微生物检验质量保证
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各洁净级别空气悬浮粒子的标准：同表3
各洁净级别环境微生物监测的动态标准表4 各级别洁净环境微生物纠偏限参考值表5 注：（1）表中各数值均为平均值；（2）单个沉 降碟的暴露时间可以少于4小时，同一位置可使用
表面微生物进行监测：方法包括接触碟法和棉签
擦拭法，棉签擦拭法是接触碟法的补充，微生物 计数结果以CFU/棉签报告。 一般采用胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）， 疑似真菌或考虑季节因素影响时，可增加沙氏葡 萄糖琼脂培养基(SDA)
微生物实验室------9205 药品洁净实
验室微生物监测和控制指导原则
Ｃ级Ｄ级无菌药品生产过程中重要程度较低操作
步骤的洁净区
微生物实验室
欧洲药典 无菌检查试验时应在无菌条件下进行，为此，实 验环境必须适合进行无菌检查试验，所采取的防 治污染措施不得影响供试品中微生物的检出，对 实验环境应给与合理的控制并定期进行取样检测. 进行试验所需要的无菌条件可以通过Ｂ级洁净室 内Ａ级单向流空气装置，或者通过隔离器来达到 无菌检查设施对检品所带来的微生物学挑战性不 得高于无菌生产工艺设施（美国药典）
主要的物理参数包括高效空气过滤器完整性，
气流组织、空气流速（平均风速），换气次 数、压差、温度和相对湿度等。
测试应在模拟正常检测条件下进行
微生物实验室
9205 药品洁净实验室微生物监测和控制指导原则
A 级：检漏、周期24 月，单向流周期24月；平均风速，
0.36-0.54 m/s周期12 个月；洁净区与非洁净区之间 压差不小于10Pa; 20-24℃每次实验；45-65%，每次实 验 B 级：①单向流（静态）气流周期24 个月 ①单向流（静态）气流0.36-0.54 m/s周期12 个月， 非单向流40-60h-1 周期12 个月
实验室质量管理指导原则
微生物实验室应划分成相应的洁净区域和活菌操作区
域，同时应根据实验目的，在时间或空间上有效分隔 不相容的实验活动
活菌操作区应该配备生物安全柜，以避免危害性的生
物因子对实验人员和实验环境造成的危害
微生物实验室--9203 药品微生物实验
室质量管理指导原则
一些样品若需要证明微生物的生长或进一步
微生物实验室-----9203 药品微生物
实验室质量管理指导原则
无菌检查 应在B 级背景下的A 级单向流洁净区域或隔离器（建
议D级环境中）中进行。
微生物限度检查应不低于D级背景下的B 级单向流空气
区域。
A 级和 B 级区域的空气供给应通过终端 HEPA 过滤器
微生物实验室------9203 药品微生物
微生物实验室--9205 药品洁净实验室
微生物监测和控制指导原则
微生物洁净实验室监控 无菌检查：空气悬浮粒子①浮游菌①、沉降
菌、表面微生物（手套及操作服）、每次 实验监控 微生物检查：空气悬浮粒子②浮游菌② 、沉 降菌、表面微生物（手套及操作服）、每 次实验监控
微生物实验室-- 9205 药品洁净实验
静态测试：暴露半小时以上
动态测试：暴露不大于４小时 培养： ３０--３５℃ ４８小时 结果：３个平板菌落数不得过１个／皿
微生物实验室
沉降菌动态测试：单个沉降碟暴露时间可以少于 ４小时，同一位置可用多个沉降碟连续进行检测 并累计结果。 沉降菌属被动式取样，定性测试，准确性稍差， 沉降到琼脂表面才能检出，只有将沉降碟放在关键 区污染最大风险的位置才有意义。 浮游菌：百级采样１０００Ｌ，万级采样５００ Ｌ，其它采样1００Ｌ 培养： ３０--３５℃ ４８小时 平均浓度（个／ｍ３）＝菌落数／采样量
分析培养物的特性，如再培养、染色、微生 物鉴定或其他确定试验均应在实验室的活菌 操作区进行
病原微生物的分离鉴定工作应在二级生物安
全实验室进行
微生物实验室
无菌生产洁净区（GMP2010）
