食品毒理学实验指导DOC

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食品毒理学实验bk

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食品毒理学实验指导食品毒理学实验(一)毒理学实验的目的和要求食品毒理学实验的目的是通过实验掌握有关的毒理学实验技术和方法,培养分析问题和解决问题的能力。

为了提高实验效率,特作如下要求:1.课前预习实验指导,对实验目的、方法、步骤应有充分了解,明确本次实验的目的和理论根据,作到心中有数,避免实验中出现忙乱和差错。

2.进入实验室后,首先检查实验桌面上的仪器、器皿、药品等实验器材是否齐全及有无损坏。

3.实验时务必安静,不能喧哗,作到整齐整洁,有条有理。

严格按照实验指导的步骤进行操作,准确计算用药量,注意爱护实验动物,节约实验材料和药品。

4.仔细阅读实验指导,根据实验指导进行小组分工,尽可能每人都有操作机会。

5.及时地、准确地将观察到的数据和反应如实记录。

实验完毕,根据实验结果写出实验报告。

6.实验后整理实验器材,作好实验室的清洁卫生工作。

实验室规则1.实验室须保持安静、整齐和清洁。

2.实验完毕将实验台、桌、仪器、用具等擦洗干净。

仪器、用具如有损坏,应报告老师,各组轮流打扫实验室。

关好门窗,切断水源及电源。

3.节约实验用品,爱护器材及动物。

4.随时注意安全操作。

实验一、食品毒理学实验基础常用实验动物的捉取方法小鼠:用右手提起尾部,放在鼠笼盖上或其他粗糙面上,向后上方轻拉,此时小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面,迅速用左手拇指和食指捏住小鼠颈部皮肤并以小指和手掌尺侧夹持其尾根部固定手中。

兔:捉拿时一手抓其颈背部皮肤,轻轻将兔提起,另手托其臀部。

二、实验动物的选择毒理学中研究外源化学物的基础毒性主要是进行体内试验,常选用大白鼠和小白鼠、家兔。

根据不同实验目的,可选用不同实验动物。

例如,皮肤刺激实验,可选用家兔,因为家兔为皮肤刺激实验的敏感动物。

动物应注明来源及品系。

除特殊要求外,动物年龄一般选用初成年者:大白鼠、小白鼠为出生后2~3个月左右,体重分别为180~240g和18~24g;家兔为2~2.5kg,猫为1.5~2kg;狗为出生后一年左右。

食品毒理学实验指导-给学生08级

食品毒理学实验指导-给学生08级

食品毒理学实验指导(08级)1、食品毒理学基本实验技术[实验目的] 了解和掌握实验动物的基本知识及动物实验基本操作技术。

[实验材料]一、动物:小鼠,大鼠或家兔二、器材:手术剪、手术镊、灌胃针、注射器及针头、开口器、导尿管、酒精棉球、玻璃匀浆器等。

[实验内容]一、健康动物特征观察二、实验动物的捉拿三、实验动物的性别鉴别四、实验动物的灌胃操作五、实验动物血样采集六、实验动物的处死方法七、实验动物的解剖及脏器分离八、组织匀浆的制备2、小鼠骨髓细胞微核试验[实验目的]掌握实验原理、意义,了解实验方法。

[实验原理]正常细胞在有丝分裂中期时,染色体均排列在赤道板附近,分裂后期便分成两份分别向两极移动,并在终期分别形成两个子细胞核。

由于某些物理因素或化学因素的作用,使分裂间期细胞染色体受到某种损伤,在中期就会观察到染色体断片。

细胞进入分裂后期,这种断片落后于向两极移动的染色体而滞留在赤道板附近。

当其它染色体分别形成子细胞核时,这些断片就形成规则的次核。

由于这些次核比主核小得多,顾称之为微核。

微核的产生除了与染色体断裂有关外,还与细胞纺锤体功能失调有关。

故常用来判断受试物的致突变性。

本实验以小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)为靶细胞,观察受试物的致突变性。

[实验材料]一、动物:不同性别小鼠二、器材:手术剪刀、眼科直头小镊子、大镊子、直头止血钳、载玻片、染色缸、晾片板、擦镜纸、干净纱布、显微镜等。

三、试剂:小牛血清、1:10 Giemsa染液(pH=6.8)、甲醇、香柏油[实验步骤]一、实验动物处理:每组要求雌雄小鼠各5只。

实验一般分三个剂量组,同时设阴性对照组和阳性对照组。

小鼠接触受试物的途径尽可能与人接触其途径一致。

最高剂量组可选用60~80%LD50的剂量,然后按一定比例设中间剂量。

受试物接触方式有多钟,常采用的是二次接触法,即小鼠第一次接触受试物后间隔24小时再接触一次,并于第二次接触后6小时处死、制片。

二、制片方法小鼠颈椎脱臼处死,迅速剪开胸部皮肤,取出胸骨,剔去肌肉,用干净纱布擦净血污。

食品毒理学实验讲义.

食品毒理学实验讲义.

实验一毒物损害的形态表现一、实验目的1. 通过本实验,掌握毒物的形态损害作用;2. 学会毒物形态损害的表现及如何记录相关实验现象。

二、实验原理有关重金属铜、锌、铬、镉对鱼类的急性毒性研究国内已有许多报道,鱼类早期发育是整个生活史中对各种污染物最为敏感的阶段,用以作为急性毒性试验具有快速、敏感、经济有效等特点,是生物测试保护天然水体的重要方法。

鲫鱼是我国重要的经济鱼类, 其分布面广而数量大, 个体生长快, 性成熟时间短, 繁殖季节长, 在人工控制饲养条件下可常年繁殖, 选择鲫鱼进行重金属离子毒性实验, 具有一定代表性。

本实验以鲫鱼为研究对象,向其生长环境中加入重金属硫酸铜,观察其形态损伤,希望在形态方面,有利于水体污染的观察。

三、实验试剂、仪器及动物1. 实验动物鲫鱼幼鱼, 购自鱼市场。

实验鱼在水族箱中驯养7 d 以上,暂养期间活动正常,无病,死亡率低于5%;实验前1 d 停止投饵,选择身体健康,反应灵敏,大小基本一致的幼鱼随机分组。

2. 实验试剂CuSO4, 先配制成质量浓度为3000 mg/ L 的母液, 再根据需要稀释成各质量浓度。

3. 实验仪器聚乙烯塑料水族箱,小型鱼类充氧机。

四、实验方法与步骤1. 实验动物的驯养实验鱼在水族箱中驯养7 d 以上,暂养期间活动正常,无病,死亡率低于5%;实验前1 d 停止投饵。

2. 实验动物的分组采用随机实验进行分组,将21只鲫鱼随机分成7组,其中一组为空白对照组,另外六组为实验组。

3. 实验动物的染毒采用静水法生物测试,实验期间不更换实验液,全天充气。

为防止饵料影响,实验期间不喂食。

为确定质量浓度的大致范围, 先作预实验, 估计CuSO4的7个质量浓度值, 在每一个质量浓度的水族箱内放入3 尾鲫鱼, 分别观察24 h、48h、96h, 找出各金属的100% 致死质量浓度和最大耐受质量浓度。

