地黄化学成分血清药物化学的初步研究
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0. O O. 0 O. 0 0. O
将 Wia 大 鼠 随机 分 为 3组 , 空 白组 、 醇 sr t 即 梓
0. 0 0
20 .0
组 、 黄苷 D组 。 给药 组 给药 剂量 为 15 m / 0 地 . L 10g
4. 6. 0 OO 0 8 00 1 00 1 0 1 . 0 . 0. 2. 0 40 mi n
灌 胃 , 白组 给予 同体 积 蒸馏 水 。 实验前 禁 食 1 , 空 2h
自由 饮 水 。 给 药 1 h后 , 内 注 射 1 % 水 合 氯 肌 0 醛 ( . / 0 ) 醉 , 主 动 脉 取 血 。 血 液 静 0 3mL 1 0 g 麻 腹 置 1h 3 0 0 rm n离 心 1 i , 取 上 清 液 , , 0 / i 0 mn 吸 置
2 0 , 1 8 : 5 9—1 2 . 071( )1 1 1 5
成增 多、 降解减 少 , 者失 去动 态平 衡 而致 过 多的 细 两 胞外基质沉 积于 肝脏 引起 。若 药 物能作 用 于胶 原 的 合成 、 降解过程 , 减少胶 原在细胞 外 的沉积 , 可阻止 便
肝 纤 维 化进 程 。H P —I1— 反 映 肝 纤 维 化 的 血 A、C I、 C是 lV
自制 , 经归 一化 法测定 纯 度达 9 % ; 醇提 取 物 , 7 梓 自
制, 纯度 8 % ; 5 地黄苷 D提 取物 , 自制 , 纯度 8 % 。 5
美 国 Wa r 2 9 t s 6 5高效 液相 色谱 仪 , t s 9 6 e Wa r 2 9 e
双波 长检测 器 , m o e 色谱数 据工 作 站 ; 分 之一 E pw r 万 天平 , 本 岛津公 司产 品 ; 拌 机 , 1 3 搅 飞利 浦 电 子香 港
实验动物中心提供 , 许可证号 :C K 豫)o5- 0 1 S X ( 2o 00 。
2 方 法 与 结 果
2 1 梓 醇 及 地 黄 苷 D提 取 物 的 制 备 .
将鲜 地 黄洗净 , 晾干 , 切成 2e v 的 小块 , 入 a厚 放 搅拌 机 内 ( 适 量 9 % 乙醇 ) 碎 , 取 醇提 液 , 加 5 打 滤 药 渣弃 去 。把 醇液合 并 , 回收乙 醇并减 压 浓缩适 量 ; 加
肝 细 胞 变 性 坏 死 , 而 引起 纤 维 增 生 。 肝 细 胞 受 到 破 从
参考文献 :
[ ] a ieuT D s uir A,BolcSg , t 1 1 L mn a , emol e  ̄ i a.aeP e a u .Meh c— ai so hp t irgns [ ] A c eir 0 2 9 n m f eac f oeei J . rh Pda ,20 , s i b s t
22 . 对 照 品 溶 液 的 制 备
¨ 一
图 2 梓 醇给药血清 H L PC
AU
精 密称 取梓 醇对 照 品适 量 , 1 置 0mL容量 瓶 中 , 加 入 流 动 相 制 成 浓 度 为 0 10 m / . 9 g mL的 溶 液 , 用 0 4 m 微 孔 滤 膜 滤 过 , 得 梓 醇 的 对 照 品 溶 液 。 .5 即
图 1 空 白血 清 H L PC
梯 度洗脱 , L T C检测 , 行分 段 收集 。分别 把 含有 梓 进 醇、 地黄 苷 D 的 洗 脱 液 合 并 。分 别 回 收溶 剂 , 压 减 浓 缩至 干 , 经 葡聚 糖凝 胶柱 纯化 , 再 即得 梓 醇及 地 黄
苷 D提 取物 , H L 经 P C归 一化 法测 得纯 度达 8 % 。 5
。
3 2‘
中 医研 究
21 0 0年 5月 第 2 3卷 第 5期
T M Re. y2 1 o . 3 N . C s Ma 0 0 V 12 o 5
纤维 化作用 。 本实验用 C I 导大 鼠出现 肝纤 维 化 , 理是 C 诱 原
在 C 1进入机体后在肝 内活化 成 自由基 , 伤质膜 , C 损 启动脂质过 氧化作 用 , 坏肝 细胞 的膜性 结构 , 破 造成
地 黄 的入 血 成 分 。 结 果 : 给 药 血 清 中发 现 梓 醇 、 黄 苷 D 在 地
均 以 原型 入 血 。结 论 : 从血 清 药化 的角 度 确 定 这 两 种 化 学 成
乙腈 , 色谱 纯 , 国 Mec 司产 品 ; 德 rk公 甲醇 , 色谱 纯 , 国 T da公 司产品 ; 美 ei 甲醇 , 析纯 , 分 北京 化 工 厂 产 品 ; 仿 , 析纯 , 氯 分 北京 化工 厂产 品 ; 双蒸 水 , 自制 ; HP一 0型大孔 吸 附树脂 , 2 日本 三菱公 司产 品 ; 硅胶 ,
( 4):9 1 3 2—4 5 0.