A级高风险操作区如灌装区，放置胶塞桶和与无菌 直接接触的敞口包装容器等
Ｂ级无菌配置和灌装等高风险操作A级洁净区所处 的背景区域
微生物实验室
环境灭菌：（2010版药典SOP）
操作前及操作后 0.1%新洁尔灭，2%甲酚或其它消毒液，开启空气
过滤器及紫外灯杀菌1小时 同上述消毒处理及紫外灯杀菌半小时 实验室在使用前和使用后应进行消毒，并定期监 测消毒效果，要有足够洗手和手消毒设施 消毒剂既能杀死广泛的微生物、对人体无毒害、 不会腐蚀或污染设备
室微生物监测和控制指导原则
沉降菌、表面微生物 C 级：每季度一次空气悬浮粒子③浮游菌③、 D 级每半年一次 空气悬浮粒子、浮游菌、 沉降菌、表面微生物 注：①每月一次 ②每季度一次③每半年一次
微生物实验室
沉降菌：（ 2010版药典SOP ）
操作区域左、中、右各１个（不仅限于此）， TSA平板
微生物检验质量保证
微生物检验质量保证
①微生物实验室
②微生物检验仪器（主要设备）
③培养基
④菌种 ⑤质控
微生物实验室
①无菌检查实验室 ②微生物限度检查实验室 ③阳性菌实验室 ④抗生素微生物检定操作室
微生物实验室
无菌检查实验室：(2010年版中国药典)
10000级下的局部100级及无菌隔离系统, 18-26℃，40% -60%
微生物实验室
实验室表面微生物监测：动态跟踪（SOP）
培养基：ＴＳＡ平板 器具表面：棉拭子法
手套菌：接触指面涂抹于采样皿
培养： ３０-３５℃ ４８小时 沉降菌、浮游菌、表面接触菌、手套菌应进行确 认或纯化保存。
微生物实验室------9205 药品洁净实验室
微生物监测和控制指导原则
微生物实验室
环境监测（ 2010版药典SOP） 空气悬浮粒子：系统运行不少于30分钟
采样点：不少于2个，总次数不少于 5
采样点确定：N=
A
Baidu Nhomakorabea
悬浮粒子结果：符合洁净级别要求 最少取样点应符合GB/T 16292-2010
微生物实验室------9205 药品洁净实
验室微生物监测和控制指导原则
各洁净级别环境微生物监测的动态标准表4 各级别洁净环境微生物纠偏限参考值表5 注：（1）表中各数值均为平均值；（2）单个沉 降碟的暴露时间可以少于4小时，同一位置可使用
表面微生物进行监测：方法包括接触碟法和棉签
擦拭法，棉签擦拭法是接触碟法的补充，微生物 计数结果以CFU/棉签报告。 一般采用胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）， 疑似真菌或考虑季节因素影响时，可增加沙氏葡 萄糖琼脂培养基(SDA)
微生物实验室------9205 药品洁净实
验室微生物监测和控制指导原则
Ｃ级Ｄ级无菌药品生产过程中重要程度较低操作
步骤的洁净区
微生物实验室
欧洲药典 无菌检查试验时应在无菌条件下进行，为此，实 验环境必须适合进行无菌检查试验，所采取的防 治污染措施不得影响供试品中微生物的检出，对 实验环境应给与合理的控制并定期进行取样检测. 进行试验所需要的无菌条件可以通过Ｂ级洁净室 内Ａ级单向流空气装置，或者通过隔离器来达到 无菌检查设施对检品所带来的微生物学挑战性不 得高于无菌生产工艺设施（美国药典）
主要的物理参数包括高效空气过滤器完整性，
气流组织、空气流速（平均风速），换气次 数、压差、温度和相对湿度等。
测试应在模拟正常检测条件下进行
微生物实验室
9205 药品洁净实验室微生物监测和控制指导原则
A 级：检漏、周期24 月，单向流周期24月；平均风速，
0.36-0.54 m/s周期12 个月；洁净区与非洁净区之间 压差不小于10Pa; 20-24℃每次实验；45-65%，每次实 验 B 级：①单向流（静态）气流周期24 个月 ①单向流（静态）气流0.36-0.54 m/s周期12 个月， 非单向流40-60h-1 周期12 个月
实验室质量管理指导原则
微生物实验室应划分成相应的洁净区域和活菌操作区
