骨标志物与骨质疏松

或其它骨疾病的抗吸收治疗，疗效可在几周 后反应出来。由于采用了针对β−8AA八肽的 两种单克隆抗体，Elecsysβ−CrossLaps能特 异检测交联的I型胶原同分异构体片段及含有 此八肽双体的所有I型胶原分解片段（β-CTx）
Elecsys β-crosslaps的特点 的特点
全自动检测 准确度高(6%) 全过程18分钟 灵敏度高0.02ng/ml=20pg/ml 批间同一性好(<5%) 检测范围：0.01-6.0ng/ml
定量CT 定量 可以选择性地评价皮质骨和松质骨重量， 但准确度及重复性稍差，受试者接受X线量较 大，不易普及应用。
五、罗氏现有诊断骨质疏松的生化指标
1、N-MID®骨钙素 N-MID®Osteocalcin) 、 ®骨钙素( ® 血清（或血浆）中骨钙素的含量与各种骨 代谢紊乱中的骨转换率有关。骨钙素含量异常 多见于骨质疏松、原发性或继发性甲状旁腺功 能亢进以及Paget病等疾病中。目前，骨钙素已 被视为骨转换标志物，用于对上述疾病进行抗 再吸收治疗效果的监测。完整的骨钙素（氨基
血清І型原胶原延长肽 血清 型原胶原延长肽 血清I型前胶原羧基端前肽（PICP），是 成骨细胞合成胶原时的中间产物，是反映成 骨细胞活动状态的指标。血清I型前胶原氨基 端前肽（PINP），在脯氨酸及羟脯氨酸中最 为丰富。
骨吸收标志物
尿羟脯氨酸 （HPr） ） 尿钙（ ） 尿钙（Ca） 尿羟赖氨酸糖甙（GHyI） 尿羟赖氨酸糖甙（ ） 骨涎蛋白（ 骨涎蛋白（BSP） ） 型胶原（ 骨I型胶原（BIC）降解产物 型胶原 ） 半乳糖羟赖氨酸（ 半乳糖羟赖氨酸（Gal-HyI） ） 尿胶原吡啶交联（ 尿胶原吡啶交联（PYD）及脱氧胶原吡啶交联（D）及脱氧胶原吡啶交联（ PYD） ） 型胶原交联羧基末端肽（ 血I型胶原交联羧基末端肽（ICTP） 型胶原交联羧基末端肽 ） I型胶原交联氨基末端肽（NTX） 型胶原交联氨基末端肽（ 型胶原交联氨基末端肽 ） I型胶原交联（Crosslap） 型胶原交联（ 型胶原交联 ）
0.300(300) 0.304(304) 0.394(394) 0.299(299) 0.556(566)
0.142(142) 0.200(200) 0.230(230) 0.137(137) 0.226(226)
0.584(584) 0.704(70 0.854(854) 0.573(573) 1.008(1008)
1、骨形成生化标志物 、
骨特异性碱性磷酸酶 （BALP）： ） 碱性磷酸酶在骨形成和矿化中起重要作用，其主 要来源于肝脏（50%），骨（50%），两者的交叉 反应约15-20%。 骨钙素（ ） 骨钙素（OC）： 是骨骼中含量最高的非胶原蛋白，由成骨细胞分 泌，受1,25（OH）2D3调节。通过BGP的测定可以 了解成骨细胞的动态，是骨更新的敏感指标
骨吸收生化标志物
尿羟脯氨酸 （HPr） ） 是反映骨更新的指标,受饮食影响较大。 尿钙 经过肌酐排泄校正过的空腹尿钙水平是 反映代谢性骨病、钙磷代谢和相关疾病的 重要手段，但易受干扰，很难确切反映骨 吸收时释放的钙的量。
尿羟赖氨酸糖甙（ 尿羟赖氨酸糖甙（GHyI） ） 是反映骨吸收的指标，其尿中含量不如 HPr高，但含量相对固定，不易受食物来源 的影响，组织特异性高，老年性骨质疏松 症可能升高。
甲状旁腺激素生理功能
1、PTH使肾小管重吸收磷的能力减弱，尿排出磷 增加；使肾小管重吸收Ca 2+的能力增高，从而血 钙水平增高。 2、促进肾脏合成维生素D的活性代谢物1，25 O H2 D3，从而间接地促进了肠吸收钙，提高血钙水 平。 3、PTH加强骨细胞溶解骨钙的作用和破骨细胞吸 收骨基质的作用，同时促进成骨细胞形成骨及矿化 物的作用。
•β-crosslaps
–I 型胶原的降解产物 –骨吸收增加时,其水平增高 –有助于指示对骨质疏松等疾病进行抗吸收治 疗的有效性 –在治疗后几周之后就可以检测出变化 检测范围： 检测范围：0.010─6.00ng/ml 或 106000pg/ml
