呼吸道病原体检测在临床中的应用

在养老院获得的肺炎
数据来源： 《各国社区获得性肺炎指南对非典型病原体的重视情况》 《肺炎的诊断与治疗研究进展》 《重视非典型病原体在CAP致病中的作用》 《要重视非典型病原体在呼吸道疾病中的致病作用》等
重视多种病原体联合检测
2016年中国居民主要疾病死亡率（1/10万）
180
164.51
城市居民 农村居民
16 14 12 感染性疾病死亡率（1/10万） 结核死亡率（1/10万）
10
8 6 4 2 0 1990 1995 2000 2005 2010 2012
2000年以后相对以前有明显降低，但2010年后有小幅反弹趋势
呼吸道病原体流行特点
最常见的感染性疾病
非典型病原体的感 染率逐年提高，占 CAP的 40-60% 公园




小结
2、九项病原体联合检测，不仅可以检测 五项病毒，而且可以检测肺炎支原体、 肺炎衣原体、嗜肺军团菌、Q热立克次 体，同步完成多种疑似病原体鉴别诊 断。克服单项检测为临床提供片面实验 室依据的缺陷。 3、检测IgM抗体，利于早期发现。 4、标本为血清标本（15微升），容易采 集、容易保存。 5、准确检测出感染的病原体，能为临床 诊断、治疗提供强有力的帮助 6、采用间接免疫荧光法，技术成熟，准 确性好。
呼吸道病原体的实验室检测方法

金标准：培养 分子生物学检测：核酸检测、PCR； 病原检测:直接免疫荧光法检测病原； 血清学检测:ELISA、IFA等；
从标本类型看抗原检测

优势 WHO推荐，直接检测，无窗口期 鼻咽拭子，无创采样 局限性 采样要求高，不规范采样容易导致假阴性 检测上呼吸道病原体
上呼吸道感染 （Upper Respiratory Infection） 下呼吸道感染
（Lower Respiratory Infection）
呼吸道感染常见病原体
正粘病毒： 流感病毒 RNA病毒 副粘病毒：副流感病毒、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒等 其 他： 风疹病毒、鼻病毒、冠状病毒 DNA病毒：
潜伏期3～8天，急骤发热，自第1～2日即39℃以上的高
热，第3～4日呈不规则的高热；60%以上的病例体温超过 40℃ 在呼吸、神经、循环、消化等系统都有症状显现
呼吸道合胞病毒
RNA病毒 该病经空气飞沫和密切接触传播； 多见于新生儿和6 个月以内的婴儿 在冬季爆发流行 潜伏期3-7天，IgM抗体在发病1周出现，持续2～3个月
呼吸道病原体检测在临床中的应用
一

一 呼吸道相关疾病 我国呼吸系统感染现状
呼吸道病原体实验室检测方法
呼吸道感染概况和现状
二

三 九项呼吸道病原体联合检测的 临床应用

常见呼吸系统病原体及感 染情况 呼吸道感染病原体的实验 室检测
呼吸道感染
呼吸道感染（Respiratory Tract infections）是最常见的 感染性疾病之一
检测原理（间接免疫荧光法）
九种呼吸道病原菌的潜伏期和IgM抗体出现
潜伏期 军团菌 肺炎支原体 立克次氏体 衣原体 4-10天 14-21天 12-19天 30天左右 IgM抗体出现时间 4-7天 感染后1周 感染后2周 感染后2-3周
腺病毒
合胞病毒 流感病毒 副流感病毒
2-14天
3-7天 2-7天 1-7天
肺炎支原体
介于病毒与细菌之间一种没有细胞壁的病原体； 40%以上的非典型肺炎病例是由肺炎支原体引起的； 冬季较多，地区性流行； IgM抗体检测，PCR是目前公认的检测标准；
治疗：大环内酯类首选、喹诺酮类药物。
Q热立克次体
介于最小细菌和病毒之间一类的原核细胞型微生物 大部分病例发于春天或初夏，流行分布全世界 绵羊和牛是人类的主要传染源，吸入感染的污染物 多见于男性青壮年，潜伏期12～39天，平均18天 多急骤起病，发热、头痛、寒颤，肌痛、胸痛 体温可升至40℃持续1～3周
病毒
腺病毒
常 见 病 原 体
球菌
G+： 肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌 G-： 脑膜炎奈瑟菌
细菌
杆菌
G+： 结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌、厌氧菌炭疽芽孢杆菌等
G-：肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌、流感嗜血杆菌、军团菌、 铜绿假单胞菌、百日咳杆菌
真菌：
酵母菌、曲霉菌、毛霉菌
其它： 肺炎支原体、肺炎衣原体、立克次体等
4-7天
4-8天 4-8天 4-8天
引用文献