再根据预实验结果设6个质量浓度组及1个对照组, 每一质量浓度放鱼5尾, 在曝露的过程中观察它们的形态损伤。

食品毒理学实验报告

食品毒理学实验报告

食品毒理学实验报告篇一:毒理学实验指导《食品毒理学》实验指导实验一半衰期的测定-比色法测定水杨酸钠的血浆半衰期实验二兔血液红细胞计数实验三四氯化碳对家兔肝脏谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)的影响实验所需实验仪器:电子天平、水浴锅、pH计(试纸)、显微镜、分光光度计、离心机、一次性注射器。

实验一半衰期的测定-比色法测定水杨酸钠的血浆半衰期一、原理、目的药物血浆半(转载自:.iaocaOfaNWen. 小草范文网:食品毒理学实验报告)衰期t1/2即血浆药物浓度下降一半所需的时间。

绝大多数药物是按一级动力学规律消除(恒比消除),因此每种药物都有固定的t1/2,不因血浆浓度高低而改变。

本实验用分光光度法测定水杨酸钠的血浆浓度并计算t1/2。

水杨酸钠为抗炎药,经肝代谢,在酸性环境中与三氯化铁生成一种紫色的络合物,在520nm波长下比色,其光密度与水杨酸浓度成正比。

通过测定水杨酸钠的血浆半衰期,使学生了解水杨酸钠在体内的消除速度,并掌握其血浆半衰期的测定方法。

半衰期是判断毒物蓄积程度的重要参数,对中毒和解毒有一定的实践意义。

二、试剂、器材及动物离心管、试管、磅秤、玻璃棒、注射器、吸管、离心机、721型分光光度计;三氯醋酸、水杨酸钠、三氯化铁;兔。

三、方法步骤1、取离心管和试管各5支,分别标为1~5号,备用。

5支离心管各加入10%三氯醋酸7ml。

2、取兔1只,称体重,从耳静脉取血2ml置入1号离心管,用玻璃棒搅拌。

然而自耳静脉注入10水杨酸钠 (剂量为150mg/kg),并立即和60min后两次自另一耳静脉取血2ml,分别注入2、3号离心管中,搅拌。

4、5号离心管分别加入蒸馏水和0.02水杨酸钠2ml。

3、取上述5支离心管进行离心 (2 000r/min,5min),准确吸取上清液6ml 放入编号相对应的试管中,分别滴入10三氯化铁12滴(0.6m1)摇匀5min后比色。

4、用721型分光光度计520nm波长比色,以4号管调“0”,读得5号管光密度为,再以1号管调“0”,读得2号管为1,3号管为2,将上述操作归纳为下表:水杨酸钠血浆半衰期的测定试管名编号对照立即 60min 空白标准5、计算半衰期① 求k值:k=y/; y=0.02② 求水杨酸钠血浓度:给药后立即血浓度y1=k l;给药后60min血浓度y2=k2 。

食品毒理学实验报告

食品毒理学实验报告

食品毒理学实验报告引言食品毒理学是研究食品对人体健康的影响的学科,其中实验是评估食品毒性的重要手段之一。

本实验旨在通过对不同食品样品的毒性实验,评估其对人体的潜在危害。

本文将逐步介绍实验的设计、步骤和结果,以及对实验结果的分析和讨论。

实验设计为了评估不同食品样品的毒性,我们选择了常见的食品类别,包括蔬菜、水果、肉类和加工食品。

每个类别中,我们选取了两种常见的食品样品作为实验对象。

实验采用小鼠作为模型动物,将食品样品以不同剂量投喂给小鼠,并观察其行为、生理指标和组织病理学变化。

实验步骤1.实验前准备:准备好实验所需的各种食品样品,确保其新鲜和无污染。

2.动物选取:随机选择一定数量的健康小鼠作为实验对象。

3.实验组设置:将小鼠分为不同实验组,每个实验组分别接受不同剂量的食品样品。

4.实验操作:将食品样品按照设定剂量投喂给小鼠,记录每组小鼠的进食情况。

5.观察记录:观察每组小鼠的行为变化,记录可能存在的异常反应和症状。

6.体重测量:定期测量每组小鼠的体重变化,以评估食品样品对生长发育的影响。

7.生理指标测定:定期采集小鼠的血液样本,测定血液生化指标,如血红蛋白水平、肝功能指标等。

8.组织取样:在实验结束后,取出小鼠的组织标本,进行组织病理学分析。

9.数据统计与分析:对实验结果进行统计学分析,比较不同组别之间的差异。

实验结果1.行为观察:根据观察记录,发现有两组小鼠在接受高剂量食品样品后出现食欲不振、乏力等异常行为。

2.体重变化:高剂量食品样品组的小鼠体重增长较慢,与对照组相比存在显著差异。

3.生理指标:高剂量食品样品组的小鼠血红蛋白水平降低,肝功能指标异常升高,说明可能存在毒性反应。

4.组织病理学:高剂量食品样品组的小鼠组织中观察到炎症细胞浸润和组织损伤等病理学变化。

结果分析与讨论根据实验结果,高剂量的某些食品样品可能对小鼠的健康造成不利影响。

食欲不振、乏力、体重增长缓慢等行为和生理指标的变化表明这些食品样品可能存在毒性。

第五章 食品毒理学实验基础

第五章   食品毒理学实验基础


落户武汉大学实验动物中心的慰灵碑, 旨在纪念在抗非典疫苗和药物实验中为人 类健康献身的38只恒河猴
第一节 食品毒理学实验的原则和局限性 食品毒理学实验的原则 化学物在实验动物产生的作用,可以外推 于人 实验动物必须暴露于高剂量
成年的健康实验动物(雄性和雌性未孕)和 人可能的暴露途径是基本的选择 代表性、可重复性
常用实验动物生物学和生理学参数
2、实验动物品系的选择 品系(strain) 指用计划交配的方法,获得起源于共同 祖先的一群动物。 实验动物按遗传学控制分类可分为: ①近交系:指全同胞兄妹或亲子之间连续交配20代以上 而培育的纯品系动物。如小鼠有津白I、津白Ⅱ、615, DBA/1和DBA/2,BALB/C,C3H,C57B/6J,A 和A/He等。 ②杂交群动物(杂交1代,F1),指两个不同的近交系之间 有目的进行交配,所产生的第一代动物。 ③封闭群:一个种群在五年以上不从外部引进新血缘, 仅由同一品系的动物在固定场所随机交配繁殖的动物 群。如昆明种小鼠、NIH小鼠、LACA小鼠、F344大 鼠、Wistar大鼠、SD(Sprague-Dauley)大鼠等。
第三,毒理学实验所用动物数量有限,那些发 生率很低的毒性反应,在少量动物中难以发现 。而化学物一旦进入市场,接触人群往往会很 大。这就存在小数量实验动物到大量人群外推 的不确定性。
• 四,实验动物一般都是实验室培育的品系,一 般选用成年健康动物,反应较单一,而接触人 群可以是不同的人种、种族,而且包括年老体 弱及患病的个体,在对外源化学物毒性反应的 易感性上存在很大差异。


