离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究实验报告

实验报告

课程名称：生理科学实验实验类型：动物实验

实验项目名称：离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究

同组学生姓名：指导老师：

实验12 离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究

（浙江大学医学院2010级临床医学专业1B班第5组，浙江，杭州，310058）【摘要】目的了解离体心脏灌流的方法，观察钾、钙离子浓度、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾蜍心脏活动的影响并探讨作用机制。方法取离体蟾蜍蛙心，分别用任氏液、无钙、高钙、高钾、乙酰胆碱、肾上腺素等灌流。结果蟾蜍离体心脏在1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.84±0.16，0.81±0.17，两者有显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.95±1.53， 3.89±1.49，两者无显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为49.00±6.09，48.90±6.81，两者无显著差异。蟾蜍离体心脏在无钙任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.80±0.16，1.18±0.29，两者无显著差异；无钙任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.83±1.38，1.58±0.42，两者有显著差异；无钙任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为48.50±5.95，54.60±14.84，两者无显著差异。蟾蜍离体心脏在22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.61±0.23，0.53±0.23，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.74±1.17，5.39±1.62，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，心率（次/分）分别为50.20±7.87，49.90±8.32，两者无显著差异。蟾蜍离体心

脏在5.9×10-3mol/L高钾溶液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.54±0.23，0.77±0.35，两者有显著差异；蟾蜍离体心脏在5.9×10-3mol/L高钾溶液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.48±1.06，2.04±0.82，两者有显著差异；蟾蜍离体心脏在5.9×10-3mol/L高钾溶液灌流前后，心率（次/分）分别为50.70±9.71，49.50±8.38，两者无显著差异。蟾蜍离体心脏在9×10-8mol/L乙酰胆碱溶液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.52±0.26，0.63±0.28，两者有显著差异；蟾蜍离体心脏在9×10-8mol/L乙酰胆碱溶液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.44±1.12，2.45±0.93，两者有显著差异；蟾蜍离体心脏在9×10-8mol/L乙酰胆碱溶液灌流前后，心率（次/分）分别为50.40±9.56，48.90±8.72，两者有差异。蟾蜍离体心脏在3×10-6 mol/L 阿托品灌流后在进行9×10-8mol/L 乙酰胆碱灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.68±0.30，0.55±0.28，两者有显著差异；蟾蜍离体心脏在3×10-6 mol/L 阿托品灌流后在进行9×10-8mol/L 乙酰胆碱灌流前后，终末收缩张力(g)分别为2.49±0.89，3.46±1.20，两者有显著差异；蟾蜍离体心脏在3×10-6 mol/L 阿托品灌流后在进行9×10-8mol/L 乙酰胆碱灌流前后，心率（次/分）分别为48.50±8.22，48.60±8.06，两者无显著差异。蟾蜍离体心脏在6×10-7mol/L 肾上腺素灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.42±0.22，0.40±0.31，两者有显著差异；蟾蜍离体心脏在6×10-7mol/L 肾上腺素灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.49±1.15，7.99±3.06，两者有显著差异；蟾蜍离体心脏在6×10-7mol/L 肾上腺素灌流前后，心率（次/分）分别为52.20±9.69，52.30±9.32，两者无显著差异。蟾蜍离体心脏在6×10-7mol/L 肾上腺素灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.42±0.22，0.40±0.31，两者有显著差异；蟾蜍离体心脏在6×10-7mol/L 肾上腺素灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.49±1.15，7.99±3.06，两者有显著差

异；蟾蜍离体心脏在6×10-7mol/L 肾上腺素灌流前后，心率（次/分）分别为52.20±9.69，52.30±9.32，两者无显著差异。蟾蜍离体心脏在5×10-6 mol/L 普洛奈尔灌流后再进行6×10-7 mol/L 肾上腺素灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.48±0.23，0.48±0.24，两者无显著差异；蟾蜍离体心脏在5×10-6mol/L 普洛奈尔灌流后再进行6×10-7 mol/L 肾上腺素灌流前后，终末收缩张力(g)分别为2.25±1.17，2.23±1.08，两者无显著差异；蟾蜍离体心脏在5×10-6mol/L 普洛奈尔灌流后再进行6×10-7 mol/L 肾上腺素灌流前后，心率（次/分）分别为47.30±9.51，48.90±9.48，两者有差异。结论各因素主要通过改变蟾蜍离体蛙心的胞内钙离子浓度或是作用于心脏受体，最终影响心肌的兴奋-收缩耦联和自律性，导致心肌收缩能力和心率的改变。

【关键词】蟾蜍，终末收缩压，终末舒张压，心率，乙酰胆碱，肾上腺素。

作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动产生兴奋，因此，只要将离体的蛙心保持在事宜环境中，在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活动。心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此[1]。离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，本实验通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏的活动作用。

1.材料与方法

1.1.实验对象中华蟾蜍指名亚种蟾蜍（Zhuoshan Toad）10只，雌雄不拘，体重

82.5±10.2g。

1.2.实验试剂肾上腺素（adrenaline hydrochloride）,乙酰胆碱（acetylcholine

chloride），普萘洛尔（propranolol hydrochloride）,阿托品（atropine sulfate），氯化钾，氯化钙，任氏液（Ringer’s solution）。

1.3.实验仪器 RM6240多道生理信号采集处理系统(成都仪器厂），JZJ01张力换

能器(成都仪器厂）。

1.4.实验方法

1.4.1.仪器连接和参数张力换能器接RM6240多道生理信号采集处理系统第1

通道, RM6240多道生理信号采集处理系统采样频率：800Hz，时间常数：直流，滤波：30Hz，灵敏度：7.5g。调零。

1.4.

2.离体蟾蜍心脏标本制备蟾蜍毁脑脊髓，蟾蜍仰卧于蛙板，打开蟾蜍胸腔，

暴露心脏，结扎下腔静脉，靠头端结扎左主动脉，在左、右主动脉下穿线，在左主动脉根部剪一斜口，将插管插入动脉圆锥，在心室收缩时将插管插入心室，结扎固定，游离心脏。

1.4.3.心脏与换能器连接将蛙心插管固定在夹具上，用与张力换能器连接的

蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，调节微调使心脏舒张末期张力至1g。

1.4.4.稳定扫描速度调整为5s/div。向插管加1mL任氏液，稳定10min以上。

试验开始前，如前负荷小于1g，再调至1g稳定。

1.4.5.心搏曲线稳定后记录正常的心搏曲线45s。加任氏液25μl，稳定45s（意

义？）。

1.4.6.无钙任氏液1ml替换插管内的任氏液，心搏曲线稳定后记录45s。

1.4.7.用任氏液洗脱3次，加入1ml任氏液，待曲线稳定45s后，向灌流液中加

溶液25μl，心搏曲线稳定后记录45s 。

0.045mol/L CaCl

2

1.4.8.用任氏液洗脱数次，曲线基本恢复后，加入1ml任氏液，待曲线稳定45s