组织胚胎学绪论精品PPT课件
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缺点：
形态不如石蜡切片。 要求有冰冻切片机。
其他光镜可用制片方法：
简单，实用，不需要特殊设备，有时候 必须用
涂片（血液，体液） 触片 撕片、铺片 装片、磨片。
光学显微镜的结构
机械系统 光学系统
目镜（10x,5x,16x） 物镜 （4x,10x,20x,40x,60x,100x) 聚光器 光源
扫描电镜下的结构
切片上还可以做：
组织化学 免疫组织化学 原位杂交 放射自显影
组织化学（切片上的化学反应）
碘酸-雪夫氏PAS反应显示多糖
切片上多糖＋HIO4（氧化）→多醛；多 醛＋无色品红（shiff试剂）→紫红色沉 淀（显示多糖存在）
碘酸-雪夫氏PAS反应
紫红沉淀（显示多糖存在）
光学显微镜种类
普通光镜（明视野）。 暗视野（dark field）显微镜。 相差显微镜。 荧光显微镜。 激光共焦扫描显微镜（Laser Scanning
Confocal Microscopy） 微分干涉显微镜（differential-
interference microscope）
明视野效果，无标本处最亮
暗视野效果，无标本处最暗，（花粉管）
相差效果，可 以观察透明 （不染色）标 本。
用于观察活细 胞
SUCCESS
THANK YOU
2020/12/13
可编辑
31
荧光效果，
用各种不同的荧光染 料
万能显微镜，其实是将几种功能通 过配件集中在一台显微镜上
倒置显微镜，其实是将标本置于 物镜上方，细胞培养常用
H：苏木精,Hematoxylin碱性，蓝色 E：伊红eosin酸性，红色
嗜碱性:染成蓝色,如:细胞核（核酸，酸 性）
嗜酸性:染成红色,如细胞质 （碱性蛋 白），
HE染色的肾小管 红色为嗜酸性的胞浆，蓝色为嗜碱性的核
冰冻切片
1冰冻（常用液氮） 2切片
优点：
保存酶活性， 抗原保存好，免疫组化应用较多。
1600倍
组织学制片技术
固定 脱水-梯度乙醇 透明-二甲苯 透蜡-石蜡 包埋（蜡块） 切片（5μm）
组织学染色技术
脱蜡-二甲苯 入水-梯度乙醇 苏木精染色 梯度乙醇到95% 伊红染色 脱水 透明 封片 观察
HE染色（苏木精-伊红染色）
用苏木精与伊红染色，是最常用的组织 学，病理学染色方法。
显微摄影，现在更多利用了数码相机
电子显微镜
透射电镜TEM(transmission electron microscope)
电子束代替光线，波长短，电磁透镜代替光 学透镜。
超薄切片，重金属染色（铅，铀盐），吸收 电子。
光学显微镜下结构
电子显微镜下结构
透射电子显微镜。 分辨率1.44埃， 放大倍率80万倍
人眼在25cm明视距离分辨率为0.2mm，
光镜分辨率为0.2μm，电镜的分辨率比 光镜的分辨率大约提高1000X- 0.2nm 。
D=0.61λ/(N*sin(α/2))
α：为入射孔径角，即光线从样品进入 透镜的张角：α<140o,
λ：光波波长，λ>450nm, N：折光率，空气 N=1,香柏油（N=1.5), 光镜最大分辨率，D最小值0.2μm
物镜
最重要，最贵的部位。 物镜上数字，以40倍为例：
40/0.65， 放大倍数，镜口率（数值孔径，N.A) 160/0.17 机械管长，允许盖玻片厚度。
分辨率的问题
分辨率（Resolving power）又称分辨本 领，是用来表示人眼或仪器能够区分开 的被观察物体上两点间的最小距离。所 能分辨的两点间距离越小，见到的细节 就越多，分辨率就越高。
电镜与光镜的比较
显微镜 分辨本领 光源
透镜
真空
成像原理
LM 200nm 可见光 玻璃透镜 不要求真空 利用样品对光的吸收形
（400-700）
成明暗反差和颜色变化
TEM 0.1nm 电子束 电磁透镜 要求真空 利用样品对电子的散射
（0.01-0.9）
1.33x10-5～ 和透射形成明暗反差
1.33x10-3Pa
其他一些特殊染色： 胭脂红染色,粘液染色,类淀粉染色,含铁血黄素