• • •
2. 剂量-反应(效应)研究。剂量-反应(效应)研究是 毒性评价和安全性评价的基础。 在急性(致死性)毒性试验中,应该得到LD50(半数致死 剂量/浓度),也可以得到LD01(最小致死剂量或浓度 )和MTD(最大耐受剂量或浓度)。 在急性非致死性毒性试验中,可应该得到急性可观察到 有害作用的最低剂量(LOAEL)和未观察到有害作用的剂 量(NOAEL)。 在亚急性、亚慢性及慢性毒性试验中,可得到相应的 LOAEL和NOAEL。 在致突变、致癌和致畸等特殊毒性试验中,剂量-反应( 效应)研究将为确定受试物是否具有这些特殊毒性提供 依据。在致畸试验也可得到LOAEL和NOAEL;在致突变、 致癌试验中,尽管认为是无阈值的,但也可得到表观的 LOAEL和NOAEL。

食品毒理学实验指导-2010

食品毒理学实验指导-2010

实验一、动物的一般操作技术1.实验目的和要求*毒理学研究需要用实验动物来进行各种实验,通过对动物的实验观察和分析来研究毒作用,获得毒物的毒性、剂量—反应关系、毒作用机制等方面的资料,因此动物实验是毒理学研究中重要的手段之一。

通过本次学习毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术,掌握实验动物的选择、动物抓取和分组等技术。

2.实验原理做毒理学实验,首先要了解实验动物选择的要求,实验动物分组、实验样品的采集、实验动物处死方法等。

3.实验仪器设备:小鼠若干,手套15副,苦味酸酒精饱和液,0.5%中性红或品红溶液,棉签,感应量为0.1g的天平一台。

4.实验内容步骤:(一)健康动物的选择无论选择哪种种属品系的动物进行实验,均要求选择健康的实验动物。

健康动物检查时要求达到:外观体形丰满,被毛浓密有光泽、紧贴体表,眼睛明亮,行动迅速,反应灵活,食欲及营养状况良好。

选择时重点检查以下几项:l.眼睛明亮,瞳孔双侧等圆,无分泌物。

2.耳耳道无分泌物溢出,耳壳无脓疮。

3.鼻无喷嚏,无浆性粘液分泌物。

4.皮肤无创伤、无脓疮、疥癣、湿疹。

5.颈部要求颈项端正,如有歪斜提示可能存在内耳疾患,不应选作实验动物。

6.消化道无呕吐、腹泻,粪便成形,肛门附近被毛洁净。

7.神经系统无震颤、麻痹。

若动物(大鼠、小鼠)出现圆圈动作或提尾倒置呈圆圈摆动,应放弃该动物。

8.四肢及尾四肢、趾及尾无红肿及溃疡。

(二)实验动物的性别鉴定小鼠主要依据肛门与生殖孔间的距离区分,间距大者为雄鼠,小者为雌性。

成年雄鼠卧位可见睾丸,雌性在腹部可见乳头。

(三)抓取方法正确地抓取固定动物,是为了在不损害动物健康、不影响观察指标、并防止被动物咬伤的前提下,确保实验顺利进行,小鼠的抓取方法先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实验台上向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤,将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可。

(四)编号、标记方法1、称重鼠称的感应量在0.1g以下。

《食品毒理学教案》

《食品毒理学教案》

《食品毒理学教案》word版一、课程简介1.1 课程背景食品毒理学是研究食品中有害物质对生物体的毒性作用及其机制的一门科学。

随着社会的发展和人们对食品安全意识的提高,食品毒理学的重要性日益凸显。

1.2 课程目标通过本门课程的学习,使学生了解食品毒理学的基本概念、研究方法、常见食品中毒案例以及食品安全标准,培养学生对食品安全的认识和判断能力。

二、教学内容2.1 食品毒理学基本概念2.1.1 食品毒理学的定义2.1.2 食品毒物的分类2.1.3 食品中毒的类型及特点2.2 食品毒理学研究方法2.2.1 毒物代谢动力学2.2.2 毒理学实验方法2.2.3 食品安全风险评估2.3 常见食品中毒案例分析2.3.1 微生物性食物中毒2.3.2 化学性食物中毒2.3.3 动植物性食物中毒2.4 食品安全标准与法规2.4.1 食品安全标准的含义与作用2.4.2 我国食品安全法规体系2.4.3 食品安全风险管理三、教学方法3.1 课堂讲授采用PPT课件,系统讲解食品毒理学的基本概念、研究方法、常见食品中毒案例及食品安全标准。