罗氏的主要竞争对手
DPC ：是骨吸收标志物的最大供应商，主要 产品尿DPD（脱氧胶原吡啶交联），全自动 分析，占骨吸收市场的40%。 Beckman：是骨形成标志物的最大供应商， 主要产品BAP（骨特异性碱性磷酸酶），占 骨形成检测市场的40%。该项目与肝脏来源 的碱性磷酸酶的交叉反应约15-20%。
Ostex:骨转化单一产品，2001年报告销售额 57亿美金，包括血、尿NTX和检测 Quidel Diagnostics (formerly Metra Biosystems):检测项目多（包括骨形成、骨吸 收和骨转化标志物），但非自动检测。
甲状旁腺素[Parathyroid hormone， 甲状旁腺素 ， PTH]
有选择地检测完整的甲状旁腺素，可以 直接了解甲状旁腺体的分泌活性。Elecsys PTH测定采用双抗体夹心法原理，生物素化 的单抗与N端（1-37）结合，钌标记的单抗与 C端（38-84）结合。对应的抗原决定簇氨基 酸序列在26-32和55-64区域。
骨涎蛋白（ 骨涎蛋白（BSP） ） 是一种磷酸化的糖蛋白，占骨基质的非 胶原成分的5%-10%，主要是由活性的成骨 细胞和成牙质细胞产生。其水平反映了骨 重吸收有关的主要指标。 型胶原（ 骨I型胶原（BIC）降解产物 型胶原 ） 半乳糖羟赖氨酸（ 半乳糖羟赖氨酸（Gal-HyI） ）
尿胶原吡啶交联（ 尿胶原吡啶交联（PYD）及脱氧胶原吡啶 ） 交联（ 交联（D-PYD） ） 不受新合成胶原退变的影响，其排泄与 饮食无关。PYD还在软骨、骨韧带和血管 中发现，D-PYD几乎只见与骨中（及牙 质）。为评价骨吸收的指标之一。 型胶原交联羧基末端肽（ 血I型胶原交联羧基末端肽（ICTP） 型胶原交联羧基末端肽 ） 为骨重建过程中I型胶原被降解后释放入 血的小片段。其含量和变化间接反映骨吸 收状态。
3、甲状旁腺素： 、甲状旁腺素：
甲状旁腺素是由84个氨基酸残基组成的多肽。在 甲状旁腺主细胞内合成，储存于细胞内，分泌到外周 血中发挥生理作用。外周血PTH水平主要用4种类型 测定，即：hPTHI ~84；hPTHI~34；中间分子肽段 （如hPTH28~54；hPTH34~44；hPTH44~68等）和 羧基肽段（hPTH53~84；hPTH39~84；hPTH30~84 等）。PTH1~84 ，PTH1~34均有完全的生物活性， 但后者的半衰期较短，可能很快与受体结合或迅速从 血中清除。
Elecsys N-MIDTM骨钙素的优势
测定完整的骨钙素由于稳定性的原因，常 规实验室难以开展。电化学发光测定N-MID骨钙素使用了一对抗体不仅可测定完整的分 子也可以测定N-MID-骨钙素。 样本在冰箱内稳定性可以长达一周，使日 常实验室可以测定骨钙素。而且具有简单、 快速、全自动化和可以随机进样的优点。
检测范围： 检测范围：1.20─5000pg/ml或0.127530pmol/l 正常参考值： 正常参考值：15-65pg/ml或1.6-6.9pmol/l
β −胶原特殊序列 [β-CrossLaps(β-CTx)]
骨基质的有机成分中，90%是由I型胶原 组成的。在正常的骨代谢过程中,骨基质进行 着有序的合成与分解。重要的I型胶原分解片 段是C端肽（CTx）。在骨成熟过程中，C端 肽的α−天冬氨酸转变成β型（β−CTx）。此C 端肽的同分异构体是I型胶原降解所特异的。 检测血清C端肽可用于监测骨质疏松症
二、骨质疏松症的诊断
分期 Ⅰ期骨质减 少 Ⅱ期骨质疏 松 Ⅲ期严重骨 质疏松 BMD 1.0-2.5 >2.5 >2.5 骨折 无 无 有
三、常用生化检查
1、骨形成生化标志物 、 2 、骨吸收生化标志物 3、甲状旁腺素 、
骨形成生化标志物
骨特异性碱性磷酸酶 （BALP） ） 骨钙素（ ） 骨钙素（OC） 血清І型原胶原延长肽 血清 型原胶原延长肽
•Pቤተ መጻሕፍቲ ባይዱH