域，同时应根据实验目的，在时间或空间上有效分隔 不相容的实验活动
活菌操作区应该配备生物安全柜，以避免危害性的生
物因子对实验人员和实验环境造成的危害
微生物实验室--9203 药品微生物实验
室质量管理指导原则
一些样品若需要证明微生物的生长或进一步
微生物实验室-----9203 药品微生物
实验室质量管理指导原则
无菌检查 应在B 级背景下的A 级单向流洁净区域或隔离器（建
议D级环境中）中进行。
微生物限度检查应不低于D级背景下的B 级单向流空气
区域。
A 级和 B 级区域的空气供给应通过终端 HEPA 过滤器
微生物实验室------9203 药品微生物
微生物实验室--9205 药品洁净实验室
微生物监测和控制指导原则
微生物洁净实验室监控 无菌检查：空气悬浮粒子①浮游菌①、沉降
菌、表面微生物（手套及操作服）、每次 实验监控 微生物检查：空气悬浮粒子②浮游菌② 、沉 降菌、表面微生物（手套及操作服）、每 次实验监控
微生物实验室-- 9205 药品洁净实验
静态测试：暴露半小时以上
动态测试：暴露不大于４小时 培养： ３０--３５℃ ４８小时 结果：３个平板菌落数不得过１个／皿
微生物实验室
沉降菌动态测试：单个沉降碟暴露时间可以少于 ４小时，同一位置可用多个沉降碟连续进行检测 并累计结果。 沉降菌属被动式取样，定性测试，准确性稍差， 沉降到琼脂表面才能检出，只有将沉降碟放在关键 区污染最大风险的位置才有意义。 浮游菌：百级采样１０００Ｌ，万级采样５００ Ｌ，其它采样1００Ｌ 培养： ３０--３５℃ ４８小时 平均浓度（个／ｍ３）＝菌落数／采样量
分析培养物的特性，如再培养、染色、微生 物鉴定或其他确定试验均应在实验室的活菌 操作区进行
病原微生物的分离鉴定工作应在二级生物安
全实验室进行
微生物实验室
无菌生产洁净区（GMP2010）
A级高风险操作区如灌装区，放置胶塞桶和与无菌 直接接触的敞口包装容器等
Ｂ级无菌配置和灌装等高风险操作A级洁净区所处 的背景区域
微生物实验室
环境灭菌：（2010版药典SOP）
操作前及操作后 0.1%新洁尔灭，2%甲酚或其它消毒液，开启空气
过滤器及紫外灯杀菌1小时 同上述消毒处理及紫外灯杀菌半小时 实验室在使用前和使用后应进行消毒，并定期监 测消毒效果，要有足够洗手和手消毒设施 消毒剂既能杀死广泛的微生物、对人体无毒害、 不会腐蚀或污染设备
室微生物监测和控制指导原则
沉降菌、表面微生物 C 级：每季度一次空气悬浮粒子③浮游菌③、 D 级每半年一次 空气悬浮粒子、浮游菌、 沉降菌、表面微生物 注：①每月一次 ②每季度一次③每半年一次
微生物实验室
沉降菌：（ 2010版药典SOP ）
操作区域左、中、右各１个（不仅限于此）， TSA平板
微生物检验质量保证
微生物检验质量保证
①微生物实验室
②微生物检验仪器（主要设备）
③培养基
④菌种 ⑤质控
微生物实验室
①无菌检查实验室 ②微生物限度检查实验室 ③阳性菌实验室 ④抗生素微生物检定操作室
微生物实验室
无菌检查实验室：(2010年版中国药典)
10000级下的局部100级及无菌隔离系统, 18-26℃，40% -60%
微生物实验室
实验室表面微生物监测：动态跟踪（SOP）
培养基：ＴＳＡ平板 器具表面：棉拭子法
手套菌：接触指面涂抹于采样皿
培养： ３０-３５℃ ４８小时 沉降菌、浮游菌、表面接触菌、手套菌应进行确 认或纯化保存。
微生物实验室------9205 药品洁净实验室
微生物监测和控制指导原则
微生物实验室
环境监测（ 2010版药典SOP） 空气悬浮粒子：系统运行不少于30分钟
采样点：不少于2个，总次数不少于 5
采样点确定：N=
A
Baidu Nhomakorabea
悬浮粒子结果：符合洁净级别要求 最少取样点应符合GB/T 16292-2010
微生物实验室------9205 药品洁净实
验室微生物监测和控制指导原则