细菌内毒素工作标准品振荡15分钟的理论依据

细菌内毒素工作标准品振荡15分钟的理

论依据

细菌内毒素（Endotoxin），是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有结构，它在细菌生长、繁殖过程中，并不分泌到介质中，也不能从外壁层上自然脱落，它不是细菌的代谢产物，当细菌死亡解体后，才显示出一系列的内毒素生物活性。

细菌内毒素的化学结构是脂多糖和微量蛋白的复合物，脂多糖由三部分组成：O-特异性链、核心多糖和类脂A三部分组成。

O-特异性链：向外由若干个低聚糖的重复单位组成的多糖链，具有特异性。

核心多糖：分为内核心及外核心，外核心由数种单糖，包括葡萄糖、半乳糖、乙酰氨基葡萄糖等组成。内核心含有庚糖及特殊的KDO（3-脱氧-D-甘露糖-辛酮糖）。KDO以耐酸的酮糖键与类脂A的氨基葡萄糖连接。所有G-菌都有此结构。

类脂A：位于最外层，是以脂化的葡萄糖胺二糖为单位，通过焦磷酸键组成的一种独特的糖脂化合物，具有致热作用，是革兰氏阴性细菌内毒素的毒性成分。游离的类脂A可自身凝集成高分子的复合物，其分子量大小不等。游离的类脂A含有疏水性的中心及亲水性的边缘，是一种双相分子。

内毒素标准品是从大肠杆菌E.C oli O

111B

4

菌株的细胞壁提取精制而成。

细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解后，内毒素的疏水性中心相互结合形成大分子复合体，而难溶于水。《细菌内毒素检查法》要求“将细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解后在旋涡混合器上混匀15分钟，每稀释一步均应在旋涡混合器上混匀30秒钟。”在旋涡混合器上混匀15分钟的目的是借助外力破坏这种分子复合体，使内毒素均匀的分布在水溶液中，保证试验结果的真实准确。如果没有旋涡混合器或混匀时间不够，均会导致细菌内毒素分子复合体，这种溶质不能分散在溶媒中，而影响试验结果的准确性。