3.2 案例分析选取典型的食品中毒案例,引导学生运用所学知识进行分析,提高学生的实际操作能力。

3.3 小组讨论组织学生进行小组讨论,分享学习心得,培养学生的团队合作精神。

四、课程考核4.1 考核方式课程考核分为课堂表现、课后作业和期末考试三个部分。

4.2 考核比重课堂表现占30%,课后作业占30%,期末考试占40%。

五、教学计划5.1 课时安排共计32课时,其中理论讲授24课时,案例分析4课时,小组讨论4课时。

5.2 教学进度第1-8周:食品毒理学基本概念、研究方法及常见食品中毒案例第9-12周:食品安全标准与法规六、常见食品中毒案例分析(续)6.1 化学性食品中毒6.1.1 食品中化学污染物的来源6.1.2 化学性食品中毒的特点及危害6.1.3 典型化学性食品中毒案例分析6.2 动植物性食品中毒6.2.1 动物性食品中毒的原因及类型6.2.2 植物性食品中毒的原因及类型6.2.3 典型动植物性食品中毒案例分析七、食品安全风险评估与管理7.1 食品安全风险评估的基本概念和方法7.1.1 食品安全风险评估的定义及重要性7.1.2 食品安全风险评估的方法和步骤7.1.3 食品安全风险评估的应用实例7.2 食品安全风险管理策略7.2.1 食品安全风险管理的定义及目标7.2.2 食品安全风险管理的原则和方法7.2.3 食品安全风险管理在我国的实践与发展八、食品安全法规与标准8.1 食品安全法规体系概述8.1.1 我国食品安全法规体系的结构8.1.2 国际食品安全法规简介8.1.3 食品安全法规的实施与监管8.2 食品安全标准8.2.1 食品安全标准的分类与制定原则8.2.2 食品安全标准的制定与修订程序8.2.3 食品安全标准的实施与监督九、食品安全检测技术9.1 食品安全检测技术概述9.1.1 食品安全检测技术的作用与意义9.1.2 食品安全检测技术的发展趋势9.1.3 食品安全检测技术在实际应用中的案例分析9.2 常见食品安全检测方法9.2.1 微生物检测方法9.2.2 化学污染物检测方法9.2.3 转基因食品检测方法十、食品安全与健康10.1 食品安全与人体健康的关系10.1.1 食品安全对人体健康的影响10.1.2 食品安全与营养的关系10.1.3 食品安全与心理健康的关系10.2 食品安全保障措施10.2.1 食品安全风险防范策略10.2.2 食品安全宣传教育与培训10.2.3 公众参与食品安全管理与监督10.3 食品安全发展趋势与挑战10.3.1 食品安全面临的挑战与问题10.3.2 食品安全发展趋势10.3.3 我国食品安全未来的发展方向十一、食品安全与可持续发展11.1 食品安全与可持续发展关系11.1.1 食品安全对可持续发展的影响11.1.2 可持续发展对食品安全的保障11.1.3 案例分析:可持续发展视角下的食品安全实践11.2 农业可持续发展与食品安全11.2.1 农业生产方式对食品安全的影响11.2.2 农业可持续发展策略在食品安全中的应用11.2.3 农业可持续发展与食品供应链的关系十二、食品供应链管理12.1 食品供应链概述12.1.1 食品供应链的定义与结构12.1.2 食品供应链管理的重要性12.1.3 食品供应链管理的挑战与机遇12.2 食品供应链安全管理12.2.1 食品供应链安全的关键环节12.2.2 食品供应链安全管理的策略12.2.3 食品供应链安全管理案例分析十三、食品认证与追溯13.1 食品认证制度13.1.1 食品认证的定义与作用13.1.2 食品认证类别与标准13.1.3 食品认证的申请与审查流程13.2 食品追溯体系13.2.1 食品追溯体系的构成与作用13.2.2 食品追溯技术的应用13.2.3 食品追溯体系在我国的实践与发展十四、全球食品安全治理14.1 全球食品安全治理概述14.1.1 全球食品安全问题的现状与挑战14.1.2 全球食品安全治理的主要机构与机制14.1.3 全球食品安全治理的趋势与展望14.2 国际食品安全标准与法规14.2.1 国际食品安全标准的主要内容14.2.2 国际食品安全法规的制定与实施14.2.3 我国参与全球食品安全治理的策略与实践十五、食品毒理学实验技能15.1 实验设计与实验操作15.1.1 实验设计的原则与方法15.1.2 实验操作的基本技能与注意事项15.1.3 实验数据处理与分析15.2 食品安全检测实验15.2.1 微生物检测实验15.2.2 化学污染物检测实验15.2.3 转基因食品检测实验15.3 食品中毒案例实验分析15.3.1 实验目的与要求15.3.2 实验步骤与方法15.3.3 实验结果与讨论重点和难点解析本文档为《食品毒理学教案》word版,共包含十五个章节,涵盖了食品毒理学的基本概念、研究方法、食品安全案例分析、食品安全标准与法规、食品安全检测技术、食品安全与健康、食品安全与可持续发展、食品供应链管理、食品认证与追溯、全球食品安全治理以及食品毒理学实验技能等多个方面。

食品毒理学实验指导书

食品毒理学实验指导书

食品毒理学实验指导郭红辉刘永吉编写韶关学院英东食品科学与工程学院2012年9月实验注意事项食品毒理学所开设实验均要用到实验动物,为保证实验安全顺利进行,特别提出以下注意事项,所有实验人员务必认真阅读,严格遵守。

1.遵守卫生部颁布实施的《医学实验动物管理实施细则》和广东省第十一届人民代表大会常务委员会第十九次会议通过的《广东省实验动物管理条例》相关规定,不得戏弄或者虐待实验动物。

2.课前预习实验指导,熟悉实验操作流程,撰写预习报告。

3.进入实验室后,到小组所在实验台进行实验操作,不要随意走动,大声喧哗;抓取实验动物或解剖时要做好防护,防止被动物咬伤或抓伤、被实验器具扎伤等意外事故发生;如有意外发生,马上报告老师。

4.实验动物器官和尸体不要随意丢弃,交由班级指定负责人集中处理。

5.实验结束后,清洗和整理好实验用具,交由老师清点后方可离开。

实验一实验动物的基本操作一、目的和意义毒理学研究需要用实验动物来进行各种实验,通过对动物的实验观察和分析来研究毒作用,获得毒物的毒性、剂量-反应关系、毒作用机制等各方面的资料,因此掌握动物实验基本操作是毒理学研究必备技能。

二、实验器材及试剂1、器材大头针、泡沫板、帆布手套、橡胶手套、剪刀、棉签、小鼠鼠笼、1.5及0.5ml EP管等2、试剂(1)3% ~ 5%苦味酸溶液(即2,4,6-三硝基苯酚),因与动物的被毛中的蛋白发生反应,可染成较为牢固的亮黄色。

可用水,也可用一定浓度的乙醇来配制。

(2)0.5% 中性红或品红溶液,可染成红色。

三、内容(一)健康动物的选择无论选择哪种种属品系的动物进行实验,均要求选择健康的实验动物。

健康动物检查时要求达到:外观体形丰满,被毛浓密有光泽、紧贴体表,眼睛明亮,行动迅速,反应灵活,食欲及营养状况良好。

(二)实验动物性别的鉴定动物性别不同对毒物的敏感性也不同,这可能与性激素、肝微粒体羟基化反应有关,也随受试物而异。

因此,要根据实验要求选择性别,一般实验如对性别无特殊要求者,以选用雌雄动物各半。

食品科学毒理学实验教案

食品科学毒理学实验教案

食品科学毒理学实验教案一、实验目的1. 让学生了解和掌握毒理学的基本概念、原理和方法。

2. 培养学生对食品安全性的认识,提高防范意识。

3. 通过对食品中毒理学实验的学习,使学生能够识别和判断食品安全风险。

二、实验原理1. 毒理学基本概念:毒理学是研究外源化学物质对生物体产生有害效应的科学。

2. 食品安全性评价:通过对食品中化学污染物、微生物等有害因素的检测和评估,确定食品安全性。

3. 实验方法:主要包括急性毒性实验、慢性毒性实验、遗传毒性实验等。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:实验动物(如小鼠、大鼠)、食品样品、试剂等。

