TSA对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制为临床治疗

1.骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一。科研人员研究曲古抑菌A（TSA）对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制，为临床治疗寻找新方向。实验过程如下：

步骤1:用含青霉素和链霉素的高糖培养基，在37℃、5% CO2培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间。

步骤2:取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞，用加入不同浓度的TSA（0～

200ng·mL-1）的培养基继续培养24h。

步骤3:对各组细胞进行抽样检测，检测方法是先用台盼蓝试剂（一种细胞活性染料）染色再用血细胞计数板计数，统计细胞存活率（未染色细胞数/细胞总数×100%），结果如图1。步骤4:分别提取TSA浓度为0 ng·mL-1、25 ng·mL-1、50 ng·mL-1处理的3组细胞，测量细胞中与凋亡相关的基因（Bax、Bcl-2）和β-肌动蛋白基因（不同的组织细胞中表达相对恒定）表达的蛋白质量并计算比值，结果如图2。

分析回答：

（1）与正常成骨细胞相比，骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移，其主要原因是。高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是，细胞培养箱中保持5% CO2的作用是。

（2）步骤2中，设置0ng·mL-1TSA实验的主要目的是。

（3）用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是。

（4）图1所示结果表明。

（5）根据图2判断，骨肉瘤细胞中基因过度表达会加速细胞凋亡。

33．（共10分）药物N会抑制菌种A的生长，但对菌种B无明显影响。为了验证上述结论，请根据以下提供的材料与用具，补充和完善实验思路，预测实验结果并进行分析讨论。

材料与用具：菌种A、菌种B、药物N溶液、培养液、培养瓶若干、显微镜等。

（要求与说明：不考虑加入溶液对体积的影响，细胞计数的具体操作过程不作要求，实验条件适宜）

请回答下列问题：

（1）实验思路：

①取菌种A、菌种B，经稀释后得到菌液。在显微镜下进行计数，并记录。

③将上述样品在适宜条件下培养，每隔一段时间，分别取上述培养瓶中的菌液，

▲。

④▲。

（2）预测实验结果（用坐标系和细胞数变化曲线示意图表示实验结果）：

（3）分析与讨论：

菌种A与菌种B的质膜成分不完全相同。药物N能与胆固醇结合，改变质膜通透性，从而起抑制和杀菌作用。据此可推测药物N对菌种B无影响的原因是▲。33．（共10分）

（1）②甲组：菌种A+培养液乙组：菌种A+培养液+药物N 丙组：菌种B+培养液丁组：菌种B+培养液+药物N（各1分）

③在显微镜下分别进行计数，并记录。（1分）

④对实验数据进行统计分析。（1分）

31．疟原虫是一种单细胞动物。它能使人患疟疾，引起周期性高热、寒战和出汗退热等临床症状，严重时致人死亡。

（1）在人体内生活并进行细胞分裂的过程中，疟原虫需要的小分子有机物的类别包括_____________________________________________________（写出三类）。

（2）进入血液循环后，疟原虫选择性地侵入红细胞，说明它能够_________________并结合红细胞表面受体。

（3）疟原虫大量增殖后胀破红细胞进入血液，刺激吞噬细胞产生致热物质。这些物质与疟原虫的代谢产物共同作用于宿主下丘脑的_______________中枢，引起发热。

（4）疟原虫的主要抗原变异频繁，使疟原虫能避免被宿主免疫系统_________________性清除，从而使该物种得以________________________。

（5）临床应用青蒿素治疗疟疾取得了巨大成功，但其抗疟机制尚未完全明了。我国科学家进行了如下实验。

①1、2组结果表明____________________________________；

由3、4组结果可知青蒿素对仓鼠细胞线粒体膜电位无明显影响。据此可以得出

的结论是__________________________________________________________。

②将实验中仓鼠细胞的线粒体替换为_______________，能为临床应用青蒿素治疗

疟疾提供直接的细胞生物学实验证据。

31．【答案】（1）单糖、氨基酸、核苷酸、脂肪酸（其中三类）

（2）识别

（3）体温调节

（4）特异生存与繁衍

（5）①青蒿素能显著降低疟原虫线粒体膜电位

青蒿素对线粒体膜电位的影响存在物种间的差异

②人体细胞的线粒体