[ ] i ai 2 Pn n M,R m o t K ie f rs :f m teb n h t z o b us .Lv r i oi r e c o b s o h
坏死亡后 , 血清 A T A T A P G T经肝细 胞膜转移 L 、S 、L 、G
清 +地黄 苷 D 对 照 品 色谱 峰 的 位 置 相 对 应 。说 明 这 两个 成 分梓 醇 和地 黄苷 D均原 型进 入到 血 清 中。
AU 0. 4 0 O. 2 O 0. 0 0 _ O 0. 2 0. O O 2. 0 O
Wia 大 鼠, sr t 体质量 (5 2 )g雌雄各半 , 2o± 0 , 河南 省
[] 瑞麟 , 4李 马勇 , 伟 , .白 芍 总 苷 治 疗 四氯 化 碳 致 大 鼠 魏 等 肝纤维化的作用 与其影 响肝 星状细胞 功能 的关系 [ ] J.
中国 新 药 杂 志 ,0 7 1 ( ) 6 5—6 9 2 0 ,6 9 :8 8.
[ ] 红 征 , 敬 礼 , 国 钧 .肝 纤 维 化 大 鼠血 清 透 明质 酸 、 5毕 薛 黄 Ⅲ型 前 胶 原 、 粘 连 蛋 白 及 羟 脯 氨 酸 水 平 与 丹 参 、 仁 层 桃 复方制剂 的干 预 [ ] 中国组 织 工程 研 究与 临床 康 复 , J.
・
药 学 研 究 ・
地 黄 化 学成 分 血 清 药 物 化 学 的初 步研 究 半
张雅 阁 李 更 生 王 慧森 刘 明 , , ,
( . 南大学 药学院 , 南 开封 4 5 0 ; . 南省 中医药研 究院 , 1河 河 70 1 2 河 河南 郑 州 4 0 0 ) 504
Biblioteka Baidu
中医研究
21 0 0年 5月 第 2 3卷 第 5期
T M R s Ma 0 0 V 12 o 5 C e . y2 1 o. 3 N .
