实验二 凝集反应

操作步骤
• i． 取血：搓揉左手无名指的指腹——碘伏消 毒 —— 用 三 棱 针 刺 1-2 滴 血 —— 将 无 名 指 的 指 腹封住盛有盐水的试管管口，用倾倒法将血滴 洗入盐水中并混匀形成1%的血球悬液。
• ii． 鉴定：取洁净玻片一块，用标记笔在中央 划 线 分 区 ， 标 明 “ A” 、 “ B” 区 —— 在 “ A” 、 “B”区分别滴加抗A、抗B血清各1滴——用毛 细吸管吸取待检的血球悬液滴入抗A、抗B血清 中，用牙签两端分别拌匀——将玻片平持手中， 前后左右转动使之充分混匀，室温放置10-15 分钟后观察结果。
O_
_
A_
+
B
+
_
AB +
+
〖思考〗
ABO血型的遗传规律 ？父母血型分别为A型、B型，他们 子女的血型可能是何种？ ？父母分别为A型和O型，子女有无 可能是B型
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
三、E-花结形成实验
• 原理
人的外周血T淋巴细胞上特有能与绵羊 红细胞结合的受体，称E受体；在一定实验 条件下，绵羊红细胞与该受体结合形成以T 细胞为中心，四周绕以绵羊红细胞的玫瑰 花团，故称E花结实验。
注意事项
• 取血时，注意无菌操作，避免HBsAg的 交叉污染（*HBsAg携带者）；
• 刺血时，尽可能一次性成功，用力适当， 让血自然流出或搓揉后流出为佳，勿强 行挤压。
• 鉴定时，滴1滴抗血清及血球悬液即可， 多则两边易混；牙签两头不可混用；
• O型血无凝集现象，无须反复检测。
结果判断
血型 抗B血清 抗A血清
LOGO
谢谢！
血型
A
红细胞上的凝集原（抗原）
A
血清中的凝集素（抗体）
抗B
☆ABO血型系统的 抗体为天然抗体， 主要为IgM，不能通 过胎盘。
B
AB
O
B
A和B
无抗原
抗A
无抗体
抗A和抗B
1. 如果交叉配血试验的两侧都没有凝集反应，为配血 相合， 可以进行输血；
2. 如果主侧有凝集反应，则为配血不合，不能输血； 3. 如果主侧不引起凝集反应，而次侧有凝集反应，只
E受体与CD2分子、LFA-2（淋巴细胞 功能相关抗原）为同一物质。
花结分类：
Ea-RFC(效应T细胞)：正常值为15-35%。 E-RFC(总和)：正常值为60-80%。 意义：
① 用于检测患者外周血中T细胞的比例及数目，间接反 映患者细胞免疫功能。
② E-受体为T细胞所特有，是鉴定T细胞的重要标志之一， 还用于T细胞的分离。
ABO血型系统中有两种抗原，分别称为A抗原和B抗原， 均存在于红细胞膜的外表面。
根据红细胞上所含抗原种类将人类血型分为如下血型：
血型
A
红细胞上的凝集原（抗原）
A
B
AB
O
B
A和B
无抗原
1. 抗原本质：血型抗原是镶嵌于红细胞膜上的糖蛋白与糖脂， ABO抗原特异性是在H抗原基础上形成的
2. 抗体本质： • 血浆中存在两种相应的抗体即抗A抗体和抗B抗体
试管凝集反应示意图
肥达氏反应----用已知伤寒菌的H(鞭毛)和O(菌体)以及 甲型(A)与乙型(B)副伤寒沙门氏菌的标准液与病人血清做 凝集试验，用于伤寒副伤寒的辅助诊断或用于流行病学调 查的免疫凝集实验。
血型鉴定的原理
人的红细胞表面有20几种血型抗原系统 ABO血型系统是第一个被描述的红细胞血型系统，由 Landsteiner于1901年提出：
能在应急情况下输血，输血时不宜太快太多 （<300ml），并密切观察，如发生输血反应，应立 即停止输注。
实验材料
载玻片 1块/每人 **用完各自用水冲洗净置消毒缸 三棱针 1根/每人 用后弃垃圾斗 棉签 根/每人（先取再取1) 用后弃垃圾斗 牙签 1根/每人（两端使用） 用后弃垃圾斗 碘伏 生理盐水试管 试管架 标记笔