银染，黑色为银颗粒位置
免疫组织化学： immunohistochemistry
利用抗原抗体特异性结合而显示抗原存 在。
利用标记技术，如将荧光素（酶）与抗 体结合（钥匙），
如果切片上某个部位有抗原（锁），当 抗原抗体结合后，洗去多余抗体，荧光 显示部位即是抗原（某种蛋白）部位。
动物组织胚胎学
绪论
Introduction
一、概念、内容（What）及意义（Why）
动物组织学 是研究动物机体的微细结构与其功能的
科学,又称显微解剖学(microscopical anatomy)。
动物胚胎学 是研究动物个体的发生及发育规律的
科学。 包括胚前发育、胚胎发育、胚后发育三个阶段。
研究内容 包括细胞、基本组织、器官组织、家禽
到的组织细胞内的结构。
二、组织学与胚胎学的研究方法（How）
（一）固定组织研究法
是将拟观察材料预先制成切片、涂片、铺片、磨片标本， 再用光镜进行观察的技术。包括徒手切片、石腊切片法、火 棉胶切片法、冰冻切片法等，石腊切片法最为常用。
组织学histology
主要方法
固定组织研究 活组织研究
观察手段
流式细胞术（flow cytometry,FCM）
计量单位
组织学常用的计量单位： 10-3， m 毫米 10-6， μ微米 10-9，n纳米(埃,10-10 m） 10-12，p皮 如μm(微米），1／1000mm。
光学显微镜 电子显微镜
光学显微镜石蜡切片法
石蜡切片：paraffin section
固定fix 切片section 染色dye
固定：将组织用化学试剂浸泡，使组织 内蛋白质等成分凝固或沉淀。
染色：组织中某些成分与染料化学结合 或物理吸附而显色。
40倍
100倍
400倍
1000倍
器官组织结构特点及哺乳动物胚胎学概论。
课程安排
细胞 cell ------细胞学 cytology 组织 tissue ------基本组织学 器官 organ ------器官组织学 胚胎学
名词术语：
光镜结构/显微结构：普通光学显微镜
下观察到的组织细胞内的结构。
电镜结构/超微结构：电子显微镜下观察
形态不如石蜡切片。 要求有冰冻切片机。
其他光镜可用制片方法：
简单，实用，不需要特殊设备，有时候 必须用
涂片（血液，体液） 触片 撕片、铺片 装片、磨片。
光学显微镜的结构
机械系统 光学系统
目镜（10x,5x,16x） 物镜 （4x,10x,20x,40x,60x,100x) 聚光器 光源
扫描电镜下的结构
切片上还可以做：
组织化学 免疫组织化学 原位杂交 放射自显影
组织化学（切片上的化学反应）
碘酸-雪夫氏PAS反应显示多糖
切片上多糖＋HIO4（氧化）→多醛；多 醛＋无色品红（shiff试剂）→紫红色沉 淀（显示多糖存在）
碘酸-雪夫氏PAS反应
紫红沉淀（显示多糖存在）
光学显微镜种类
普通光镜（明视野）。 暗视野（dark field）显微镜。 相差显微镜。 荧光显微镜。 激光共焦扫描显微镜（Laser Scanning
Confocal Microscopy） 微分干涉显微镜（differential-
interference microscope）
明视野效果，无标本处最亮
暗视野效果，无标本处最暗，（花粉管）
相差效果，可 以观察透明 （不染色）标 本。
用于观察活细 胞
SUCCESS
THANK YOU
2020/12/13
可编辑
31
荧光效果，
用各种不同的荧光染 料
万能显微镜，其实是将几种功能通 过配件集中在一台显微镜上
倒置显微镜，其实是将标本置于 物镜上方，细胞培养常用
H：苏木精,Hematoxylin碱性，蓝色 E：伊红eosin酸性，红色
嗜碱性:染成蓝色,如:细胞核（核酸，酸 性）
嗜酸性:染成红色,如细胞质 （碱性蛋 白），
HE染色的肾小管 红色为嗜酸性的胞浆，蓝色为嗜碱性的核
冰冻切片
1冰冻（常用液氮） 2切片
优点：
保存酶活性， 抗原保存好，免疫组化应用较多。
1600倍
组织学制片技术
固定 脱水-梯度乙醇 透明-二甲苯 透蜡-石蜡 包埋（蜡块） 切片（5μm）