–在甲状旁腺中合成并分泌进入血液循环 –与维生素D一起参与机体内钙的代谢/骨钙的 磷酸化 –通过小肠中钙的吸收及排泄参与血钙的调节 –分泌受到血钙浓度的负反馈调节 –甲状旁腺机能亢进导致PTH分泌增加/甲状 旁腺肿瘤
甲状旁腺素的主要临床应用
诊断甲状旁腺功能亢进和继发性甲状旁腺功 能亢进症。 与降钙素和维生素K等共同调节机体钙磷代谢. Paget骨病（变形性骨炎），临床上出现高血 钙及PTH分泌增多。 诊断甲状旁腺功能低下症和甲状腺功能低下 症。
检测范围： 检测范围：0.500─300ng/ml 正常参考值： 正常参考值：
例数 健康妇女 绝经期前>20岁 绝经期后 骨质疏松患者 正常男人 18-29岁 30-50岁 51-70岁 N-MID骨钙素 5-95百分位
108 102 120 183 179 125
11-43 15-46 13-48 24-70 14-42 14-46
酸1−49）及大的N－MID片断（氨基酸1－43） 均存在于血液中。完整的骨钙素在外周血中 不稳定，羧基端43−44间的氨基酸易被蛋白 酶水解，裂解下来的N－MID则稳定得多。
Elecsys N−MID骨钙素测定方法 − 骨钙素测定方法 采用了针对骨钙素N端片段和N－MID片 段上的决定簇的二株单克隆抗体。因此能够 检测血清（或血浆）中稳定的N－MID片段和 N MID 尚未被分解的完整的骨钙素。与不稳定的C 端片段（氨基酸43－49）没有关系，从而确 保在常规实验室条件下获得稳定的检测结果。
四、骨矿密度测量(BMD) 骨矿密度测量
单光子吸收测定 利用骨组织对放射线的吸收与骨矿含量 成正比的原理，以放射性同位素为光源， 测定人体四肢骨的骨矿含量。其精确性和 重复性尚欠理想，对骨骼的改变反映较慢， 需1-2年时间。
双能X线吸收测定法 射线穿透身体之后，扫描系统将接受的 信号传送到计算机进行数据处理，计算骨矿 物质含量（BMC）、面积（AREA）、BMD。 在我国各大城市已逐渐开展，缺点是对骨骼 的改变反映较慢，需1-2年时间。
骨标志物与骨质疏松
骨质疏松的定义
哥本哈根（ 哥本哈根（1990年）及香港（1993年）国际 年 及香港（ 年 会议上提出的标准： 会议上提出的标准：以低骨量及骨组织显微 结构退变为特征的一种全身性骨骼疾病， 结构退变为特征的一种全身性骨骼疾病，伴 有骨脆性增加，易于发生骨折。 有骨脆性增加，易于发生骨折。1996年在阿 年在阿 姆斯特丹举行的国际会议把骨质疏松定义为： 姆斯特丹举行的国际会议把骨质疏松定义为： 可引起骨质减少和骨折高危状态的骨骼系统 疾病。 疾病。
型胶原交联氨基末端肽（ 血I型胶原交联氨基末端肽（INTP） 型胶原交联氨基末端肽 ） 为骨重建过程中I型胶原被降解后释放 入血的另一小片段。其含量和变化间接反 映骨吸收状态。 I型胶原交联（Crosslap） 型胶原交联（ 型胶原交联 ） 只存在于I型胶原C-末端肽，骨再建过 程中I型胶原分解产生，与其它胶原无交叉 反应。为骨代谢生化方面一个敏感、简便 的检测手段。
N-MID 骨钙素临床应用
1 在骨转化率较高的代谢性骨病患者 如 paget病，甲旁亢、氟骨病，可以出现血骨 钙素水平升高。比传统的碱性磷酸酶测定 更敏感，更具特异性。 2、甲状腺机能亢进症 甲亢患者血中骨钙 素水平升高，且与病情轻重程度呈正比。
3、骨肿瘤、尿毒症、佝偻病、卵巢切除术后 等血中骨钙素水平升高。 4、骨质疏松症患者因骨质丢失，血中骨钙素 水平下降。 5、绝经后妇女及妊娠中期的孕妇血中骨钙素 水平下降。
Elecsys β-crosslaps的优点 的优点
大大的缩短了检测时间 结果可靠 单样本检测 可作为日常检测 精确的监测治疗效果 无需稀释 易于操作
正常参考值
例数 均数 SD 均数+2SD ng/ml（pg/ml） ng/ml（pg/ml） ng/ml（pg/ml） 男性 30-50岁 165 50-70岁 109 >70岁 365 女性 停经前 254 停经后 429