白血病免疫分型的诊断标准

9．白血病免疫分型的诊断标准
9．1 急性淋巴系白血病（ALL）
9．1．1急性B淋巴系白血病（B-ALL）
9．1．1．1MIC 标准:
B 祖细胞ALL: CD19+,TdT+,CD10-,CIg-.sIg-
Common ALL: CD19+,TdT+,CD10+,cIg-,sIg-
Pre-B- ALL: CD19+,TdT+,CD10+,cIg+,sIg-
B-ALL : CD19+,TdT-,CD10-,cIg-,sIg+
9．1．1．2 欧洲白血免疫学特征研究组标准:
Pro-B-ALL: (BⅠ型):CD19+,CD22+
Common ALL:(BⅡ型):CD19+,CD22+,CD10+
Pre-B-ALL: (BⅢ型):CD19+,CD22+,CyIgM+，
成熟B-ALL:(BⅣ型)：CD19+，CD22+，Kappa/Lambda+
9．1．2急性T淋巴系白血病（T-ALL）
9．1．2．1MIC 标准:
T祖细胞型: CD2-
T成熟细胞型: CD2+
9．1．2．2 Reinheiz 标准:
早期胸腺细胞Ⅰ期:CD2+,CD5+,CD7+,CD38+,CD71+
普通胸腺细胞Ⅱ期:CD2+,CD5+,CD7+,CD38+,CD71-,CD4+,CD8+,CD1+ 胸腺髓质细胞Ⅲ期:CD2+,CD5+,CD7+,CD38+,CD3+,CD4+,CD8+,CD1- 9．1．2．3欧洲白血免疫学特征研究组标准:
Pro-ALL:(TⅠ型):CD3+,CD7+
Pre-T-ALL(TⅡ型):CD3+,CD2+,CD5+,CD8+
皮质-T-ALL(TⅢ型):CD3+,CD1a+
成熟-T-ALL(TⅣ型):CD3+,CD1a+,anti-TCRα/β+ 或γ/δ+
9．3．急性髓性白血病(AML)
能亚型常表达抗原
M0 CD11b,CD13或CD33
M1 CD13 CD15 CD33 CD34 HLA-DR
M2 CD11b CD13 CD15 CD33 •CD34 •HLA-•DR •
CD56 CD19
M3 CD11b CD13 CD15 CD33 CD34
M4 CD4 CD11b CD13 CD14 CD15 CD33 CD34
M5 CD4 CD11b CD13 CD14 CD15 CD33 CD34
M6 血型糖蛋白A CD13 CD33 CD34
M7 CD41 CD61 CD13 CD33 CD34 因子Ⅷ相关抗原
10．各型白血病及淋巴瘤免疫分型特点
10．1 急性髓系白血病（Acute myeloid leukemia,AML）
10．1．1 M0：有低的(Side scatter ,SSC)和Forward scatter（FSC)。

在CD45-SSC图上出现在淋巴细胞位置上，至少表达一个特异性标志如CD13或CD11b，但MPO比CD13与CD33更灵敏。

一般淋系标志阴性，但可表达CD7或CD4。

HLA-DR、CD34常为阳性。

CD7与CD34共表达预后差。

10．1．2 M1：流式上M1与M0相似不易区分，M1一般CD13+、CD33+、HLA-DR-，但CD34
表达少于M0，部分可表达CD15。

10．1．3 M2：与M0和M1的主要区别是成熟度增加，原始细胞减少，CD15较M1显著，CD34弱于M1，CD13有时表达强于CD33，多数病例HLA-DR-。

CD45-SSC图显示从髓系原始细胞区至成熟骨髓细胞区的连续细胞带，CD45-SSC图有助于确定原始细胞比例。

10．1．4 M3：胞浆内有较多的颗粒，故具较高的SSC，多数情况HLA-DR-或少表达，CD34少于
M2、一般CD13弱阳性，可表达CD2。

10．1．5 M4与M5：两型表型相似，但M4较M5表达更多的CD34，较之M0、M1，M4与M5有更大的FSC和SSC。

CD45-SSC图上，白血病细胞出现在单核区，重要的表型为CD13、CD33、HLA-DR、CD14和CD15、CD64，CD33表达可强于CD13，CD33+、CD13-、CD34-很可能为M5，少数病人CD56+。

10．1．6 M6：一般HLA-DR，CD34、CD13和CD33阳性，CD45-SSC图显示主要为红系成份。

血型糖蛋白A、CD71可阳性。

10．1．7 M7：一般CD61和/或CD41阳性。

需要注意是由于血小板粘附在原始细胞上造成的假阳性，可以用流式双色分析CD41、CD61、CD34，减少血小板的粘附。

10．2. 急性淋巴细胞性白血病（Acute lymphoblastic leukemia, ALL）
10．2．1B祖细胞型ALL：在儿童，约90％病例CD10+，在幼儿只有少于50％病例CD10+，原始细胞一般FSC、SSC很小，系FAB标准的L1或L2，一般TdT+、HLA-DR+、CD19+。