‘3 3’
纪科 技有 限公 司产 品 。
多 出来 一个 新 的色 谱 峰 , 并且 新 的色 谱 峰 的 位 置 与
图 6地 黄苷 D对 照 品 色谱 峰 的 位 置 及 图 7空 白 血
清学指标 , 对肝纤 维化 的发 生 、 发展 、 估有 重要 临床 评 意义和价值。 。本研究结 果表 明 , 。 当归芍药 散加 昧可 显著降低肝纤维化大鼠的血清 H P .1I. A、C 1、 C含量。 1V
文章 编 号 :0 1— 9 0 2 1 ) 5— 0 2— 3 10 6 1 ( 0 0 0 0 3 0
至血液 中 , 使血 液 中的含 量 明显 升高 , 因此 其血 清水 平可反映肝细胞损伤程 度 , 是衡量肝 细胞损 伤状态 的
指标 。本实验结果 表明 , 当归芍药 散加味对 肝纤维化 大 鼠肝细胞有 保护作 用 , 对肝 功 能有 改善 效果 , 作用 机制 可能与当归芍药散加味 的抗 自由基作用有关 。 肝纤维化 的发 生是 以胶 原 为主 的细胞 外基 质合
品检定所 提供 , 批号 0 0 9 0 ; 黄苷 D对 照 品 , 8 8— 8 3 地
为鲜 地黄 、 生地 黄 、 熟地 黄 。鲜地 黄性寒 , 清热 生津 , 凉血 止血 ; 生地 黄性寒 , 清热 凉血 , 养阴生 津 ; 熟地 黄 性温 , 阴补血 , 滋 益精 填 髓 。地 黄作 为 著名 的“ 四大 怀药 ” 一 , 活 性 作 用 十 分 广 泛 , 增 强 免 疫 功 之 其 有 能…、 止血作 用 ] 降 血 糖 作 用 等 。中 药 含 有 的 、 化 学 成 分 , 有 进 入 血 液 方 有 可 能 成 为 有 效 成 只 分 。本 实验 采用 了血 清 药物 化 学 的方 法 , 步 确 初
摘 要 目 的 : 用 血 清 药 物 化 学 的 方 法 , 地 黄 血 中 移 行 成 应 对
的初步探 究 。 1 试 剂 、 器 与 动 物 仪
分进行分析 , 为地 黄 药 效 物 质 基 础 研 究 奠 定 基 础 。 方 法 : 通 过 比较 对 照 品 、 药血 清 、 白血 清 的 H L 含 空 P C指 纹 图谱 , 定 确
精 密 称 取 地 黄 苷 D 对 照 品 适 量 , 1 L容 量 瓶 置 0m
中, 加入 流动相制 成浓 度 为 0 2 3mg m .0 / L的溶 液 , 用 04 , .5p m微孔滤膜 滤过 , 即得 地黄苷 D对 照品溶 液。
23 给 药后 大鼠血 清 的制备 .
O. O
有 限公 司产 品 ; K 6一A快 速 混 匀 器 , 苏 新 康 医 X 9 江
疗器械有 限公 司产 品 ; D 5离 心 机 , 海安 亭科 T L一 上
定 了地 黄血 中移行 成 分 , 以作 为地 黄 药 效物 质 基 础
学仪器 厂产 品 ; F一 0 0氮 气 吹 干仪 , 京 八 方 世 B 20 北
c n a t gt[ ] DgLvr i, 04 3 ( )2 l一 4 . l i la e J . i i s 2 0 ,6 4 :3 22 ic r s eD [ ] 错 , 立 国 , 玉 兰 .柴 胡 对 大 鼠实 验 性 肝 纤 维 化 的 预 3杨 邢 刘 防 作 用 [ ]实 用药 物 与 临床 , 05 8 5 :2一l . J. 2 0 ,( ) l 4
[ ] 荣宽 , 6李 张伯 伦 .反 映 肝 纤 维 化 的 血 清学 指 标 [ ] 大 连 J.
医科 大 学 学 报 , 0 2 2 ( ) 6 7 . 2 0 ,4 1 :8— 0 收 稿 日期 :0 0— 3— 9 修 回 日期 : 1 0 2 21 0 0 ; 2 0— 3— 5 0 ( 辑 陶 编 珠)
中 图分 类 号 : 8 R2 4
血 清药物 化学
H L 梓醇 PC
地 黄苷 D
文献 标 志 码 : B
地 黄 为 玄 参 科 地 黄 R h a na guioa L. em n i lt s i n
bs . oc 的新 鲜 或 干燥 块 根 或炮 制 加 工 品 , 药 依 次 h 入
青 岛海洋 化工 厂产 品 ; 聚糖凝 胶 , 玛西 亚生物技 葡 安 术 有 限公 司 产 品 ; 色谱 层 析 柱 , 国 A i n 公 司 产 美 g et l 品; 梓醇对 照 品 , 含 量 测定 用 , 中国 药 品生 物制 供 由
分 为地 黄 的 药效 物 质 。
关键 词 : f/  ̄ i 药效 学 -
入 至预 处理 过 的 HP一2 0型 大 孔 树 脂 柱 上 , 用 蒸 先 馏水 洗脱 除 杂 , 用 2 % 乙醇 洗脱 , 继 0 收集 醇 洗 脱 液 , 减压 浓 缩至适 量 , 硅胶 柱层 析 , 氯仿 :甲醇 : 经 用 水
4. O O 6 O 8. 0 1 0 1 0 1 0 .O O 0. 0 0 2. 4. 0 mi n
将 Wia 大 鼠 随机 分 为 3组 , 空 白组 、 醇 sr t 即 梓
