紫杉醇

>99.5% 成品
16Mpa压力层析，TLC
检测，目标段丙酮-石油 75%~80%
醚结晶，干燥
半成品
50℃ 真空干燥
丙酮-石油醚 系统 洗Baidu Nhomakorabea次
紫杉醇作用机制研究
• Suffness 博士采用新引进的黑色素瘤及其 他肿瘤对紫杉醇重新进行活性筛选。
• 1974年发现紫杉醇对黑色素瘤（B16)有很 好的活性。
• 1964.5.22 发现红豆杉树皮样品的提取物对 KB细胞有毒性。
紫杉醇的发现
• 1964.9 Barclay博士重回采集处采集大量太 平洋红豆杉树皮，并送给北卡罗来纳州的 Wall (Triangle Research Institute).
• 1966.9 Wall 和 Wani 采用活性追踪实验发 现并分离出抗肿瘤作用的活性成分，收率 仅为0.004%。
• 1992年施贵宝公司把开发的紫杉醇针剂向 FDA递交了新药申请，6个月后FDA批准紫 杉醇上市，主要用于晚期卵巢癌II期治疗。
紫杉醇作用机制研究
• 1993年施贵宝公司将其注册商品名 Taxol，并获 得了紫杉醇生产与临床研究等方面10年的专利 权利。
• 1994年紫杉醇销售额即达4亿美元，2000年达 16亿美元，创下单一抗癌药销量之最，被称为 “重磅炸弹（block buster）”。目前已成为世 界销量第一的抗肿瘤药，同时也成为世界上公认 的广谱强活性抗癌药物。
提取紫杉醇，以备后续研究之用。
紫杉醇作用机制研究
• 1989.8 美国国家卫生研究所（NIH）通过 公开招标向社会寻找开发紫杉醇的公司， 结果施贵宝公司以提供17kg紫杉醇的代价 获得了紫杉醇药品研究和开发专有权。
• 1989年完成了紫杉醇的I和II期临床试验， 1990年开始进行III期临床试验。
• 1977年NCI将紫杉醇列入候选药物。 • 1978.11 发现紫杉醇能够非常明显地使异种
移植的乳房肿瘤变小。
紫杉醇作用机制研究
• 1979年，美国爱因斯坦医学院分子药理学 家Horwitz博士阐明了紫杉醇独特的抗肿瘤 作用机制：紫杉醇可使微管蛋白和组成微 管蛋白的微管蛋白二聚体失去动态平衡， 诱导与促进微管蛋白聚合、微管装配、防 止解聚，从而使微管稳定并抑制癌细胞的 有丝分裂和防止诱导细胞凋亡，进而有效 阻止癌细胞的增殖，起到抗癌作用。
• 1967.6 Wall 和 Wani 分离到一种白色的结 晶单体，命名为紫杉醇（Taxol)。
紫杉醇的发现
• 1971年 Wall、Wani 和 McPhail 利用核磁 共振技术和单晶X衍射确定了紫杉醇的化学 结构。
• 1971.5 Journal of the American Chemical Society ,JACS) 报道了这个初显抗肿瘤活 性的天然化合物。
紫杉醇的提取与分离
粉碎，加85%~95%乙醇
红豆杉树皮
提取液
35℃~55℃提取3次
50℃~70℃ 减压浓缩
浓缩液 氯 仿 萃 取
TLC检测
硅胶柱层析 氯仿浸膏 浓缩 氯仿萃取液
分段合并浓缩 氯仿-甲醇梯度洗脱
5%~8%半成品 丙酮溶解 硅胶柱 丙酮-石油醚梯度洗脱
TLC检测
20%~25%半成品 分段合并浓缩
紫杉醇的发现
紫杉醇的发现
紫杉醇的提取与分离
• 提取：传统溶剂提取大多采用甲醇、乙醇、丙酮、 甲醇-二氯甲烷（1：1）等溶剂浸提，提取液蒸除 溶剂得到浸膏，以等体积水稀释，先用石油醚萃 取除去脂溶性杂质，继用二氯甲烷或氯仿萃取， 合并萃取液，回收溶剂得浸膏状提取物。近期研 究以乙酸乙酯-丙酮（1：1）的混合溶剂提取效果 最好。
紫杉醇的提取与分离
• 分离 ：一般采用硅胶常压柱、低压柱、干柱等色 谱方法分离，以二氯甲烷-甲醇或己烷-丙酮等溶 剂进行梯度洗脱，往往要进行多次柱色谱分离才 能得到纯品。用以C18反相色谱柱进行分离的制 备性HPLC法纯化分离紫杉醇效果较好。其他分 离方法还有高速逆流色谱法（HSCCC）、双向薄 层色谱法（MTLC）及超临界萃取法（SFE）等。
紫杉醇（Taxol)
研究背景
1.1955年 National Cancer Institute（NCI） 成立Cancer Chemotherapy, National Service Cancer(CCNSC),1958年开始大规 模从植物中筛选抗癌有效成分。
2.1960.7 NCI 委托 the United States Department of Agriculture(USDA) 的植物 学家每年向CCNSC提供1000种植物供抗癌 药物筛选。
紫杉醇的发现
• 全世界共11个种，中国有4个种和1个变种， 分别为东北红豆杉、西藏红豆杉、云南红 豆杉、中国红豆杉和南方红豆杉（变种）。
紫杉醇的发现
红豆杉
紫杉醇的发现
• 1856年 分离到红豆杉的有毒成分，鉴定为 一种白色生物碱类成分，并命名为taxine。
• 1962.8.21 Barclay博士和三个研究生在华 盛顿的吉福德国家森林公园内发现太平洋 红豆杉，并采集样品送到威斯康辛州某研 究所进行有效成分的提取和活性筛选。
研究背景
3.20世纪80年代 NCI对35000多种植物的提 取物进行了活性评价，紫杉醇就是这一宏 大筛选计划的产物。
紫杉醇的发现
• 定义：紫杉醇是从红豆杉的树皮中提取的一种 化合物，是一种复杂的次生代谢产物，具有广 泛的抗肿瘤活性。
• 红豆杉Taxus chinensis (Pilg.) Rehd.又称紫衫 或赤柏松，属裸子植物亚门（Gymnospermae) 松杉纲（Coniferopsidae)红豆杉目（Taxales) 红豆杉科（Taxaceae)红豆杉族（Taxeae)下的 红豆杉属（Taxus L.)植物。
紫杉醇的全合成
紫杉醇作用机制研究
• 1980年开始对紫杉醇进行毒理学实验并于 1982年完成，同年NCI批准紫杉醇申报新药 研究。
• 1983年 NCI向FDA申请临床试验。 • 1984年紫杉醇被批准用于卵巢癌I期临床试
验。 • 1985年开始进行II期临床试验。 • 1987年NCI采集大量太平洋红豆杉树皮用于