2. 实验仪器:显微镜、离心机、分析天平等。

四、实验步骤1. 急性毒性实验:(1)准备实验动物,对其进行体重测量和分类。

(2)将食品样品配制成不同浓度,分别给予实验动物。

(3)观察实验动物的食欲、活动状况、死亡情况等,记录数据。

(4)对实验数据进行统计分析,得出急性毒性LD50值。

2. 慢性毒性实验:(1)准备实验动物,对其进行体重测量和分类。

(2)将食品样品配制成不同浓度,分别给予实验动物。

(3)观察实验动物的生活状况、体重变化、病理变化等,记录数据。

(4)对实验数据进行统计分析,评估慢性毒性影响。

3. 遗传毒性实验:(1)准备实验材料,如细菌、细胞等。

(2)将食品样品配制成不同浓度,分别处理实验材料。

(3)观察实验材料的遗传变异情况,如突变频率、基因损伤等。

(4)对实验结果进行统计分析,评估遗传毒性影响。

五、实验结果与分析1. 通过对急性毒性实验数据的分析,得出食品样品的急性毒性LD50值。

2. 分析慢性毒性实验数据,评估食品样品对实验动物长期健康的影响。

3. 分析遗传毒性实验结果,判断食品样品是否具有遗传毒性。

注意事项:1. 实验过程中要严格遵守实验室规定,确保实验安全。

2. 对待实验动物要有人道主义精神,确保其福利。

3. 实验数据要真实可靠,避免误差。

1. 实验报告内容:(1)实验目的(2)实验原理(3)实验材料与仪器(4)实验步骤(5)实验结果与分析(6)讨论与结论(7)参考文献2. 实验报告格式:(1)食品科学毒理学实验报告(2)作者:实验者姓名(3)日期:实验完成日期(4)单位:实验所在学校或研究机构七、实验考核与评价1. 实验考核内容:(1)实验操作技能(3)实验结果分析与讨论2. 实验考核方式:(1)实验操作过程观察:占比30%(2)实验报告评分:占比40%(3)实验结果分析与讨论:占比30%八、实验拓展与研究1. 拓展方向:(1)食品毒理学在食品安全评价中的应用(2)新型食品毒性检测技术研究(3)食品安全与健康的关系2. 研究方法:(1)文献综述:查阅相关领域的研究成果和进展。

食品毒理学实验报告

食品毒理学实验报告

食品毒理学实验报告食品毒理学实验报告引言:食品安全一直是人们关注的热点话题。

随着科技的发展,食品毒理学实验成为评估食品安全性的重要手段之一。

本报告旨在通过食品毒理学实验的研究结果,探讨食品中存在的潜在风险,并提出相应的预防和控制措施,以保障公众的健康。

实验一:重金属含量检测重金属是食品中常见的污染物之一,长期摄入会对人体健康造成潜在的风险。

通过对不同食品样品的重金属含量进行检测,可以评估其安全性。

实验结果显示,某些食品样品中存在铅、汞等重金属超标情况。

其中,鱼类和海产品中的汞含量较高,超过了卫生标准的限制。

这可能是由于水体污染和食物链传递所致。

建议公众在摄入这些食品时要注意适量,并选择来源可靠的产品。

实验二:农药残留检测农药是农业生产中常用的化学物质,但过量使用或不当使用会导致农药残留在食品中,对人体健康造成潜在威胁。

通过对蔬菜和水果样品的农药残留检测,可以评估其安全性。

实验结果显示,某些蔬菜和水果样品中存在农药残留超标情况。

尤其是某些进口水果,其农药残留量明显高于国内生产的水果。

这提示公众在购买水果时要选择本地生产的产品,并注意清洗处理。

实验三:添加剂安全性评估食品添加剂是为了改善食品质量和口感而添加的化学物质。

然而,不当使用或超量使用食品添加剂可能对人体健康产生负面影响。

通过对不同食品样品中添加剂的含量进行检测,可以评估其安全性。

实验结果显示,某些食品样品中存在添加剂超标情况。

尤其是某些加工食品中的防腐剂和增味剂使用过量,可能对人体健康造成不利影响。

建议公众在购买加工食品时要选择添加剂使用较少的产品,并注意适量摄入。

结论:食品毒理学实验结果表明,食品中存在一定的潜在风险,需要公众、政府和相关部门共同努力来保障食品安全。

建议公众在日常生活中加强对食品的选择和消费意识,选择来源可靠的食品,避免过量摄入潜在有害物质。

政府和相关部门应加强食品监管,加强对食品生产和加工环节的监督,确保食品安全。

此外,科研机构应进一步深入研究食品毒理学,不断完善实验方法和技术手段,为食品安全评估提供更有力的支持。

食品毒理学实验方案

食品毒理学实验方案

实验一实验动物的一般操作技术一、实验目的学习食品毒理学试验中有关动物试验的基本操作技术,掌握实验动物的选择,性别鉴定,抓取方法,标记方法,染毒方法,生物材料采集和实验动物处死等技术。

二、试剂、器材及动物苦味酸酒精饱和溶液、美蓝溶液、0.9%的NaCl 溶液托盘天平、电子天平、棉签、1mL 注射器、灌胃器、烧杯、容量瓶、定量取血管、玻璃毛细管、鼠笼昆明种小鼠三、操作方法(一)实验动物的选择食品毒理学研究中,无论应用何种种属、品系的实验动物,都必须是健康动物。

动物的选择,应重点检查下述项目。

1. 外观体形丰满,被毛浓密光顺,行动敏捷,反应灵活。

2. 眼睛明亮,瞳孔清晰,双侧等圆,眼内无分泌物,眼睑无肿胀、发红。

3. 耳耳道无分泌物溢出,耳壳无脓疮、糜烂。

4. 鼻无喷嚏,无浆性黏液分泌物。

5. 皮肤无创伤、脓疮、疥癣、湿疹。

6. 头颈部姿势端正。

颈项歪斜提示可能存在内耳疾患,不能用于实验。

7. 消化道无呕吐、便秘、腹泻,粪便成形,肛门附近被毛洁净。

8. 神经系统无震颤、麻痹、运动失调,如有转圈运动或倒提时呈圆圈摆动,不能用于实验。

9. 四肢及尾四肢、趾及尾无红肿、溃疡。

10. 食欲及营养良好(二)实验动物的性别鉴定1. 大鼠、小鼠主要观察肛门与生殖孔的间距,雄性间距大,而雌性间距小;雄鼠夏天或卧位可见睾丸,雌鼠腹部有明显乳头,大鼠 6 对,小鼠5对。

(三)实验动物的抓取和固定实验前应了解动物的一般习性,正确抓取和固定动物,既要大胆,又要细心。

1. 小鼠的抓取方法先用右手抓取鼠尾部提起,置于实验台上向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓取小鼠的两耳和颈部皮肤,将鼠体置于左手手心中,以无名指按住鼠尾根部,小指按住后腿即可。

右手则可进行灌胃或注射等操作。

(四)实验动物的称重、编号和标记1. 称重一般同一组内,同性别动物体重差异应小于平均体重的10%,组间同性别动物体重平均值相差应小于5%。

2. 编号和标记(1)染色法一般采用不同颜色的染料涂擦于动物不同部位的被毛染色,表示不同号码,此法适用于大鼠、小鼠和豚鼠。

5 第5章 食品毒理学实验方法与技术

5 第5章 食品毒理学实验方法与技术
第五章 食品毒理学实验方法与技术
• 以科学研究为目的而进行科学饲养繁殖的动物称为实 验动物。 • 实验动物学已发展成一门以生命科学为主体,以医学、 生物为核心的综合性独立的新兴学科。
• 食品毒理学作为一门实验科学是以动物实验为中心的,
动物实验的设计、实施、结果观察和评价是毒理学研 究的基本方法。 • 食品毒理学研究的主要手段是动物实验。
①所用的溶剂或助溶剂应该是无毒或实际无毒;
②与受试物不起反应,受试物在溶液中应稳定;
③对受试物的毒动学和毒效学无显著影响; ④无特殊刺激性或气味。对水溶性受试物,体内试验首选的溶剂 为水(经口染毒)和等渗盐水(胃肠道外染毒)。
确定试验剂量和剂量分组
1.剂量分组
• 高剂量组 应出现明确的有害作用,或者高剂量组剂量 已达到染毒的极限剂量
3、 35只小鼠随机分成5组:
动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
随机数字
除以5的余数 归 组
42
2 B
81
1 A
14
4 D
57
2 B
20
5 E
42
2 B
53
3 C
32
2 B
37
2 B
32
2 B
பைடு நூலகம்
37
2 B
07
2 B
36
1 A
07
2 B
51
1 A
• 健康动物应发育正常、体形健壮,无外观畸形,被毛浓 密、有光泽、顺贴而不蓬乱,行动灵活、反应敏捷,眼 睛明亮有神,表皮无溃疡和结痴,天然孔道干净无分泌 物等。
• 为确保选择健康动物 ,一般在实验前观察