0. 0 0
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组 、 黄苷 D组 。 给药 组 给药 剂量 为 15 m / 0 地 . L 10g
4. 6. 0 OO 0 8 00 1 00 1 0 1 . 0 . 0. 2. 0 40 mi n
灌 胃 , 白组 给予 同体 积 蒸馏 水 。 实验前 禁 食 1 , 空 2h
自由 饮 水 。 给 药 1 h后 , 内 注 射 1 % 水 合 氯 肌 0 醛 ( . / 0 ) 醉 , 主 动 脉 取 血 。 血 液 静 0 3mL 1 0 g 麻 腹 置 1h 3 0 0 rm n离 心 1 i , 取 上 清 液 , , 0 / i 0 mn 吸 置
2 0 , 1 8 : 5 9—1 2 . 071( )1 1 1 5
成增 多、 降解减 少 , 者失 去动 态平 衡 而致 过 多的 细 两 胞外基质沉 积于 肝脏 引起 。若 药 物能作 用 于胶 原 的 合成 、 降解过程 , 减少胶 原在细胞 外 的沉积 , 可阻止 便
肝 纤 维 化进 程 。H P —I1— 反 映 肝 纤 维 化 的 血 A、C I、 C是 lV
自制 , 经归 一化 法测定 纯 度达 9 % ; 醇提 取 物 , 7 梓 自
制, 纯度 8 % ; 5 地黄苷 D提 取物 , 自制 , 纯度 8 % 。 5
美 国 Wa r 2 9 t s 6 5高效 液相 色谱 仪 , t s 9 6 e Wa r 2 9 e
双波 长检测 器 , m o e 色谱数 据工 作 站 ; 分 之一 E pw r 万 天平 , 本 岛津公 司产 品 ; 拌 机 , 1 3 搅 飞利 浦 电 子香 港
实验动物中心提供 , 许可证号 :C K 豫)o5- 0 1 S X ( 2o 00 。
2 方 法 与 结 果
2 1 梓 醇 及 地 黄 苷 D提 取 物 的 制 备 .
将鲜 地 黄洗净 , 晾干 , 切成 2e v 的 小块 , 入 a厚 放 搅拌 机 内 ( 适 量 9 % 乙醇 ) 碎 , 取 醇提 液 , 加 5 打 滤 药 渣弃 去 。把 醇液合 并 , 回收乙 醇并减 压 浓缩适 量 ; 加
肝 细 胞 变 性 坏 死 , 而 引起 纤 维 增 生 。 肝 细 胞 受 到 破 从
参考文献 :
[ ] a ieuT D s uir A,BolcSg , t 1 1 L mn a , emol e  ̄ i a.aeP e a u .Meh c— ai so hp t irgns [ ] A c eir 0 2 9 n m f eac f oeei J . rh Pda ,20 , s i b s t
22 . 对 照 品 溶 液 的 制 备
¨ 一
图 2 梓 醇给药血清 H L PC
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精 密称 取梓 醇对 照 品适 量 , 1 置 0mL容量 瓶 中 , 加 入 流 动 相 制 成 浓 度 为 0 10 m / . 9 g mL的 溶 液 , 用 0 4 m 微 孔 滤 膜 滤 过 , 得 梓 醇 的 对 照 品 溶 液 。 .5 即
图 1 空 白血 清 H L PC
梯 度洗脱 , L T C检测 , 行分 段 收集 。分别 把 含有 梓 进 醇、 地黄 苷 D 的 洗 脱 液 合 并 。分 别 回 收溶 剂 , 压 减 浓 缩至 干 , 经 葡聚 糖凝 胶柱 纯化 , 再 即得 梓 醇及 地 黄
苷 D提 取物 , H L 经 P C归 一化 法测 得纯 度达 8 % 。 5
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中 医研 究
21 0 0年 5月 第 2 3卷 第 5期
T M Re. y2 1 o . 3 N . C s Ma 0 0 V 12 o 5
纤维 化作用 。 本实验用 C I 导大 鼠出现 肝纤 维 化 , 理是 C 诱 原
在 C 1进入机体后在肝 内活化 成 自由基 , 伤质膜 , C 损 启动脂质过 氧化作 用 , 坏肝 细胞 的膜性 结构 , 破 造成
地 黄 的入 血 成 分 。 结 果 : 给 药 血 清 中发 现 梓 醇 、 黄 苷 D 在 地
均 以 原型 入 血 。结 论 : 从血 清 药化 的角 度 确 定 这 两 种 化 学 成
乙腈 , 色谱 纯 , 国 Mec 司产 品 ; 德 rk公 甲醇 , 色谱 纯 , 国 T da公 司产品 ; 美 ei 甲醇 , 析纯 , 分 北京 化 工 厂 产 品 ; 仿 , 析纯 , 氯 分 北京 化工 厂产 品 ; 双蒸 水 , 自制 ; HP一 0型大孔 吸 附树脂 , 2 日本 三菱公 司产 品 ; 硅胶 ,
( 4):9 1 3 2—4 5 0.
