固相合成原理 PPT
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DMF ：N,N-二甲基甲酰胺（N，N-dimethyformamideL）
MW：73.1；密度：0.94g/ml； 熔点：－61℃；沸点：152.8℃ 作用：良好溶剂、溶胀树脂、洗涤树脂
缩合试剂
HBTU
苯并三氮唑-N，N， N’，N’，-四甲基脲
甲基
六氟磷酸酯
NMM
N-甲基吗啡啉
HATU
2-(7-偶氮苯并三氮唑) -N，N，N’，N’-四
多肽固相合成基本原理
一、多肽合成简史
20世纪早期——Emil Fischer 引入肽与多肽的概念。
1920－1960——液相合成少数肽，但是纯度低、副产物多。
1963——Bruce Merrifield 建立固相多肽合成方法，solid-phase peptide synthesis (SPPS)。洛克菲洛大学电梯。1984，诺贝尔 化学奖。
脲六氟磷酸酯
MW：379.3
MW：101.2 密度：0.92
MW：380.2
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可以询问
10
The Peptide Quality Standard
DIC
N,N’-二异丙基 碳二亚胺
HOBt
羟基苯骈三氮唑
MW：126.2 密度：0.8
MW：135.1
缩合原理
PiP：哌啶、六氢吡啶 （Piperidine） MW：85.15；密度：0.86g/ml； 熔点：－7℃；沸点：106℃
固相载体
Wang 树脂 2-Cl-Trt-氯树脂（Cys、His、Pro） Rink Amide MBHA 树脂
Fmoc的脱除
Fmoc基团的芴环基 的吸电子作用使9-H 具有酸性，易被较 弱碱除去，反应条 件很温和 ；哌啶进 攻9-H,β消除形成二 苯芴烯，很容易被 二级环胺进攻形成 稳定的加成物： Fmoc－PiP（取代度 测定的就是其紫外 吸收值）
近40多年来，合成技术迅猛发展，合成超过100个长的肽已 不是梦想。
二、多肽固相合成基本原理
按氨基酸顺序，定向形成肽键，得到目 标分子；
C末端的氨基酸固定在树脂上，反应， 过滤洗涤，切割；
主要介绍Fmoc策略（α氨基保护基团为 Fmoc）
脱保护
Fmoc：9－芴甲氧羰基 （Fluorenylmethoxycarbonyl） MW：223.254
溶剂
DCM：二氯甲烷 （Dichloromethane）
MW：84.94；密度：1.33g/ml；熔点：－96.7℃；沸点：39.8℃ 作用：溶胀树脂、洗涤树脂
MeOH：甲醇（Methanol）
MW：32.04；密度：0.79g/ml； 熔点：－93.9℃；沸点：64.8℃ 作用：收缩树脂、洗涤树脂
切割
三氟乙酸（TFA ） 苯酚（phenol）、水（H2O）、乙二硫醇
（EDT）、三异丙基硅烷（TIS）、茴香硫 醚（thioanisole） Cocktail 法
“如果你敢于在自己不熟悉的领域突破框框， 从事研究，那么，你有可能获诺贝尔奖 ”
——R.B. MerrifTU/HBTU法
DIC/DCC法
缩合终点的判断
茚三酮检测（定性） 四氯苯醌检测（定性） 取代度测定（定量）
提高缩合效率的方法
增加氨基酸投量 延长反应时间 提高反应温度 更换反应液 换用活性更高的缩合试剂 更换反应溶剂（魔鬼溶剂） 超声、微波
副反应
消旋（His、Cys） 重排（Asp－Gly） 内成环（Pro） 封端（HBTU/HATU与树脂上的氨基）
MW：73.1；密度：0.94g/ml； 熔点：－61℃；沸点：152.8℃ 作用：良好溶剂、溶胀树脂、洗涤树脂
缩合试剂
HBTU
苯并三氮唑-N，N， N’，N’，-四甲基脲
甲基
六氟磷酸酯
NMM
N-甲基吗啡啉
HATU
2-(7-偶氮苯并三氮唑) -N，N，N’，N’-四
多肽固相合成基本原理
一、多肽合成简史
20世纪早期——Emil Fischer 引入肽与多肽的概念。
1920－1960——液相合成少数肽，但是纯度低、副产物多。
1963——Bruce Merrifield 建立固相多肽合成方法，solid-phase peptide synthesis (SPPS)。洛克菲洛大学电梯。1984，诺贝尔 化学奖。
脲六氟磷酸酯
MW：379.3
MW：101.2 密度：0.92
MW：380.2
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可以询问
10
The Peptide Quality Standard
DIC
N,N’-二异丙基 碳二亚胺
HOBt
羟基苯骈三氮唑
MW：126.2 密度：0.8
MW：135.1
缩合原理
PiP：哌啶、六氢吡啶 （Piperidine） MW：85.15；密度：0.86g/ml； 熔点：－7℃；沸点：106℃
固相载体
Wang 树脂 2-Cl-Trt-氯树脂（Cys、His、Pro） Rink Amide MBHA 树脂
Fmoc的脱除
Fmoc基团的芴环基 的吸电子作用使9-H 具有酸性，易被较 弱碱除去，反应条 件很温和 ；哌啶进 攻9-H,β消除形成二 苯芴烯，很容易被 二级环胺进攻形成 稳定的加成物： Fmoc－PiP（取代度 测定的就是其紫外 吸收值）
近40多年来，合成技术迅猛发展，合成超过100个长的肽已 不是梦想。
二、多肽固相合成基本原理
按氨基酸顺序，定向形成肽键，得到目 标分子；
C末端的氨基酸固定在树脂上，反应， 过滤洗涤，切割；
主要介绍Fmoc策略（α氨基保护基团为 Fmoc）
脱保护
Fmoc：9－芴甲氧羰基 （Fluorenylmethoxycarbonyl） MW：223.254
溶剂
DCM：二氯甲烷 （Dichloromethane）
MW：84.94；密度：1.33g/ml；熔点：－96.7℃；沸点：39.8℃ 作用：溶胀树脂、洗涤树脂
MeOH：甲醇（Methanol）
MW：32.04；密度：0.79g/ml； 熔点：－93.9℃；沸点：64.8℃ 作用：收缩树脂、洗涤树脂
切割
三氟乙酸（TFA ） 苯酚（phenol）、水（H2O）、乙二硫醇
（EDT）、三异丙基硅烷（TIS）、茴香硫 醚（thioanisole） Cocktail 法
“如果你敢于在自己不熟悉的领域突破框框， 从事研究，那么，你有可能获诺贝尔奖 ”
——R.B. MerrifTU/HBTU法
DIC/DCC法
缩合终点的判断
茚三酮检测（定性） 四氯苯醌检测（定性） 取代度测定（定量）
提高缩合效率的方法
增加氨基酸投量 延长反应时间 提高反应温度 更换反应液 换用活性更高的缩合试剂 更换反应溶剂（魔鬼溶剂） 超声、微波
副反应
消旋（His、Cys） 重排（Asp－Gly） 内成环（Pro） 封端（HBTU/HATU与树脂上的氨基）