液相色谱知识

反相分配色谱法或更为广泛应用的反相键合相色谱法进行分析。若样
品溶于水相，可首先检查水溶液的pH值，若呈中性为非离子型组分， 常可用反相（或正相）键合相色谱法进行分析。若pH呈弱酸性，可采 用抑制样品电离的方法，在流动相中加入硫酸、磷酸调节pH=2～3，
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添加剂的选择
一般在检测样品中的生物碱时，一般在水中加入三乙胺。选择反相 C18柱作为固定相的色谱柱时，因生物碱结构中碱性氮原子与固定相未 键合酸性硅醇基有相互作用，导致色谱峰的展宽拖尾，分离效能低。因
此，在高效液相色谱中，通常流动相以偏碱性较好，常在流动相中加入
碱性化合物如二乙胺、三乙胺或强碱弱酸盐等物质，起到改善分离效果。 当流动相为碱性时，一般的键合相硅胶就不适宜，因硅胶在pH大于8时 即开始溶解，因此，在加入三乙胺改善峰形同时，须调节流动相pH值为 3.0左右，而不致一般键合硅胶溶解，有点像是离子对试剂流动相。
溶剂的选择
要根据样品的性质、PH值、样品的溶解度，由样品在有机溶剂中 溶解度的大小，初步判断样品是非极性化合物还是极性化合物，进而推 断用非极性溶剂戊烷、己烷、庚烷等，还是极性溶剂二氯甲烷、氯仿、 乙酸乙酯、甲醇、乙腈等来溶解样品，并通过实验判断。
色谱柱的选择
若样品溶于非极性溶剂，表明样品为非极性化合物，通常可以选 吸附色谱法或正相分配色谱法、正相健合色谱法进行分析。若样品溶 于极性溶剂或相混溶的极性溶剂，表明样品为极性化合物，通常选用