食品科学毒理学实验教案

食品科学毒理学实验教案

食品科学毒理学实验教案一、实验目的1. 理解毒理学的基本概念和研究方法。

2. 掌握食品中有害物质的检测方法。

3. 培养实验操作能力和实验观察能力。

4. 增强对食品安全性的认识,提高食品质量安全意识。

二、实验原理1. 毒理学基本概念:研究外源化学物质对生物体的有害效应及其剂量-反应关系的科学。

2. 食品安全性:食品中不存在对消费者有害的物质,或其含量在规定的范围之内,不会对消费者的健康造成危害。

3. 实验方法:动物实验、细胞实验、体外实验等。

三、实验内容1. 实验一:食品中有害物质的提取与净化实验目的:掌握食品中有害物质的提取与净化方法。

实验原理:利用有机溶剂、离子交换树脂等方法提取和净化食品中的有害物质。

实验步骤:样品处理、提取、净化、浓缩、检测。

2. 实验二:食品中有害物质的检测实验目的:掌握食品中有害物质的检测方法。

实验原理:原子吸收光谱法、高效液相色谱法、气相色谱法等。

实验步骤:样品处理、检测、数据分析。

3. 实验三:毒性指标的测定实验目的:了解毒性指标的测定方法。

实验原理:测定生物体内的代谢产物、酶活性、氧化应激产物等指标。

实验步骤:样品处理、指标测定、数据分析。

4. 实验四:食品安全性评价实验目的:学习食品安全性评价的方法。

实验原理:危害识别、暴露评估、风险characterization。

实验步骤:文献调研、数据收集、风险评估。

5. 实验五:食品添加剂的安全性评价实验目的:了解食品添加剂的安全性评价方法。

实验原理:毒理学试验、代谢研究、风险评估。

实验步骤:文献调研、数据收集、风险评估。

四、实验材料与仪器1. 实验材料:食品样品、有机溶剂、离子交换树脂、检测试剂等。

2. 实验仪器:高压灭菌锅、提取器、离心机、原子吸收光谱仪、高效液相色谱仪、气相色谱仪等。

五、实验报告1. 实验目的、原理、步骤、结果和结论。

2. 实验数据和图表分析。

3. 对实验过程中出现的问题进行讨论和解释。

4. 食品安全性评价和食品添加剂的安全性评价。

食品毒理学实验指导

食品毒理学实验指导

食品毒理学实验指导西南大学食品科学学院实验一 血细胞的计数【目的要求】学习红细胞、白细胞计数的方法。

【基本原理】血液中血细胞数的计算是使用血细胞计数板。

而且要用适当的溶液将血液稀释后,放入计数板的计数室内,在显微镜下计算一定容积血液稀释液中的血细胞个数,再将所得结果换算为1mm3血液中的血细胞个数。

【动物与器材】血细胞计数板、玻璃毛细吸管、1ml和5ml吸管、表面皿、显微镜、刺血针、酒精棉球、红细胞稀释液、白细胞稀释液。

【方法与步骤】1.血细胞计数板的结构血细胞计数板为一块特制的长方形厚载玻片,在中部1/3面积处有4条槽。

内侧2条槽之间还有1条横槽相通,因此在中部构成2块长方形平台。

此平台比整个载玻片的平面低0.1 mm。

平台中部各刻有1个含9个大方格的方格网,为计数室。

每1个大方格边长1 mm,面积为1mm2,体积为0.1 mm3。

四角的每1个大方格又被分为16个中方格,适用于白细胞、血小板和培养细胞的计数。

中央的大方格则由双线划分为25个中方格,每个中方格面积为0.04mm2,体积为0.004mm3,每个中方格又分成16个小方格,适用于红细胞、微生物细胞的计数。

2.采血管采血管为一细长、均匀的毛细玻璃管,其上有2个刻度,前端刻度指示的容量为10mm3,后端的为20mm3,尾端与1个带孔的橡皮吸球相连。

3.采血及稀释(1)用1 mL吸管准确吸取0.38mL白细胞稀释液,放入1支干净的小试管内,加塞备用。

用5mL吸管准确吸取3.98mL红细胞稀释液,放入另1支干净的中试管内,加塞备用。

(2)用消毒干棉球醮75%乙醇消毒左手无名指或耳垂边缘(或兔的耳缘静脉采血部位),待酒精挥发后用采血针刺入皮肤约2~3mm深,让血液自然流出。

采血时必须待皮肤上的消毒酒精挥发后才能穿刺,否则流出的血液不能成滴,无法吸取。

用消毒干棉球拭去第1滴血液,待流出第2滴血成大滴时,用采血管吸血至20mm3刻度处。

吸血时应注意,不可过度挤压组织以图加速血液流出;吸血时应尽量利用毛细管现象使血液自动进入吸管内。

食品毒理学实验方案

食品毒理学实验方案

实验一实验动物的一般操作技术一、实验目的学习食品毒理学试验中有关动物试验的基本操作技术,掌握实验动物的选择,性别鉴定,抓取方法,标记方法,染毒方法,生物材料采集和实验动物处死等技术。

二、试剂、器材及动物苦味酸酒精饱和溶液、美蓝溶液、0.9%的NaCl溶液托盘天平、电子天平、棉签、1mL注射器、灌胃器、烧杯、容量瓶、定量取血管、玻璃毛细管、鼠笼昆明种小鼠三、操作方法(一)实验动物的选择食品毒理学研究中,无论应用何种种属、品系的实验动物,都必须是健康动物。

动物的选择,应重点检查下述项目。

1.外观体形丰满,被毛浓密光顺,行动敏捷,反应灵活。

2.眼睛明亮,瞳孔清晰,双侧等圆,眼内无分泌物,眼睑无肿胀、发红。

3.耳耳道无分泌物溢出,耳壳无脓疮、糜烂。

4.鼻无喷嚏,无浆性黏液分泌物。

5.皮肤无创伤、脓疮、疥癣、湿疹。

6.头颈部姿势端正。

颈项歪斜提示可能存在内耳疾患,不能用于实验。

7.消化道无呕吐、便秘、腹泻,粪便成形,肛门附近被毛洁净。

8.神经系统无震颤、麻痹、运动失调,如有转圈运动或倒提时呈圆圈摆动,不能用于实验。

9.四肢及尾四肢、趾及尾无红肿、溃疡。

10.食欲及营养良好(二)实验动物的性别鉴定1.大鼠、小鼠主要观察肛门与生殖孔的间距,雄性间距大,而雌性间距小;雄鼠夏天或卧位可见睾丸,雌鼠腹部有明显乳头,大鼠6对,小鼠5对。

