菌种保藏方法
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菌种保藏方法及重要保藏机构简述
楼骏陈令会钱佳颖陈真真
（浙江大学宁波理工学院07生物技术浙江宁波315100）
【摘要】本文简述了菌种的保藏方法并介绍了国内外重要菌种保藏机构，并比较了各菌种保藏方法的优缺点。
【关键词】菌种保藏保藏机构
菌种是国家的重要资源，是从事微生物学以及生命科学研究的基本材料，特别是利用微生物进行有关生产更离不开菌种。所以，菌种保藏是进行微生物学研究和微生物育种工作的重要组成部分。菌种保藏是指保藏机构依法以适当的方式收集、检定、编目、储存菌种或样本,维持其活性和生物学特性,并向合法从事病原微生物相关实验活动的单位提供菌种或样本的活动。保藏机构是指由卫生部指定的,按照规定接收、检定、集中储存与管理菌种或样本,并能向合法从事病原微生物实验活动的单位提供菌种或样本的非营利性机构。
1．几种常用的菌种保藏方法：
低温斜面
试管保藏法穿刺保藏
法
液体试管
保藏法
液体石蜡
斜面保藏
法
无菌蒸馏
水保藏法
液氮罐超
低温保藏
法
主要措施低温低温，避氧低温，避氧低温，阻氧低温，阻氧
超低温，保
护剂
常用菌种各大类
细菌，酵母
菌
各大类各大类* 各大类各大类
培养基按不同细
菌的营养
要求制备
按不同细
菌的营养
要求制备
按不同细
菌的营养
要求制备
按不同细
菌的营养
要求制备
按不同细
菌的营养
要求制备
麦芽汁琼
脂斜面
保护剂无无无无无10%甘油或二甲基亚砜
保藏温度4℃4℃4℃4℃4℃
-150℃~
-196℃
保藏期1~6月1~12月1~12月1~2年4年>15年
优点操作简单,
使用方便,
不需特殊
设备
穿刺法可
保藏细菌2
年之久
存活率高
变异少
简单易行
保藏时间
长能较好
保持发酵
活性
较斜面保
存操作简
便可减少
翻管次数
存活率高，
稳定性强，
保藏时间
长，
缺点容易变异
污染杂菌
的机会较
多
操作程序
较麻烦，需
一定设备
条件
直立存放，
占空间大，
不便携带
必须定期
向贮罐补
充液氮来
保持其温
度
真空冷冻
干燥保藏
法
砂土管保
藏法
生理盐水
保藏法
甘油冷冻
保存法
主要措施
干燥，低
温，无氧，
保护剂
干燥，无营
养
干燥，低温
低温，保护
剂
常用菌种各大类
产孢子的
微生物
各大类
不产孢子
或芽孢的
微生物
培养基
按不同细
菌的营养
要求制备
按不同细
菌的营养
要求制备
按不同细
菌的营养
要求制备
按不同细
菌的营养
要求制备
保护剂可选择血无无无
清、脱脂牛
奶和海藻
糖等
保藏温度5~7℃4~6℃-80℃保藏期>5~15年1~10年16月约10年
优点
存活率高
变异少方法简便，
设备简单，
适用于产
孢子和有
芽
孢的菌种
保藏
操作简便,
不需特殊
设备, 适合
于液体深
层培养菌
株的保存
缺点但操作程
序较麻烦
需一定设
备条件
在真空干
燥过程中，
机械力容
易造成孢
子的死亡，
* 对石油发酵微生物不适宜
2．重要的保藏机构：
2.1国内主要菌种保藏机构及简介
国内主要菌种保藏机构名称简介
中国农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC)—1980 中国国家级农业微生物菌种保藏管
理专门机构。农业菌种中心设有液氮
菌种保藏库、冷冻干燥菌种保藏库、
矿油斜面菌种保藏库。编入中国农业
菌种目录（2001 年第二版）的库藏
菌种有2490 株，包括：细菌、放线
菌、丝状真菌、酵母菌和大型真菌（主
要是食用菌），共166个属510种（亚
种或变种）。
中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)—1979 我国唯一的国家级工业微生物菌种
资源保藏管理中心，保藏各种工业微
生物菌种资源包括：细菌、放线菌、
酵母菌、丝状真菌和大型真菌，共67
个属251种，近3000株，库藏备份
80000余支。
中国典型培养物保藏中心(CCTCC) 保藏的微生物包括细菌、放线菌、酵
母菌、真菌、单细胞藻类、人和动物
细胞系、转基因细胞、杂交瘤、原生
动物，地衣，植物组织培养、植物种
子、动植物病毒、噬菌体、质粒和基
因文库等各类微生物（生物材料/菌
种）。
中国兽医微生物菌种保藏管理中心(CVCC)—1979 主要采用超低温冻结和真空冷冻干
燥保藏法，长期保藏细菌、病毒、虫
种、细胞系等各类微生物菌种。到目
前为止，收集保藏的菌种达230余种
(群)、3000余株。20多年来，中国兽
医微生物菌种保藏管理中心为我国
科研院所、高等院校及兽医生物制品
的生产企业，提供了6万多株各类兽