组织学染色技术
脱蜡-二甲苯 入水-梯度乙醇 苏木精染色 梯度乙醇到95% 伊红染色 脱水 透明 封片 观察
HE染色（苏木精-伊红染色）
用苏木精与伊红染色，是最常用的组织 学，病理学染色方法。
显微摄影，现在更多利用了数码相机
电子显微镜
透射电镜TEM(transmission electron microscope)
电子束代替光线，波长短，电磁透镜代替光 学透镜。
超薄切片，重金属染色（铅，铀盐），吸收 电子。
光学显微镜下结构
电子显微镜下结构
透射电子显微镜。 分辨率1.44埃， 放大倍率80万倍
人眼在25cm明视距离分辨率为0.2mm，
光镜分辨率为0.2μm，电镜的分辨率比 光镜的分辨率大约提高1000X- 0.2nm 。
D=0.61λ/(N*sin(α/2))
α：为入射孔径角，即光线从样品进入 透镜的张角：α<140o,
λ：光波波长，λ>450nm, N：折光率，空气 N=1,香柏油（N=1.5), 光镜最大分辨率，D最小值0.2μm
物镜
最重要，最贵的部位。 物镜上数字，以40倍为例：
40/0.65， 放大倍数，镜口率（数值孔径，N.A) 160/0.17 机械管长，允许盖玻片厚度。
分辨率的问题
分辨率（Resolving power）又称分辨本 领，是用来表示人眼或仪器能够区分开 的被观察物体上两点间的最小距离。所 能分辨的两点间距离越小，见到的细节 就越多，分辨率就越高。
电镜与光镜的比较
显微镜 分辨本领 光源
透镜
真空
成像原理
LM 200nm 可见光 玻璃透镜 不要求真空 利用样品对光的吸收形
（400-700）
成明暗反差和颜色变化
TEM 0.1nm 电子束 电磁透镜 要求真空 利用样品对电子的散射
（0.01-0.9）
1.33x10-5～ 和透射形成明暗反差
1.33x10-3Pa
其他一些特殊染色： 胭脂红染色,粘液染色,类淀粉染色,含铁血黄素
银染，黑色为银颗粒位置
免疫组织化学： immunohistochemistry
利用抗原抗体特异性结合而显示抗原存 在。
利用标记技术，如将荧光素（酶）与抗 体结合（钥匙），
如果切片上某个部位有抗原（锁），当 抗原抗体结合后，洗去多余抗体，荧光 显示部位即是抗原（某种蛋白）部位。
动物组织胚胎学
绪论
Introduction
一、概念、内容（What）及意义（Why）
动物组织学 是研究动物机体的微细结构与其功能的
科学,又称显微解剖学(microscopical anatomy)。
动物胚胎学 是研究动物个体的发生及发育规律的
科学。 包括胚前发育、胚胎发育、胚后发育三个阶段。
研究内容 包括细胞、基本组织、器官组织、家禽
到的组织细胞内的结构。
二、组织学与胚胎学的研究方法（How）
（一）固定组织研究法
是将拟观察材料预先制成切片、涂片、铺片、磨片标本， 再用光镜进行观察的技术。包括徒手切片、石腊切片法、火 棉胶切片法、冰冻切片法等，石腊切片法最为常用。
组织学histology
主要方法
固定组织研究 活组织研究
观察手段
流式细胞术（flow cytometry,FCM）
计量单位
组织学常用的计量单位： 10-3， m 毫米 10-6， μ微米 10-9，n纳米(埃,10-10 m） 10-12，p皮 如μm(微米），1／1000mm。
光学显微镜 电子显微镜
光学显微镜石蜡切片法
石蜡切片：paraffin section
固定fix 切片section 染色dye
固定：将组织用化学试剂浸泡，使组织 内蛋白质等成分凝固或沉淀。
染色：组织中某些成分与染料化学结合 或物理吸附而显色。
40倍
100倍
400倍
1000倍
器官组织结构特点及哺乳动物胚胎学概论。
课程安排
细胞 cell ------细胞学 cytology 组织 tissue ------基本组织学 器官 organ ------器官组织学 胚胎学
名词术语：
光镜结构/显微结构：普通光学显微镜
下观察到的组织细胞内的结构。
电镜结构/超微结构：电子显微镜下观察