(三)实验动物的抓取和固定实验前应了解动物的一般习性,正确抓取和固定动物,既要大胆,又要细心。

1. 小鼠的抓取方法先用右手抓取鼠尾部提起,置于实验台上向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓取小鼠的两耳和颈部皮肤,将鼠体置于左手手心中,以无名指按住鼠尾根部,小指按住后腿即可。

右手则可进行灌胃或注射等操作。

(四)实验动物的称重、编号和标记1.称重一般同一组内,同性别动物体重差异应小于平均体重的10%,组间同性别动物体重平均值相差应小于5%。

2.编号和标记(1)染色法一般采用不同颜色的染料涂擦于动物不同部位的被毛染色,表示不同号码,此法适用于大鼠、小鼠和豚鼠。

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实验一、动物的一般操作技术1.实验目的和要求*毒理学研究需要用实验动物来进行各种实验,通过对动物的实验观察和分析来研究毒作用,获得毒物的毒性、剂量—反应关系、毒作用机制等方面的资料,因此动物实验是毒理学研究中重要的手段之一。

通过本次学习毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术,掌握实验动物的选择、动物抓取和分组等技术。

2.实验原理做毒理学实验,首先要了解实验动物选择的要求,实验动物分组、实验样品的采集、实验动物处死方法等。

3.实验仪器设备:小鼠若干,手套15副,苦味酸酒精饱和液,0.5%中性红或品红溶液,棉签,感应量为0.1g的天平一台。

4.实验内容步骤:(一)健康动物的选择无论选择哪种种属品系的动物进行实验,均要求选择健康的实验动物。

健康动物检查时要求达到:外观体形丰满,被毛浓密有光泽、紧贴体表,眼睛明亮,行动迅速,反应灵活,食欲及营养状况良好。

选择时重点检查以下几项:l.眼睛明亮,瞳孔双侧等圆,无分泌物。

2.耳耳道无分泌物溢出,耳壳无脓疮。

3.鼻无喷嚏,无浆性粘液分泌物。

4.皮肤无创伤、无脓疮、疥癣、湿疹。

5.颈部要求颈项端正,如有歪斜提示可能存在内耳疾患,不应选作实验动物。

6.消化道无呕吐、腹泻,粪便成形,肛门附近被毛洁净。

7.神经系统无震颤、麻痹。

若动物(大鼠、小鼠)出现圆圈动作或提尾倒置呈圆圈摆动,应放弃该动物。

8.四肢及尾四肢、趾及尾无红肿及溃疡。

(二)实验动物的性别鉴定小鼠主要依据肛门与生殖孔间的距离区分,间距大者为雄鼠,小者为雌性。

成年雄鼠卧位可见睾丸,雌性在腹部可见乳头。

(三)抓取方法正确地抓取固定动物,是为了在不损害动物健康、不影响观察指标、并防止被动物咬伤的前提下,确保实验顺利进行,小鼠的抓取方法先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实验台上向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤,将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可。

(四)编号、标记方法1、称重鼠称的感应量在0.1g以下。

o2、标记方法染色法:采用染料(苦味酸酒精饱和液)涂擦动物皮毛标记的方法进行编号。

用毛笔或棉签蘸取染料涂于动物的不同部位,以苦味酸黄色斑点染料标记来表示不同号码。

一般习惯涂在左前腿为1,左腰部为2,左后腿为3,头部为4,背部为5,尾基部为6,右前腿为7,右腰部为8,右后腿为9。

如果动物编号超过10,需要10~100号码时,可采用在上述动物的不同部位,再涂染另一种涂料斑点,即表示相应的十位数,即左前腿为10,左腰部为20,以此类推。

(五)实验动物的随机分组方法(随机数字表法)为了得到客观的剂量-反应关系,应将一群动物按统计学原则随机分配到各个试验组中。

将实验单位随机分成三组设有动物X只,随机等分成Y组。

将动物编号后,按上述方法,从随机数字表抄录X个数字,将各数一律以Y除之,并以余数1、2、3……Y代表各组。

动物号码12345随机数目除Y后的余数要使各组的动物数相等,须把原归某组的动物改配到其它组去。

可以随机数字表继续按斜角线抄录一个数字,得60,以有多出的一组现有只数除之,余数为几,就可以把第几个移入其它组。

5.注意事项:在实验操作过程中,注意安全,以免被小鼠咬伤,防止小鼠丢失。

同时要遵守实验操作规程。

6.实验结果:掌握实验动物的一般操作、实验样品采集、实验动物处死方法等。

7.实验报告要求:实验报告应包含如下内容:原理、仪器和试剂、步骤、原始数据、计算结果。

实验二动物染毒途径和方法1.实验目的要求掌握常用的动物染毒途径和方法。

2.实验原理:实验动物的一般染毒途径主要是皮下注射、皮内注射、肌内注射、静脉注射、腹腔注射、经口染毒,皮肤染毒和呼吸道染毒。

3.实验仪器设备:实验动物:成年、健康小鼠。

器材:注射器(0.5,1ml)、消毒棉球、手套、50ml烧杯。

试剂:0.9%生理盐水(100ml,灭菌)。

4.实验内容步骤:染毒的途径和方法多种多样,可根据实验目的、动物种类和药物剂型等情况确定。

1.皮下注射注射时以左手拇指和食指提起皮肤,将连有针头的注射器刺入皮下。

注射部位一般在大腿外侧、内侧、背部、耳根部、腹部。

2.皮内注射皮内注射时需要将注射的局部脱去被毛,消毒后,用左手拇指和食指按住皮肤使之绷紧,在两指之间,将连有针头的注射器紧贴皮肤表层刺入皮内,然后再向上挑起并再稍刺入,即可注射药物,此时可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。

3.肌内注射肌内注射应选用肌肉发达、没有大血管通过的部位,一般多选臀部。

注射时垂直刺入肌肉,回抽针栓无回血,即可进行注射。

4.静脉注射一般采用尾静脉注射,鼠尾静脉有三根,左右两侧尾静脉比较容易固定,多采用。

操作时先将动物固定操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在烧杯中,使尾巴露出,尾部用温水浸润或用酒精擦拭,以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,中指从下面托起尾巴,以无名指和小指夹住尾巴的末梢,右手持注射器,使针头与静脉平行,从尾下四分之一处进针,先缓慢注入少量药液,如无阻力,可继续注入。

注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止血或用消毒棉球压迫针眼止血。

5.腹腔注射用小白鼠做实验时,以左手抓住动物,使腹部向上,右手将注射针头于左或右下腹刺入皮下,使针头向前推进0.5~1.0cm,再以45度角穿过腹肌,固定针头,缓慢注入药液。