------九种呼吸道病原菌IgM抗体出现时间
1.陆慰萱，张运剑.军团菌肺炎[J]. 国际呼吸杂志 2007,27(8):634-635. 2. 刘丽，林花，成焕吉等.儿童社区获得性肺炎肺炎支原体感染的快速诊断[J].中国妇幼 保健,2006,21(9):1289-1291. 3.鲜耀国，曹建新，闫兰等. Q热C Q fever)的流行病学、预防与治疗[J].世界感染杂志 ,2008,8(4):310-313. 4. 季 伟 . 儿 童 呼 吸 道 肺 炎 衣 原 体 感 染 流 行 病 学 与 临 床 [J]. 实 用 儿 科 临 床 杂 志 ,2007,22(16):1209-1212. 5. 孙 桂 莲 等 . 腺 病 毒 肺 炎 的 病 原 学 诊 断 与 临 床 观 察 [J]. 白 求 恩 医 科 大 学 学 报 ,1994,20(3):271-272. 6. 沈怡，高传化.小儿下呼吸道3种常见病毒感染359例临床分析[J].中华现代儿科学杂 志,2005,2(6):488-489.
（一）最常见的非典型病原体
肺炎支原体、肺炎衣原体、军团菌等（狭义的非典型病原体） ①感染比例高，超过“非典”50% ②临床症状：干咳为主，少痰或无痰，肺外症状较常见明显，尤其军团菌感染 ，表现相对较重，多脏器受累明显。可有高热、耳鸣、相对缓脉、血尿、 腹痛、腹泻、肝酶升高、电解质紊乱、精神神经症状等 ③β-内酰胺类 （青霉素类、头孢类）、氨基糖苷类（链霉素）等药物无效 ④治疗：呼吸喹诺酮类、大环内酯类
混合感染常见，细菌 合并非典型病原体感 染最常见，重视多种 病原体联合检测
临床医师如何应对呼吸道感染
如何选择诊断方法？
依据是什么？
国内外呼吸道感染指南介绍
美国感染病学会及胸科学会
欧洲呼吸学会、欧洲临床微生物学与感染性疾病学会
英国胸科学会、英国国家优化卫生与保健研究所
中华医学会呼吸病学分会
复旦大学最佳医院排行榜前40佳
1 北京协和医院 2 四川大学华西医院 3 中国人民解放军总医院 4 上海交通大学医学院附属瑞金医院 5 第四军医大学西京医院 6 复旦大学附属华山医院 7 复旦大学附属中山医院 8 中山大学附属第一医院 9 北京大学第一医院 10 华中科技大学同济医学院附属同济医院 11 北京大学人民医院 12 北京大学第三医院 13 浙江大学医学院附属第一医院 21 中南大学湘雅医院 22 中山大学肿瘤防治中心 23 中国医学科学院阜外心血管病医院 24 首都医科大学附属北京安贞医院 25 上海交通大学医学院附属第九人民医院 26 广东省人民医院 27 山东大学齐鲁医院 28 第三军医大学西南医院 29 中国医学科学院肿瘤医院 30 首都医科大学宣武医院 31 中国医科大学附属盛京医院 32 中山大学附属第三医院 33 第二军医大学长征医院
治疗：氯霉素、四环素.
肺炎衣原体
5-15岁青年易被感染，尤其是人群聚集处 多起病缓慢，潜伏期30天左右 临床多出现流感样的症状，发热一般低于38度，数天至数周 后出现持续性干咳，若不及时治疗会持续数月 阳性率一般在1-5%左右
腺病毒
无外壳的双链DNA病毒，与人类呼吸道感染密切有关 多发生于7～24月婴幼及老人，冬春两季常见
①除组织胞浆菌为原发吸入性感染外，多数为条件致病 ②多发生在免疫低下患者和长时间接受广谱抗生素治疗的患者
白色念珠菌肺炎
各病原体在CAP中感染率
病原菌 肺炎链球菌 肺炎支原体 流感嗜血杆菌 肺炎衣原体 军团菌 病毒类 混合感染（两种或以上） 其他及不明原因
a
感染率（%） 27 15 12 7 4.8 8.5 17 13
131.64 119.5 135.95 120.33 103.9
160 140 120 100 80 60 40 20 0
151.47
前四位死因构成比： 农村：77.43% 城市：80.19%
58.86
75.59
34.79
29.34 23.82 17.32 10.66 16.79 15.25
2006-2012年感染性疾病病死率（城 市）