[ ] i ai 2 Pn n M,R m o t K ie f rs :f m teb n h t z o b us .Lv r i oi r e c o b s o h
坏死亡后 , 血清 A T A T A P G T经肝细 胞膜转移 L 、S 、L 、G
清 +地黄 苷 D 对 照 品 色谱 峰 的 位 置 相 对 应 。说 明 这 两个 成 分梓 醇 和地 黄苷 D均原 型进 入到 血 清 中。
AU 0. 4 0 O. 2 O 0. 0 0 _ O 0. 2 0. O O 2. 0 O
Wia 大 鼠, sr t 体质量 (5 2 )g雌雄各半 , 2o± 0 , 河南 省
[] 瑞麟 , 4李 马勇 , 伟 , .白 芍 总 苷 治 疗 四氯 化 碳 致 大 鼠 魏 等 肝纤维化的作用 与其影 响肝 星状细胞 功能 的关系 [ ] J.
中国 新 药 杂 志 ,0 7 1 ( ) 6 5—6 9 2 0 ,6 9 :8 8.
[ ] 红 征 , 敬 礼 , 国 钧 .肝 纤 维 化 大 鼠血 清 透 明质 酸 、 5毕 薛 黄 Ⅲ型 前 胶 原 、 粘 连 蛋 白 及 羟 脯 氨 酸 水 平 与 丹 参 、 仁 层 桃 复方制剂 的干 预 [ ] 中国组 织 工程 研 究与 临床 康 复 , J.
・
药 学 研 究 ・
地 黄 化 学成 分 血 清 药 物 化 学 的初 步研 究 半
张雅 阁 李 更 生 王 慧森 刘 明 , , ,
( . 南大学 药学院 , 南 开封 4 5 0 ; . 南省 中医药研 究院 , 1河 河 70 1 2 河 河南 郑 州 4 0 0 ) 504
Biblioteka Baidu
中医研究
21 0 0年 5月 第 2 3卷 第 5期
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‘3 3’
纪科 技有 限公 司产 品 。
多 出来 一个 新 的色 谱 峰 , 并且 新 的色 谱 峰 的 位 置 与
图 6地 黄苷 D对 照 品 色谱 峰 的 位 置 及 图 7空 白 血
清学指标 , 对肝纤 维化 的发 生 、 发展 、 估有 重要 临床 评 意义和价值。 。本研究结 果表 明 , 。 当归芍药 散加 昧可 显著降低肝纤维化大鼠的血清 H P .1I. A、C 1、 C含量。 1V
文章 编 号 :0 1— 9 0 2 1 ) 5— 0 2— 3 10 6 1 ( 0 0 0 0 3 0
至血液 中 , 使血 液 中的含 量 明显 升高 , 因此 其血 清水 平可反映肝细胞损伤程 度 , 是衡量肝 细胞损 伤状态 的
指标 。本实验结果 表明 , 当归芍药 散加味对 肝纤维化 大 鼠肝细胞有 保护作 用 , 对肝 功 能有 改善 效果 , 作用 机制 可能与当归芍药散加味 的抗 自由基作用有关 。 肝纤维化 的发 生是 以胶 原 为主 的细胞 外基 质合
品检定所 提供 , 批号 0 0 9 0 ; 黄苷 D对 照 品 , 8 8— 8 3 地
为鲜 地黄 、 生地 黄 、 熟地 黄 。鲜地 黄性寒 , 清热 生津 , 凉血 止血 ; 生地 黄性寒 , 清热 凉血 , 养阴生 津 ; 熟地 黄 性温 , 阴补血 , 滋 益精 填 髓 。地 黄作 为 著名 的“ 四大 怀药 ” 一 , 活 性 作 用 十 分 广 泛 , 增 强 免 疫 功 之 其 有 能…、 止血作 用 ] 降 血 糖 作 用 等 。中 药 含 有 的 、 化 学 成 分 , 有 进 入 血 液 方 有 可 能 成 为 有 效 成 只 分 。本 实验 采用 了血 清 药物 化 学 的方 法 , 步 确 初
