离体家兔肠肌运动
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家兔离体肠肌活动的影响实验
【摘要】目的研究乙酰胆碱(Ach)、肾上腺素(E)、HCl、NaOH溶液25℃
台氏液及缺氧复氧等条件对家兔离体肠肌运动的影响。方法制备家兔离体小肠
平滑肌标本,放置于灌流浴槽中,生物信号采集处理系统记录在不同因素作用下
张力曲线。结果滴加乙酰胆碱(Ach)、NaOH溶液后,肠肌运动张力和频率
都增大;滴加肾上腺素(E)、HCl、肠肌运动张力和频率迅速降低;25℃台氏液
刺激离体肠肌时,肠肌运动张力和频率先迅速下降后逐渐增大;停止通氧后,肠
肌运动张力和频率逐渐降低,复氧后肠肌运动张力和频率恢复。结论乙酰胆碱(Ach)、NaOH溶液刺激能促进肠肌运动,肾上腺素(E)、HCl能抑制肠肌运动,
短时低温能使肠肌运动稍降后又加强直至正常,缺氧使肠肌运动减弱。
关键词:HCl、NaOH、离体肠肌、乙酰胆碱、肾上腺素、氧气
消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样具有肌肉组织共有的特性。但消化道平滑
肌兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温
度和机械张力刺激较为敏感。给予离体肠肌以接近在体情况的适宜环境,消化道
平滑肌可保持良好的生理特性。
1 实验材料与方法
1.1实验材料
1.1.1实验动物:家兔,雌雄不限,浙江中医药大学动物实验中心提供
1.1.2实验材料与器械:麦氏浴槽、超级恒温器、张力换能器、铁支架、电脑、、木锤、止血钳、手术刀、20ml注射器、手术剪、持针器、手术圆针、缝线、烧杯、手术盘、搪瓷碗等。蒂罗德液(即台氏液):0.8%NaCl、0.02%KCl、0.026%MgSO477H2O、0.0065%NaH2PO4、0.02%CaCl2、0.1%NaHCO3、0.1%葡萄糖溶液。肾上腺素、乙酰胆碱、HCl、NaOH溶液。
1.2实验方法
1.2.1将台氏液快速充满空气小泡后,分成两份,一份置于25℃恒温水浴中,
使其温度保持在25℃;另一份放放入恒温水泵中的不锈钢槽内预热至37 ~
38 ℃。
1.2.1.1打开恒温水泵,加热台氏液。
1.2.1.2打开空气泵,调试恒温离体小肠灌流装置内槽台氏液中的气流速度。
1.2.1.3打开电脑,点击生物信号采集处理系统图标,显示生物信号采集处
理系统窗口。选择菜单“实验/常用生理学实验”,“离体小肠平滑肌运动”。
并将张力换能器输出线连接到已确定作为记录张力的通道。
1.2.2离体小肠段的制备
1.2.2.1准备两个小手术盘,一个小手术盘用于清洗肠内容物,另一小手术
盘盛预冷台氏液倒入中,其液体量已淹过小肠段为准。
1.2.2.2用持针器夹持手术圆针、穿线备用。
1.2.2.3取家兔一只,将其倒提,用木锤猛击后脑勺,使之昏迷,迅速进行以下操作:将其仰卧位固定,用手术剪从剑突下沿腹白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm长,打开腹壁,暴露腹腔,顺着胃找到与胃相连的十二指肠,沿十二指肠向空肠的方向取出小肠段约30cm,放入一小手术盘中,用注射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容物,直至冲洗干净为止。将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏液的小手术盘中,用手术刀刮去肠管外的血管和系膜,将小肠段切割成小段,每小段肠约2cm长,并在小段肠的两端、距断端约1mm处各穿约30cm长的线,注意在操作过程中,每10分钟换一次预冷台氏液。
1.2.3安装离体肠段,具体操作是:
1.2.3.1 取出固定架,将肠段的下端的线头尽量靠近固定架的小钩,并牢固地绑
紧在小钩上,将固定架放回内槽,小钩尽量靠近槽底,重新用张力微调器固定固定架,将空气泵重新连接至固定架,并通过固定架将空气输入内槽的台氏液中。
1.2.3.2将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接, 用张力微调器缓慢升
降拉线,保持线有一定紧张度,肠段、线应与地平面垂直,同时,肠段及上端的线头不得碰及槽壁和固定架。
1.2.3.3换液:打开灌流槽的内槽排水阀门,排去原来的台氏液,用注射器从恒
温水泵的小烧杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽中,其每次用量以淹过肠段的量为准。调节位于固定架尾部的空气流量调节旋钮,使气泡即细小、均匀,又不影响肠段的运动。
1.3实验观察与记录
1.3.1记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线,观察其收缩活动的特点。向台氏液
中加入HCl盐酸2滴,观察小肠收缩活动的改变.反应稳定后冲洗2遍。
1.3.2 记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线,向台氏液中加入NaOH 2滴,观察
小肠收缩活动的改变.反应稳定后冲洗2遍。
1.3.3 肠活动恢复后,将原37℃~ 38℃台氏液换成等量的25℃台氏液,观察
肠活动的改变, 待其活动改变明显时,冲洗1遍, 再加入等量的37℃ ~ 38℃的台氏液。
1.3.4 肠活动恢复后,向台氏液中加入肾上腺素2滴,观察小肠活动的改变, 待
反应稳定后冲洗2遍, 再加入等量的37℃ ~ 38℃的台氏液。
1.3.5 肠活动恢复后,向台氏液中加入乙酰胆碱2滴,观察小肠收缩活动的改
变, 待反应稳定后冲洗2遍。
1.3.6. 待肠活动恢复后,停止空气泵的工作5min,观察肠活动的改变,待其
收缩活动改变明显时反应稳定后冲洗1遍,再加入等量的37 ℃~ 38℃的台氏液,空气泵打开5min,肠段收缩活动恢复曲线后终止实验。
2.实验结果
实验名称:传出神经系统药对家兔离体肠肌的影响实验日期:2016-11-10 2.1加入2滴HCl 后,肠段张力曲线和频率下降。
2.2加入2滴NaOH后,肠段张力曲线迅速上升,频率略微加快。