抗原与抗体检测采样标准化及难易程度对比图
抗原
抗体
从样本角度讲，血清是最为 理想的检测标本类型。
检测IgG抗体还是IgM抗体？

IgM IgG
九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测
嗜肺军团菌
广泛分布于天然淡水域或人工水域，是一种兼性细胞内致病菌， 有鞭毛、革兰氏阴性短小球杆菌。 易感人群为老年人、吸烟者、慢性肺部患者、免疫功能低下、癌症 病人、肾透析病人和艾滋病人。 症状类似于肺炎，表现为发冷、不适、肌痛、头晕、头痛，伴有烦 躁、呼吸困难、胸痛。９０％以上患者体温急剧上升，咳嗽、粘痰， 偶尔出现腹泻呕吐胃肠道紊乱，重症患者可发生肝功能变化及肾衰竭 。 欧洲和北美军团菌肺炎占社区获得性肺炎前4位； 我国各省市每年均有病例报告。 治疗：阿奇霉素 红霉素
临床价值
应用价值
临床合理用药首先需要对病原体进行有效检测； 血清IgM抗体是近期感染的有效标志物，早期检测对相关疾病的治疗具有非常 重要的意义； 本检测项目可以为临床疑难病症、重症等患者提供可靠的实验室依据； 流行病学资料的搜集。
应用科室
呼吸科、儿科、老年科、感染科、 ICU、 血液科、肿瘤科、肾病科、新生儿 科、消化科。
抗 感 染
2015年全国细菌耐药监测报告
不同地区甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌分离情况
2015年全国细菌耐药监测报告
甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率
2015年全国细菌耐药监测报告

肺炎链球菌红霉素耐药率
2015年全国细菌耐药监测报告

肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素耐药率
明确感染病原体，针对性使用抗生素
新的病原体还在不断地出现：如SARS病毒、高致病性禽流感病毒、人偏肺病毒、人 感染H7N9禽流感等
பைடு நூலகம்
呼吸道感染概况
上呼吸道感染
鼻腔、咽、喉部 ----- 常见病因病毒，少数为细菌；
下呼吸道感染(最常见的感染性疾患)
气管、支气管、肺部----由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等 微生物引起。
以社区获得性肺炎(CAP)多见
呼吸道感染概况
一、典型“致病菌”
细菌：肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌等 症状：典型，咳嗽、脓性痰、胸膜炎性胸痛，一般都伴有发热，或有脓血 痰 病史：①悠久，古代的“瘟疫”很多细菌性肺炎 ②重症致死性肺炎很多是细菌性 ③上世纪50年代以前的肺炎90%以上为细菌性肺炎，现在报道约在 40%左右 ④肺炎链球菌大约占在60%
流感病毒
球形RNA病毒 根据其核蛋白的抗原性可以分为三类: 甲型、乙型、丙型 呈季节性周期性流行爆发（12月-4月） 甲型流感的流行每年都会发生 乙型流感的流行只在每3-6年爆发一次，感染人数超过总 人口的25%
副流感病毒
单链的RNA病毒 致病性仅次于呼吸道合胞病毒，尤其在儿童及老年人群中 全年均发生 第 1 和第 3 型常见于幼儿，局部流行发生于托儿所、儿科病 房、小学及其他儿童场所 第3型为地方性流行，传染性强
呼吸道病原体感染概况
二、非典型病原体
①进展的、开放的概念，始用于20世纪30年代末，60年代首次发现了非典 型的病原体——肺炎支原体 ②泛指各种能引起肺炎的、临床表现与典型肺炎不同的各种病原体（广义） ③临床症状不典型，差异大 ④在CAP中感染的比例逐年增加，据报道大约占40-60%，逐渐引起各国医 疗工作者注意
（二）病毒类
流感病毒、副流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、冠状病毒、禽流感病毒等 ①季节性或区域性流行 ②临床症状：干咳为主，少痰或无痰、呼吸困难，低氧血症 ③治疗：主要依靠对症支持治疗。早期抗病毒治疗可能效果较好。预后取决于 病毒类型和宿主对病毒的反应
（三）真菌性肺炎
念珠菌，曲菌，新型隐球菌，放线菌，组织胞浆菌，毛霉菌属等