高效液相色谱仪使用注意事项

高效液相色谱仪使用注意事项

1、使用者上机前首先须经过管理老师的同意，须认真履行仪器使用登记制度，出现问题应及时向老师报告。

2、须自备分析柱和流动相溶剂。

3、流动相：须使用色谱纯级溶剂，样品溶液和流动相需用0.45µm 滤膜过滤。若是使用V ARIAN色谱仪，流动相须首先赶气40～60分钟。

4、进样：一定要使用平头微量进样针进样。对一般样品而言，进样体积需大于定量环的2.5倍～4 倍则更加保险。

5、请正确开关机，顺序如下：打开计算机（Agilent 1100还须先运行Bootp Server程序）→打开HPLC 各模块电源→待各模块自检完成后，打开化学工作站→打开Purge阀，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止→关上Purge阀→进行数据分析方法编辑和数据采集方法编辑→用流动相冲洗和平衡系统和分析柱（更换溶剂后应以较长时间平衡系统）→关机时，先关闭化学工作站，再关HPLC 各模块电源和计算机。

6、使用双泵时，A、B、C、D四相中，若所用流动相中有含盐流动相，则A、D（进液口位于混合器下方）放置含盐流动相，B、C（进液口位于混合器上方）放置不含盐流动相。

7、请在每次分析时检查并记录压力是否在正常范围；每次使用完毕后请清洗系统：先以适当比例水和ACN 或MeOH混合溶液清洗20～30分钟，再以100％ACN 或MeOH 清洗10～20分钟，最后应将有机溶剂保留在系统中。当流动相中使用了无机盐、酸等缓冲盐物质，在分析结束后，应先用纯水“purge”脱气机管路冲洗5分钟，再用95％水和5％ACN 或MeOH清洗色谱柱30～40分钟后，再以100％ACN 或MeOH 清洗10～20分钟，最后应将有机溶剂保留在系统中。冲洗过程中关闭D灯、W灯。

8、为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中，每次分析结束后应冲洗进样阀。通常可用水冲洗，或先用能溶解样品的溶剂冲洗，再用水冲洗。

9、流动相溶剂瓶中，不能让水长期保存于其中，使用之后一定要倒掉，避免长菌。水最好用新制的水（一般不超过2天）。

10、清洗色谱柱或长时间不采集数据之时，应将“灯”关闭，以延长“灯”之寿命，切忌频繁开关“灯”。

11、拆装色谱柱时一定要注意顺序：安装：先装柱进口端，再安柱出口端；拆卸：先拆柱出口端，再拆柱进口端。注意：装柱时应先用手拧紧不锈钢螺丝，再拧松，再拧紧，最后用扳子拧紧（约1/4圈）。

12、使用工具后，请物归原位，以方便下次使用。

13、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤。

14、每次分析完后，要清理干净自己使用的东西，并打扫卫生。

15、液相室溶剂蒸腾不可避免，为了健康，请不要长时间停留其间，更不要在室内吃东西。