志贺氏菌检验方法

致病因素
志贺氏菌的致病因素包括侵袭力、内毒 素，外毒素。志贺氏菌的菌毛能粘附于回肠 末端和结肠粘膜的上皮细胞表面，继而在侵 袭蛋白作用下穿入上皮细胞内，一般在粘膜 固有层繁殖形成感染灶。各型痢疾杆菌都具 有强烈的内毒素。志贺氏菌A群Ⅰ型及部分II 型菌株还可产生外毒素，称志贺氏毒素。
志贺氏菌属（Shigella）是人类细菌性 痢疾最为常见的病原菌。细菌性痢疾是最常 见的肠道传染病,夏秋两季患者最多。 可经由 食物，水，日常接触，苍蝇等传播。
志贺氏菌检验流程图
检样 25 g（或25 mL）样品+
GN增菌液225 mL
36 ℃±１℃，6 h～8 h
检样 25 g（或25 mL）样品+ 志
贺氏菌增菌肉汤225 mL
41.5 ℃±１℃， 16 h～20 h厌氧培养
XLD琼脂
MAC琼脂或志贺氏菌显色培养基
36 ℃±１℃，20 h～48 h
挑取可疑菌落 TSI，葡萄糖半固体， 营养琼脂斜面
血清学分型
生化鉴定
志贺氏菌属分群及分型结果 报告
XLD琼脂平板
志贺氏菌
粉红色至无色，半 透明、光滑、湿润、 圆形、边缘整齐或 不齐，直径1 mm～ 2 mm。
沙门氏菌
菌落呈粉红色，带或 不带黑色中心，有些 菌株可呈现大的带光 泽的黑色中心，或呈 现全部黑色的菌落； 有些菌株为黄色菌落 ，带或不带黑色中心 。
志贺氏菌检验 方法
1
志贺氏菌简介
2
志贺氏菌检验
生物学性状
志贺氏菌为革兰氏阴性杆菌，菌体短 小，长约2-3μ m ,宽0.5-0.7μ m。不形成芽 胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛 。为兼性厌
氧菌，在有氧和无氧条件下均能生长；最 适生长温度为 36℃，最适pH为7.2～7.4； 36℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、 光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直 径约2mm，宋内氏菌菌落一般较大，较不 透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液 体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。
麦康凯琼脂平板
无色至浅粉红色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘 整齐或不齐，直径2 mm～3 mm。
培养物来自百度文库出现下述情况之一者即可弃去：
a）在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长； b）发酵乳糖或蔗糖的； c）不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的； d）产气的（福氏志贺氏菌6型可产生少量气 体）；
e）产生硫化氢的； f）有动力的培养物
抵抗力
志贺氏菌属在外界环境中的生存力， 对理化因素的抵抗力较其他肠道杆菌为弱， 对酸敏感 。
一般在潮湿土壤中能存活34天，37℃ 水中存活20天，在粪便内（室温）存活11 天。日光直接照射30分钟，56-60℃10分即 被杀死，对高温和化学消毒剂很敏感，1% 石炭酸中15-30分钟即被杀死，对氯霉素、 磺胺类、链霉素敏感，但易产生耐药性。
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4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株， 可用鲍氏多价1、2、3分别检查，并进一步用 1～15各型因子血清检查。如果鲍氏多价血清 不凝集，可用痢疾志贺氏菌3～12型多价血清 及各型因子血清检查。
进一步的生化试验
1.VITEK GNI+ (革兰氏染色，氧化酶) 2.API 20E (革兰氏染色，氧化酶) 3.志贺氏菌生化鉴定套装
2——志贺氏菌 3——沙门氏菌 4——大肠杆菌
血清学分型
凡疑为志贺氏菌，挑取营养琼脂斜面上的培养 物，做玻片凝集试验。
先用4种志贺氏菌多价血清检查，如果由于K抗 原的存在而不出现凝集，应将菌液煮沸后再检查； 如果呈现凝集，则用A1、A2、B群多价和D群血清 分别试验。
如系B群福氏志贺氏菌，则用群和型因子血清分 别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见 附表。可先用群因子血清检查，再根据群因子血清 出现凝集的结果，依次选用型因子血清检查。