家兔DIC实验报告

实验 2 急性 DIC

实验时间： 5 月 23 日

实验目的】

1、学习复制急性 DIC 动物模型的方法。

2、了解实验室诊断 DIC 的常用方法及其意义。

3、结合实验和血液学指标测定结果，联系理论知识加深理解

实验对象】

药品和试剂】

1%普鲁卡因、 %枸椽酸钠液、 2%兔脑粉浸出液（临用时配制）、饱和氯化钠液、生理盐 水、 1%鱼精蛋白液。

实验器材】

兔台、哺乳动物手术器械一套（包括手术刀、普通剪刀、眼科剪刀、止血钳）、电热恒 温水浴箱、台式离心机、

721分光光度计、秒表、刻度离心管（10ml ）、试管（13X 75mm 、

15 X 100mm ）、刻度吸管（2ml 、5ml ）、试管架、微量定量移液器（10卩、1 50卩、1 500卩）1、 橡皮吸球、乳胶

滴管、玻片、棉球、纱布、颈动脉插管（硅胶管）

2 根、动脉夹，注射器。

实验方法】

1、将家兔仰位固定兔台、 颈部剪毛、 皮下 1%普鲁卡因局部浸润麻醉，

作正中纵切口 （约

3~4cm 左右），常规暴露一侧颈总动脉，结扎其远心端，近心端用动脉夹夹闭；在结扎线下 方剪口插入硅胶管并固定，松

夹放血

7ml 至盛有 %枸椽酸钠液 2ml 的 10ml 刻度离心管中，

立即混匀离心（ 3000rpm ， 5分钟），分离血浆，备作纤维蛋白原定量与 3P 试验。再松动动 脉夹放血 2~3 滴于洁净玻片上，作凝血时间测定。

2、复制Die 模型：用10ml 注射器吸取2%兔脑粉浸液，按3ml/kg 的量缓慢（以每分钟 2ml 的速度为宜）注入家

兔耳缘静脉内，同时观察其反应，如出现呼吸急促、躁动不安，即 停止注射，速行第二次采血（方法同 1），如未出现反应可注射毕后采血。重复上述各项指 标测定。

4、整理并分析实验结果。

附 录】

Die 的病因及发生机制。

家兔 1 只，雌（未孕）雄均可。体重 kg 。

1、凝血时间测定（玻片法）：放血 2~3滴于洁净玻片上，同时按动秒表，用清洁废针

2、纤维蛋白原含量测定（饱和盐水法）：取 15 X 100mm 试管一支，置样本血浆，加

入饱和氯化钠溶液，立即混匀，于

37C 水浴中孵育3分钟取出，再混匀后以 721分光光度

计，520nm 滤光板比浊，读取光密度值；以生理盐水替代饱和氯化钠液作同样操作后为空 白对照管调零，测出光密度，按下式计算；

正常

注射后

正常

注射后

N 测 D 测

1 / / / / /

/

/ / 2 1'32 6'8 - -

372

190

3 0'22 1 '2

-

+

410

186 4

0'55

0 '0/1 '0

+++

496

224/232

OD 520nm Fbg(mg/dl) OD 520nm Fbg(mg/dl)

组别

CT(mi n)

3P test

头挑拨血滴, 见有明显血丝出现，迅即停表，记录时间。

测定管光密度值1000

0.5

纤维蛋白原（mg/dl ）

3、3P 试验：取13 X 75mm 试管一支, 水

浴中15分钟后取出，于黑色背景下观察, 性。

置血浆，加入1%鱼精蛋白液，轻轻摇匀，于37 C 如见絮状沉淀或胶冻状即为阳性，清澈则为阴

【实验结果】

【讨论】

1、家兔实验性 DIC 的致病原因:

兔脑脊液属于组织因子，

大量的兔脑脊液静脉注射后，

激活家兔的外源性凝血系统，

启

动凝血过程，依次激活凝血因子 FIX,FVIII,FX 等和凝血酶，从而使血小板聚集， 使纤维蛋白原

变成纤维蛋白，促进凝血。此外，凝血酶反馈性激活 FIX,FX,FXI,FXI 等，扩大凝血反应。此

为高凝期，微循环易形成广泛的微血栓。

大量凝血酶的激活和微血栓的形成， 大量消耗了血液中的凝血因子和血小板， 可能继发 性激活纤溶系统，造成凝血系统和纤溶系统不平衡， 血液处于消耗性低凝期， 有明显出血症 状。

DIC 时产生的大量凝血酶和 FXIIa 等激活纤溶系统，产生大量纤溶酶，导致纤溶亢进，

形成大量纤维蛋白降解产物，抗凝作用明显，为继发性纤溶亢进，此时出血十分显著。 （厉

彬杰）

2、CT 测定的原理：新鲜血液离体后，因子被异物表面（玻璃）激活，启动了内源性凝 血。由于血液中含有内源性凝血所需

的全部凝血因子、血小板及钙离子，血液则发生凝固。 血液凝固所需时间即为凝血时间（clotti ng rime , CT ）。

3、由实验结果分析,

发生DIC 后，凝血时间变长。

机制：凝血物质被消耗而减少：在 耗，使得血液中纤维蛋白原、凝血酶原、 生障碍。

纤溶系统激活：血液中 F 刘激活的同时，激肽系统也被激活，产生缓激肽酶，使纤溶酶 原变成纤溶酶，激活纤溶系统。纤溶酶除了可使纤维蛋白降解外，还可水解凝血因子，如：

FV 、F 忸、凝血酶、F 刘等，使凝血功能发生障碍，使得凝血时间变长。

纤维蛋白（原）降解产物形成：在凝血过程中，凝血酶使纤溶蛋白原转变为纤维蛋白单 体，最终形成交联的纤维蛋白多聚体。纤溶系统激活后，

纤溶酶分解纤维蛋白原， 裂解出纤

维肽A 和纤维肽B ,余下片段为X 片段，继续被分解为 D 片段和丫片段，丫片段可继续分解 为D 和E 片段。如果纤维蛋白原先经凝血酶作用为纤维蛋白，纤溶酶再分解纤维蛋白，则 可使其分解为 X ' Y ' D ' E 及各种二聚体、多聚体等片段。纤溶酶水解纤维蛋白（原）片 段，统称为纤维蛋白（原）降解产物（ FDP ）。这些片段有明显的抗凝作用，如： 片段可妨碍纤维蛋白单体聚集，

Y 、E 片段有抗凝血酶作用。此外，多数碎片可与血小板膜

1 '0 2'0 +++

240 204 0'24

/

462

84

DIC 发生、发展过程中，大量血小板和凝血因子被消 FV 、F 忸、FX 及血小板明显减少，使凝血过程发

X 、丫、D