摘 要 目 的 : 用 血 清 药 物 化 学 的 方 法 , 地 黄 血 中 移 行 成 应 对
的初步探 究 。 1 试 剂 、 器 与 动 物 仪
分进行分析 , 为地 黄 药 效 物 质 基 础 研 究 奠 定 基 础 。 方 法 : 通 过 比较 对 照 品 、 药血 清 、 白血 清 的 H L 含 空 P C指 纹 图谱 , 定 确
精 密 称 取 地 黄 苷 D 对 照 品 适 量 , 1 L容 量 瓶 置 0m
中, 加入 流动相制 成浓 度 为 0 2 3mg m .0 / L的溶 液 , 用 04 , .5p m微孔滤膜 滤过 , 即得 地黄苷 D对 照品溶 液。
23 给 药后 大鼠血 清 的制备 .
O. O
有 限公 司产 品 ; K 6一A快 速 混 匀 器 , 苏 新 康 医 X 9 江
疗器械有 限公 司产 品 ; D 5离 心 机 , 海安 亭科 T L一 上
定 了地 黄血 中移行 成 分 , 以作 为地 黄 药 效物 质 基 础
学仪器 厂产 品 ; F一 0 0氮 气 吹 干仪 , 京 八 方 世 B 20 北
c n a t gt[ ] DgLvr i, 04 3 ( )2 l一 4 . l i la e J . i i s 2 0 ,6 4 :3 22 ic r s eD [ ] 错 , 立 国 , 玉 兰 .柴 胡 对 大 鼠实 验 性 肝 纤 维 化 的 预 3杨 邢 刘 防 作 用 [ ]实 用药 物 与 临床 , 05 8 5 :2一l . J. 2 0 ,( ) l 4
[ ] 荣宽 , 6李 张伯 伦 .反 映 肝 纤 维 化 的 血 清学 指 标 [ ] 大 连 J.
医科 大 学 学 报 , 0 2 2 ( ) 6 7 . 2 0 ,4 1 :8— 0 收 稿 日期 :0 0— 3— 9 修 回 日期 : 1 0 2 21 0 0 ; 2 0— 3— 5 0 ( 辑 陶 编 珠)
中 图分 类 号 : 8 R2 4
血 清药物 化学
H L 梓醇 PC
地 黄苷 D
文献 标 志 码 : B
地 黄 为 玄 参 科 地 黄 R h a na guioa L. em n i lt s i n
bs . oc 的新 鲜 或 干燥 块 根 或炮 制 加 工 品 , 药 依 次 h 入
青 岛海洋 化工 厂产 品 ; 聚糖凝 胶 , 玛西 亚生物技 葡 安 术 有 限公 司 产 品 ; 色谱 层 析 柱 , 国 A i n 公 司 产 美 g et l 品; 梓醇对 照 品 , 含 量 测定 用 , 中国 药 品生 物制 供 由
分 为地 黄 的 药效 物 质 。
关键 词 : f/  ̄ i 药效 学 -
入 至预 处理 过 的 HP一2 0型 大 孔 树 脂 柱 上 , 用 蒸 先 馏水 洗脱 除 杂 , 用 2 % 乙醇 洗脱 , 继 0 收集 醇 洗 脱 液 , 减压 浓 缩至适 量 , 硅胶 柱层 析 , 氯仿 :甲醇 : 经 用 水
4. O O 6 O 8. 0 1 0 1 0 1 0 .O O 0. 0 0 2. 4. 0 mi n