植物的茎尖培养脱毒技术教学案例
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• （2）切取茎尖的大小虽然切取茎尖越小，带有病毒的可能性就越小， 但组织培养中，切取的茎尖太小，则不易成活。不同种类的植物和不同 病毒，切取的最适茎尖大小也不同。
• （3）组织培养常用基本培养基是MS培养基，它有较高浓度的无机盐， 对促进组织分化和愈伤组织生长有利；植物生长调节的种类和配比依培 养种类和生长时期来调整。
中不存在维管系统。病毒在细胞间移动只能通过胞间连丝，速度 很慢，难以赶上活跃生长的茎尖； • 在旺盛分裂的分生细胞中，代谢活性高，竞争抑制了病毒的复制； • 在茎尖存在高水平内源生长素，也可能抑制病毒的增殖。
主要方法步骤
• （1）茎尖的剥离：此步是技术关键，一般在解剖镜下操作。2-3cm的 茎段，剥去大叶，水冲洗1h左右，酒精快速消毒，无菌条件下5%漂白 粉溶液（或其他消毒剂）消毒7-10min，无菌水清洗，解剖镜下剥取茎 尖。
（2）表面消（毒1）选热取处理盆栽将香盆栽石植竹株植或株离体叶瓶腋苗间，生在出36～的3侧8℃芽下为处理外2植体，先用 自来水冲洗半周小，时或每，天用在7356℃%1的6小酒时精和消38℃毒83小0时秒处，理再共3用0天2，.5光%照次为氯酸钙或次氯 酸钠溶液处理301050l分x。钟,取出后用无菌蒸馏水清洗4次,用无菌滤纸吸去多余 水分备用。
• 茎尖越小，去病毒机会越大，脱毒效果就越好， 但同时因为其含营养及水量太低，故培养时对培 养基的要求就越高，对剥离技术要求也越高。
植物的茎尖培养脱毒技术应用
• 茎尖脱毒培养对植物病毒的脱除效果好，后代遗 传性稳定，是目前生产上最常用的脱毒措施，已 在马铃薯、花卉、水果、蔬菜等作物脱毒快繁上 得到了广泛应用。
（3）茎尖剥离 在双筒解剖镜下。切除叶片使芽体暴露，用解剖针剥掉 幼叶，直到只剩下2个最幼小的叶原基。
（4）茎尖培养 用小刀片切下茎尖放入培养基。培养条件为25℃，光照 16小时，光照强度为2000lx，平均两周进行一次转接，5～7周可获得单 个小植株。
植物的茎尖培养脱毒技术优缺点：
• 茎尖生长点的培养成了去除植物病毒，使植物复 壮的重要方法。茎尖培养还可以去除其他病原体， 如细菌、真菌等。
酒精擦拭
wenku.baidu.com旋转灼烧
显微镜下 获取茎尖
接种
盖好瓶塞
几种方法的配合使用是提高植物脱毒效果：
• (1) 高温热处理与微茎尖脱毒培养技术 • (2) 高温热处理与微（体）茎尖嫁接培养技术 • (3) 化学处理与茎尖脱毒培养技术
香石竹脱毒的具体操作过和如下：
（1）热处理 将盆栽植株或离体瓶苗，在36～38℃下处理2周，或每天 在36℃16小时和38℃8小时处理共30天，光照为3000lx。
植物的茎尖培养脱毒技术
植物茎尖脱毒技术利用植物茎尖组织培养， 结合血清病毒检测技术，在防蚜传毒条件下，将影 响植物正常生长的植物病毒脱除的高新农业生物技 术。茎尖脱毒主要包括表面灭菌、茎尖剥离、茎尖 培养等步骤。
原理及依据
• 病毒在植物体内分布不均，茎尖处含量最少 • 在一个植物体内，病毒易于通过维管系统而移动，但在分生组织
• （3）组织培养常用基本培养基是MS培养基，它有较高浓度的无机盐， 对促进组织分化和愈伤组织生长有利；植物生长调节的种类和配比依培 养种类和生长时期来调整。
中不存在维管系统。病毒在细胞间移动只能通过胞间连丝，速度 很慢，难以赶上活跃生长的茎尖； • 在旺盛分裂的分生细胞中，代谢活性高，竞争抑制了病毒的复制； • 在茎尖存在高水平内源生长素，也可能抑制病毒的增殖。
主要方法步骤
• （1）茎尖的剥离：此步是技术关键，一般在解剖镜下操作。2-3cm的 茎段，剥去大叶，水冲洗1h左右，酒精快速消毒，无菌条件下5%漂白 粉溶液（或其他消毒剂）消毒7-10min，无菌水清洗，解剖镜下剥取茎 尖。
（2）表面消（毒1）选热取处理盆栽将香盆栽石植竹株植或株离体叶瓶腋苗间，生在出36～的3侧8℃芽下为处理外2植体，先用 自来水冲洗半周小，时或每，天用在7356℃%1的6小酒时精和消38℃毒83小0时秒处，理再共3用0天2，.5光%照次为氯酸钙或次氯 酸钠溶液处理301050l分x。钟,取出后用无菌蒸馏水清洗4次,用无菌滤纸吸去多余 水分备用。
• 茎尖越小，去病毒机会越大，脱毒效果就越好， 但同时因为其含营养及水量太低，故培养时对培 养基的要求就越高，对剥离技术要求也越高。
植物的茎尖培养脱毒技术应用
• 茎尖脱毒培养对植物病毒的脱除效果好，后代遗 传性稳定，是目前生产上最常用的脱毒措施，已 在马铃薯、花卉、水果、蔬菜等作物脱毒快繁上 得到了广泛应用。
（3）茎尖剥离 在双筒解剖镜下。切除叶片使芽体暴露，用解剖针剥掉 幼叶，直到只剩下2个最幼小的叶原基。
（4）茎尖培养 用小刀片切下茎尖放入培养基。培养条件为25℃，光照 16小时，光照强度为2000lx，平均两周进行一次转接，5～7周可获得单 个小植株。
植物的茎尖培养脱毒技术优缺点：
• 茎尖生长点的培养成了去除植物病毒，使植物复 壮的重要方法。茎尖培养还可以去除其他病原体， 如细菌、真菌等。
酒精擦拭
wenku.baidu.com旋转灼烧
显微镜下 获取茎尖
接种
盖好瓶塞
几种方法的配合使用是提高植物脱毒效果：
• (1) 高温热处理与微茎尖脱毒培养技术 • (2) 高温热处理与微（体）茎尖嫁接培养技术 • (3) 化学处理与茎尖脱毒培养技术
香石竹脱毒的具体操作过和如下：
（1）热处理 将盆栽植株或离体瓶苗，在36～38℃下处理2周，或每天 在36℃16小时和38℃8小时处理共30天，光照为3000lx。
植物的茎尖培养脱毒技术
植物茎尖脱毒技术利用植物茎尖组织培养， 结合血清病毒检测技术，在防蚜传毒条件下，将影 响植物正常生长的植物病毒脱除的高新农业生物技 术。茎尖脱毒主要包括表面灭菌、茎尖剥离、茎尖 培养等步骤。
原理及依据
• 病毒在植物体内分布不均，茎尖处含量最少 • 在一个植物体内，病毒易于通过维管系统而移动，但在分生组织