01总胆红素(TBIL)_钒酸盐氧化法SOP

总胆红素(TBIL)检测（钒酸氧化法）

1.原理

钒酸盐测定钒酸盐作用前后吸光度差异，可求得样品中的胆红素的浓度。

胆红素钒酸胆绿素

2. 标本采集和准备

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

血清：未抗凝试管（红色试管）

血浆：肝素抗凝（绿色试管）

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3.标本储存：2-8℃可稳定保存12小时，避光-20℃可稳定3个月。

4.标本运输：密封，室温运输。

5.标本拒收标准：污染、溶血、标本量不足标本不宜作此项检测。

6.实验材料：

6.1试剂及组成：本科使用南昌百特生物高新技术股份有限责任公司TBIL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

6.2试剂准备：试剂为即用式。

6.3试剂稳定性与贮存

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在2-8℃可保存15天。

6.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。

6.5 校准品：使用英国廊道公司校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件

6.6质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件

7.仪器设备：迪瑞CS-600B

8.操作步骤：

见CS-600B常规样本测定程序

总胆红素检测试剂盒自动生化分析仪CS-600B主要参数见附录1

9.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。

10. 计算方法：

△Au

总胆红素(μmol/L) = ×校准液浓度

△As

11. 操作性能

11.1 精密度：

批内CV<4.5%，批间CV<5％。

11.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤7%。

11.3线性范围：

0---513μmol /L。

11.4方法局限性：

内源性干扰物溶血、脂血、黄疸对测试结果无明显影响。血红蛋白>4g/L,会影响检测结果准确性。12. 超出范围结果处理：本法线性上限为513μmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。

13. 病危报警值的处理当新生儿血清标本测定结果总胆红素〉340μmol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。

14.注意事项

14.1试剂若不慎溅到人体表面如皮肤、眼睛等，必须用清水冲洗，如果误食则需要到医院治疗。

14.2若试剂过期，请勿使用。

14.3当试剂空白吸光度A450nm>0.1时，判断试剂失效。

14.4本试剂仅用于体外诊断，不能做单试剂用。

14.5阳光直射1小时，标本中胆红素降低50%。

15. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。

16.参考范围：

3.4-20.5μmol/L

参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

17.临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。

溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert 综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使60～70%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。

18. 参考文献

《全国临床检验操作规程》第三版中华人民共和国医政司编2006年11月

附录1:总胆红素检测试剂盒自动生化分析仪应用参数