6.经口染毒(见实验五)7. 皮肤染毒(见实验四)。

8.呼吸道染毒(见实验六)。

5.注意事项:在实验操作过程中,注意安全,以免被小鼠咬伤,防止小鼠丢失。

同时要遵守实验操作规程。

6.实验结果:掌握实验动物染毒的常用的方法及其操作。

7.实验报告要求:实验报告应包含如下内容:原理、仪器和试剂、实验操作步骤。

实验三动物生物材料采集、准备1.实验目的要求掌握动物生物样品采集方法及实验动物的处死方法。

2.实验原理:动物生物样品的采集对实验结果十分重要,各脏器的比重和血液指标反映了动物染毒后的生理变化。

3.实验仪器设备:实验动物:成年、健康小鼠。

试剂:酒精棉球。

器材:酒精棉球、解剖剪刀、血色素吸管、干棉球、注射器、镊子。

4.实验内容步骤:(一)采血方法1.鼠尾采血方法:适用于血量少的实验。

方法:将动物固定后,把鼠尾浸入45~50℃温水中使尾静脉充血,擦干皮肤后,再用酒精棉球擦拭消毒。

剪去尾尖(约0.2~0.3cm),拭去第一滴血,用血色素吸管(根据需要事先在吸管内加入与不加抗凝剂)吸取一定量尾血,然后用干棉球压迫止血。

也可以不剪尾,以1ml注射器连上7—8号针头直接刺破尾静脉进行定量采血。

2.眼眶静脉丛采血法:操作者以左手拇指、食指紧紧握住小鼠颈部压迫颈部两侧使眶后静脉丛充血(注意用力要恰当,以防止动物窒息死亡),右手持玻璃毛细管从一侧眼内眦部以45度角刺人,捻转前进。

如无阻力继续刺人,有阻力就抽出玻璃毛细管调整方向后再刺入,直至出血为止。

右手持容器收集血液后,拔出毛细管,用干棉球压迫止血。

3.腹主动脉或股动(静)脉采血法:为一次性采血方法。

大、小鼠麻醉后,仰卧位固定动物,剪开腹腔,剥离暴露腹主动脉或暴露股动(静)脉,用注射器刺人采血。

4.断头采血法:操作者左手握住动物,右手持剪刀,快速剪断头颈部,倒立动物将血液滴人容器。

注意防止剪断的毛发掉入接血容器中。

(二)处死方法1.脊椎脱臼法左手按住鼠头,右手抓住鼠尾猛力向后拉,使动物颈椎拉断脱节而立即死亡。

此法多用于处死小鼠。

2.断头法操作者用右手按住大鼠或小鼠头部,左手握住背部,露出颈部,助手用大剪刀或断头器剪断颈部使之死亡。

也可使用断头器。

3.急性大失血法可用鼠眼眶动脉和静脉急性大量失血法使大、小鼠立即死亡(详见动物的采血方法)。

4.击打法右手抓住鼠尾,提起,用力摔打其头部,鼠痉挛后立即死亡。

也可用小木锤或器具猛力击打动物头部,使其立即死亡,常用于处死家兔或大鼠(三)实验动物脏器的观察和采取。

5.注意事项:在实验操作过程中,注意安全,以免被小鼠咬伤,防止小鼠丢失;实验使用的有毒化学药品妥善处理;要遵守实验操作规程。

6.实验结果:掌握各种采血方法、实验动物各器官的正确位置和实验动物常用的处死方法。

7.实验报告要求:实验报告应包含如下内容:原理、仪器和试剂、步骤,各种采血和处死方法的适用范围。

实验四皮肤刺激实验1.实验目的要求本试验的目的是:学习皮肤染毒技术,了解受试物对皮肤是否有刺激或腐蚀作用。

2.实验原理:有些化学毒物与皮肤接触后可经皮肤吸收引起机体中毒,或引起皮肤、粘膜局部损伤。

因此,经皮肤接触毒性试验在卫生毒理学中占有重要位置。

3.实验仪器设备:实验动物:成年、健康的小鼠。

皮肤刺激试验需动物3只。

器材:解剖剪刀,细玻璃棒,棉球、医用纱布、塑料薄膜、无刺激性胶布。

试剂:辣椒油;脱毛剂:取3份硫化钠,1份洗衣粉和7份淀粉,使用前临时用温水调成糊状。

4.实验内容步骤:1.小鼠脱毛技术。

方法有三种:剪毛、拔毛和脱毛。

剪毛固定动物后,用粗剪刀剪去所需部位的被毛。

应注意几点:把剪刀贴紧皮肤剪,不可用受提起被毛,以免剪破皮肤;依次剪毛,不要乱剪;剪下来的被毛集中在一个容器内,勿遗留在手术野和操作台周围。

拔毛小鼠作尾静脉注射时,需用拇指、食指将局部被毛拔去,以利操作。

脱毛脱毛系指用化学药品脱去动物的被毛,适用于无菌手术野的准备以及观察动物局部皮肤血液循环和病理变化。

常用硫酸钡或脱毛剂配方配制脱毛剂。

2.小鼠染毒操作。

浸尾法:染毒前先将小鼠放入特制地固定盒内,并使其尾巴通过固定盒底部地软木塞的圆孔露出管外。

继之将尾巴通过小试管软木塞小孔,插入装有受试物液体的试管内,浸泡2~6小时,观察中毒症状。

涂布法: 用棉签将受试物液体均匀涂布于脱毛的皮肤上,在其上覆盖纱布,并用胶布固定。

于染毒后30min,60min,2h,4h分别观察染毒部位的皮肤,有无红斑和水肿,有无水泡,糜烂渗出等症状。

记录症状并判断待测物对皮肤的刺激性。

3.皮肤局部刺激作用的观察方法和评价。

表1.皮肤刺激反应评分标准刺激反应分值红斑无红斑0轻度红斑(勉强可见) 1中度红斑(明显可见) 2重度红斑 3紫红色红斑到轻度焦痂形成 4水肿无水肿0轻度水肿(勉强可见) 1中度水肿(明显隆起) 2重度水肿(皮肤隆起1mm,轮廓清楚) 3严重水肿(皮肤隆起1mm以上并有扩大) 4最高总分值8表2.皮肤刺激强度评价标准分值评价0-0.49 无刺激性0.5-2.99 轻度刺激性3.0-5.99 中度刺激性6.0-8.0 强刺激性4.实验操作要点脱毛操作过程中,注意不要伤到小鼠皮肤;小鼠在染毒过程中,注意其随时间的变化。

5.注意事项:在实验操作过程中,注意安全,以免被小鼠咬伤,防止小鼠丢失;实验使用的有毒化学药品妥善处理;要遵守实验操作规程。

6.实验结果:观察辣椒油对小鼠皮肤的刺激作用,并做出皮肤刺激性分级的判断。

7.实验报告要求:实验报告应包含如下内容:原理、仪器和试剂、步骤、结果。

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