USP29-1116 洁净室和其它受控环境的微生物评估 中文稿

<1116> 洁净室和其他受控环境的微生物学评估

本章信息旨在综述与散装原料药、剂型以及某些医疗用具无菌操作相关的各种问题；并对控制环境进行制定、保持和控制其微生物学特性。

本章包括的讨论有关以下方面：(1) 基于颗粒计数限制上的洁净室分级；(2)控制环境的微生物学评估程序；(3) 人员培训；(4) 设计和实施微生物学评估程序中的关键因素；(5) 取样策略的制定；(6) 建立微生物警告和行动标准；(7) 应用于微生物取样的方法学和仪器操作；(8) 培养基和稀释剂；(9) 微生物隔离群的鉴别；(10) 经培养基填充的操作评估；以及(11) 词汇表。本章以外的讨论是有执照药房制备家用无菌产品应用控制环境的问题，其包含在药用配方—无菌制备（Pharmaceutical Compounding—Sterile Preparations）〈797〉中。

对于无菌操作的控制环境中微生物状况的控制和评估存在方法选择性。本章中的数字评估并非有意代表绝对的评估或规范，而仅是一种信息上的表示。考虑到微生物取样设备和方法的多样性，不能说达到这些值就能保证微生物控制的需求标准，或者与本章这些值有偏差、高于本章的值就认为是失去控制。微生物取样和分析应用不当，可能会引起显著的差异和不慎污染的潜在性。本章标明的取样培养基、设备和方法，不是特定的规范而只是一种信息参考。通过无菌操作可产生高比率的无菌产品。因为无菌操作依赖的是流程中微生物的排除和阻止包装过程中微生物进入敞口容器，制造环境中的微生物负担和产品的生物负担对于保证这些产品的无菌水平来说，是相关的重要因素。

洁净室分级的确立

洁净室和控制环境的设计和构建，在联邦标准209E中被提及。此空气洁净标准通过空气播散颗粒绝对浓度定义。其中包括用于控制环境空气级别分配和监测空气播散颗粒的方法。这一联邦文件仅适用于控制环境内的空气播散颗粒，且并非有意的强调颗粒的活性与非活性属性特征。

制药工业中的洁净室和其他控制环境的联邦标准209E已经被洁净室制造商所采用，以提供这些设施的组装、试车和维护的规范。然而，制药工业中的有效数据并不能给非活性颗粒数量和活性微生物浓度之间的关系提供科学的一致性。

电子工业的非活性颗粒数量的关键程度使得应用联邦标准209E成为必需，虽然制药工业在与联邦标准中特定的总颗粒相比较而言，更关心的是活性颗粒(即微生物) 。制药行业中对注

射制剂中的总颗粒数有明确规定。(见注射品中的颗粒物质（Particulate Matter in Injections）〈788〉)。

洁净室的颗粒数越少，空气播散微生物的可能性越小。这一理论是经认可的，且能够为制药生产商和洁净室及受控环境的建造者提供功能设施建造方面的工程学标准。

应用在制药工业的连邦标准209E，是以所有颗粒大小的限定为依据的，即，大小等于或大于0.5 µm的。表1描述了联邦标准209E适用于制药工业的空气播散颗粒洁净级别。制药工业适用M3.5以及更高级别。M1 级别和M3级别相关于电子工业，表1所示仅为出于比较目的。通常认为，假设不存在气流、温度和湿度的改变，则使用中的洁净室或其他控制环境中存在的颗粒越少，操作条件下的微生物计数将会越少。洁净室被维持在以动态的(运作的)数据为根据的操作控制状态下。

表 1. 空气播散颗粒洁净级别*

控制环境中微生物学评估程序的重要性

监测控制环境中总颗粒计数，甚至应用连续电子仪器计数，仍不能提供关于环境中微生物含量的信息。颗粒计数器的基本限制在于它们测量颗粒为0.5 µm 或者更大的。而空气播散微生物并不是自由浮动的或是单细胞的，它们经常联合成10到20 µm的颗粒。控制环境中的

颗粒计数和微生物计数是随着取样位置和取样期间采取的活动而改变的。监测环境中的非活性颗粒和微生物是一项重要的控制措施，因为它们对达到颗粒物质（Particulate Matter）和注射（Injections）〈1〉条件下无菌（Sterility）的产品要求来说，都是重要的。

控制环境的微生物监测程序应当对人员的以及由人员执行的可能对控制环境造成生物负担影响的清洁卫生处理的实行以及洁净效应予以评估。不管系统多么复杂，微生物监测将不再、也不需要对这些控制环境中存在的所有微生物污染进行鉴别和定量。然而，常规的微生物监测应该提供用以确定控制环境是在适当的控制状态下运作的有效信息。

具备资格人员对环境微生物监测和数据分析，应该在容许洁净室和其他受控环境保持在控制状态下进行。考虑到有意义数据的收集，则应当在环境正常运行过程中取样。微生物取样应当发生在原料在场、加工处理在进行中且操作人员在岗时。

适当的时候，洁净室和一些其他控制环境的微生物监测应当包括室内空气以及进入关键区域、表面、设备、清洁卫生处理容器、地板、墙壁和人员着装(如工作服和手套)的压缩空气的微生物含量定量。微生物监测程序的目的对环境生物负载来说具有代表性的评估。当数据被收集和分析时，受过训练的人员应对任何趋势进行评估。尽管以推荐和特定的频率为根据来考查环境的结果是重要的，可是考查扩展时期的结果对于确认趋势是否为目前的也同样的关键。趋势可以通过构建包括警告和行动标准的统计检验图表而形象化。控制环境的微生物控制可以以这些趋势数据为根据，进行部分的评估。应当做定期报告或总结借以警示责任管理人员。当受控环境中特定微生物水平超标时，应当进行文件性的综述和调查。在调查的细节上可能会有所不同，这要根据室内制造产品的类型和加工过程的不同来确定。调查应当包括区域维护文件考查；清洁卫生处理文件；固有物理的或操作的参数，如环境温度和相对湿度的改变；以及相关人员的培训状况。调查之后，采取的行动可能会包括加强人员培训以强调微生物控制的重要性；增加频率添加取样；添加清洁卫生处理；添加产品测试；鉴定微生物污染及其可能来源；如果必要的话，需对现有标准化操作规程进行再评价并使其重新生效。

根据调查综述和结果测试，微生物水平超标的显著性和在那种条件下操作或产品处理的可接受性可能是需要查明的。任何对于行动过程的调查和理论都应当通过文件证明，且应作为整个质量管理系统的一部分。

控制环境，如洁净区或洁净室，是依照相关洁净室运行标准证明确定的。评估参数包括过滤的完整性、空气流速、通风模式、换气以及压力差别。这些参数能够影响洁净室运行中的微生物生物负载。洁净室的设计、构建以及运行存在多样性，这使得对这些参数的泛化变得困难。Ljungquist和Reinmuller1发展了通过增加邻近关键工作区域和设备的周围粒子浓度对系统进行颗粒激发测试的方法。首先，烟的产生使得洁净室或一个控制环境的各处空气流动