此型又分为2个亚型，CD10+和CD10-，前者预后好，多数病例CD24+和CD34+，CD20表达随成熟度增加而增加，B
祖细胞被定义为sIg-。

10．2．2前B细胞型ALL：一般为CD19+，CD24+，HLA-DR+，胞浆CD22+，CD10+，TdT随CD20变化，CD34多为阴性。

前B亚型被认为比B祖型预后更差，这与t(1；19)及其E2A-PBX1融合蛋白有关，它的表型为CD19+、CD10+、CD9+，不同程度CD20表达，CD34-，确认此表型有助于诊断基
因上不确定的病例。

10．2．3 B细胞型ALL：B细胞型ALL较之B祖细胞型ALL有更大的FSC和SSC，在CD45-SSC 图上出现在淋巴和单核细胞区域，即FAB标准的L3，表型为CD19、CD20、CD22、CD24、sIg（多数为IgM）及多数CD10阳性。

但成熟抗原及sIg能区别于更早的B系ALL，极少数成熟B细胞ALL无FAB-L3
形态。

10．2．4T-ALL：多数病例有大的FSC、SSC，在CD45-SSC图上可能出现在淋系未成熟细胞和髓系未成熟细胞或单核细胞区。

多数表现为胸腺亚型，最常见为皮质晚期表达，CD1、CD2、CD5、CD7、CD4/ CD8双阳与极少膜表面CD3、TdT多为阳性。

另一常见亚型为皮质早期表达CD2、CD5、CD7、TdT 强表达。

髓质期亚型表达CD2、CD5、CD7与CD3+CD4+/CD3+CD8+,很少表达TdT。

前T细胞亚型，表达CD7和cyCD3+且无其它T细胞抗原，T细胞肿瘤的特征是丧失T细胞抗原而表现出其它异常抗原组
合。

10．3. 慢性粒细胞白血病（Chronic granulocytic leukemia,CGL）
由于慢性期显著的细胞成熟，在CD45-SSC图上除了髓系细胞占主导外，只显示一个正常骨髓像，CGL可确诊。

并可用分子流式术检测BCR-ABL癌基因。

流式细胞术对急变期亚型的诊断具有极高价值。

髓性急变可表现多种形态包括未分化细胞。

淋系急变具典型形态特征，为CD10+B祖细胞ALL，极少有T
细胞型。

10．4. 慢性淋巴细胞白血病（Chronic lymphocytic leukemia，CLL）
免疫分型主要为sIgM、sIgD弱表达，B系抗原为CD19、CD20、CD43、CD79a与CD5共表达，CD23的表达可区别CLL和多毛细胞白血病（Hairy cell leukemia,HCL），前者CD23+，后者CD23-。

B 型前淋巴细胞白血病较CLL更为严重，流式细胞术在区分B型前淋巴细胞白血病和CLL可发挥很大作用，B型前淋巴细胞白血病多为CD5-，CD22+，表达更强的膜表面免疫球蛋白。

HCL平均生存率不超过5年，与CLL在形态上很难区分，有相似的CD5+B祖细胞，但膜表面免疫球蛋白表达强于CLL，且CD22-。

10．5. 淋巴瘤：流式多参数分析对淋巴瘤诊断有重要意义，标本多取自淋巴结或细针穿刺，细针穿刺获得的标本用免疫分型作诊断可免除病人昂贵的手术过程，是细胞形态学诊断重要的辅助手段。

此外，许多淋巴瘤和白血病表现出一些特征的抗原密度改变如CLL中CD20减少，HCL中CD20增加。

流式定量技术同样具有重要意义，可对单个细胞的DNA含量作定量分析，确定处于不同细胞周期的各群细胞数。

由于染色体改变产生的异倍体细胞数亦可被检测到，S期细胞数对分型诊断有参考意义。

流式还可通过检
测Ki-67确定增殖群体
10．6 毛细胞型白血病（HCL）：HCL少见，但却是较易辩认的B系淋巴细胞增生性疾病。

瘤细胞一般表达B系抗原CD19、CD20、CD22、CD79a，且为sIg+。

重链多为IgM和IgD，sIg中度表达。

CD11c和CD22强表达，CD25中度表达。

粘膜淋巴细胞抗原CD103是HCL区别于其它B系白血病的可信标志。

还可发现骨髓微小残余病变，且灵敏度在1％以下。

10．7.外周T细胞肿瘤：与胸腺型T-ALL和原始淋巴细胞型淋巴瘤不同。

这组疾病是以外周T细胞亚型为特征的，主要为CD3与CD4或CD8共表达，且多表达α/β或ν/δ型T细胞受体。

尽管肿瘤CD4+和CD8+两种为主，但CD4与CD8并不能作为系特异性标志，有些变异的亚型，特别是丧失全部T细胞
抗原的亚型在这组疾病也很常见。

有人认为最常见胸腺后期亚型是T细胞幼淋巴细胞白血病（T prolymphocytic leukemia, T-PLL），约占此类疾病的1/3，病人表现为白细胞增多症（经常>105）。

脾肿大，淋巴结病，免疫表达CD2+，CD3+，CD5+，CD7+，多数为CD4+，CD8-（偶可CD4、CD8共表达），CD8单独表达极少。

CD4+CD8-表型
疗效好。

T-PLL较之B细胞型更严重。