能异常的重要指标之一。

⑶部分非甲状腺疾病，如心肌梗塞、肝硬化、糖尿病、尿毒症、脑血管意外和一些恶性肿瘤病人，血清中rT3增加，T3/rT3比值降低，这一指标对上述疾病程度的判断、疗效观察及预后估计均有意义。

⑷羊水中rT3浓度可作为胎儿成熟的指标。如羊水中rT3低下，提示先天性宫内甲低。

b4、甲状腺结合球蛋白( TBG)：甲亢时血清TBG可能降低，治疗后逐步恢复正常；甲低时则相反。非甲状腺疾病中，肝炎、妊娠、服用避孕药时血清TBG可以增加。而严重感染、重症营养不良、重症糖尿病、恶性肿瘤、急性肾功能衰竭、呼吸衰竭及肢端肥大症时，血清TBG降低。

5、抗甲状腺自身抗体：包括抗甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)和抗甲状腺微粒体抗体(TM-Ab)，其参考范围：TG-Ab结合率<30%，TM-Ab结合率<15%。①主要用于自身免疫性甲状腺疾病的诊断，如慢性淋巴性甲状腺炎（桥本病）时TG-Ab和/或TM-Ab 的阳性率高达80%~90%。②约1/4的甲状腺癌病人TG-Ab和/或TM-Ab阳性。③在非甲状腺疾病中，如系统性红斑狼疮、恶性贫血、重症肌无力、糖尿病等，TG-Ab 和TM-Ab也可阳性。

6、甲状腺球蛋白（TG）：TG是存在于甲状腺滤泡腔内的一种糖蛋白，其分子中酪氨酸残基可被碘化缩合生成T3、T4。血中TG仅为少量。参考范围：血清17.2±3.5 mg/L。①甲状腺癌时血清TG明显升高，尤其对治疗效果追踪及甲状腺癌转移有重要意义。②血清TG的增高是判断亚急性甲状腺炎活动度的参考指标，炎症控制后TG降至正常。③初发甲亢、甲亢复发或治疗未缓解者血清TG升高。如治疗后TG水平不下降，则复发的可能性很大。

㈥评价与问题：

⑴血清中的T4和T3 99%以上与血浆蛋白结合，以TBG为主。所以TBG的含量可以影响TT4和TT3。如当妊娠、应用雌激素或避孕药、急性肝炎、6周内新生儿