多功能酶标仪基本操作规程

多功能酶标仪基本操作规程

一、可见与紫外光原始吸光值的直接测定方法

1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。

2、再打开电脑开关。（注意，一定要先开仪器，后开电脑，以免仪器连接出现问题。）

3、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。

4、仪器自检后，酶标板托架自动伸出（注意仪器前部不要放置物品，以免档住托架的伸出）。将酶

标板按数字正确的方向（A1位于左上角）放在托架上。

5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标，酶标板将自动进入仪器中。（注意：千万不要用手

将酶标板推入仪器，造成仪器损坏）。

6、在屏幕上选Start measurement。点击绿色箭头。

7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿色箭头。

8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中，对板的类型进行选择。酶标的吸光度测定，一般情况

下选xxxxx xx Flat Transparent (x孔，平底，透明板)。（注意测定紫外吸收时要使用可以透过紫外光的透明板）如果板要加盖子，就要再选中Plate with cover。

9、在Measurements 栏内双击Absorbance ，出现Absorbance的对话框。

10、在Absorbance的对话框中：

⑴在Wavelength栏中Measurement项输入测定波长值；Reference项,在需要扣除背景波长时选中并

输入背景波长值。一般情况不选.

⑵在Multiple read per well栏中对于吸光值的测定可不选

⑶在Read 栏中: Number of flashes 项一般选10；Settle time（使平静时间）项对于96或384孔

板一般选0；对于其他孔数的板可考虑输入适当的值；孔数越少的板，Settle time 设置时间要较长,以防止在测定过程中板移动距离大,对液面平稳的影响。

⑷在Label栏中Name后输入你为此块板自定义的英文名；也可不设置。

11、在Part of plate 栏中，用鼠标左键拉框，选择要测定的样品孔（使待测定的样品孔变为黄色），

（注意：待测孔只可横向或纵向连续选择，不可以被间断）。如果选择错误需要更改，不要做任何删除，只要再直接重新选择即可。点击本栏中的Detail 对所选的样品孔进行确认后，点击OK，（如果选孔有错误，选择Cancel 返回上页再重复以上操作。）

12、点击OK后，箭头变绿，点击绿色箭头，在Measurement 的workspace处输入（日、月、年-

自定义文件名wsp）再点击Start，仪器开始自动测定。

13、测定结束后，点击File 选择print,直接打印测定参数与结果，或在最上方Edit选择Copy to Excel，

然后打开下方出现的Excel表（显示为板式数据）并打印结果。

14、关机，退出当前界面，点击左下角Exit Megellan 回到主屏幕。关电脑，关仪器电源和插板电

源。

二、荧光值的直接测定方法

1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。

2、再打开电脑开关。（注意，一定要先开仪器，后开电脑，以免仪器连接出现问题。）

3、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。

4、仪器自检后，酶标板托架自动伸出（注意仪器前部不要放置物品，以免档住托架的伸出）。将酶

标板按数字正确的方向（A1位于左上角）放在托架上。

5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标，酶标板将自动进入仪器中。（注意：千万不要用手

将酶标板推入仪器，造成仪器损坏）。

6、在屏幕上选Start measurement。点击绿色箭头。

7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿色箭头。

8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中，对板的类型进行选择。荧光酶标的测定，一般情况下

选xxxxx xx Flat black (x孔，平底，黑板。6孔板测定时没有黑板可选,可选择6孔,平底,透明板)。

（注意在选择底部测定时模式时要选择底部透明的黑板）如果板要加盖子，就要再选中Plate with cover。

9、在Measurements 栏内双击Fluorescence Intensity ，出现Fluorescence Intensity的对话框。

10、在Fluorescence Intensity的对话框中：

⑴在Wavelength栏中:Excitation项输入激发波长值；Emission项输入发射波长值

⑵在Mode栏：根据被测物质的性质进行适当选择。

Top 为顶部测定，适合于透明均匀的液体的荧光测定

Bottom 为底部测定，适合于贴壁细胞类的荧光测定

⑶在Integration栏：

Log time （滞后时间）除在做时间分辨荧光测定时需要选择，一般荧光测定时不选。

Integration time （整体测定时间）一般在20～40µs范围内选择

⑷在Multiple read per well栏：

对于透明均匀的液体的荧光测定可不选。对于贴壁细胞类的荧光测定要选择。选择形式，参看栏目中的图形。

⑸在Read 栏中：

Number of flashes 项一般可选3~5次；

Settle time（使平静时间）项对于96或384孔板一般选0；对于其他孔数的板可考虑输入适当的值；孔数越少的板，Settle time 设置时间要较长；以防止在测定过程中板移动距离大,对液面平稳的影响。

⑹在Gain（增益）栏：根据实验要求的不同进行选择

Manual gain （人工增益）项：要做多块板之间的数据比较时选择该项;固定一个合适的增益值，选

择范围在1～225之间.

Optimal(自动最佳)项:仪器根据实时测定时该板上的最强荧光值,自动给出合适的增益.一般在作单板内的数据比较时选择该项

Calculated form well项:以一个孔内的阳性物荧光值为比较时, 选择该项.

在Label栏中Name后可输入你为此块板自定义的英文名；也可不设置。

11、在Part of plate 栏中，用鼠标左键拉框，选择要测定的样品孔（使待测定的样品孔变为黄色），

（注意：待测孔只可横向或纵向连续选择，不可以被间断）。如果选择错误需要更改，不要做任何删除，只要再直接重新选择即可。点击本栏中的Detail 对所选的样品孔进行确认后，点击OK，（如果选孔有错误，选择Cancel 返回上页再重复以上操作。）

12、点击OK后，箭头变绿，点击绿色箭头，在Measurement 的workspace处输入（日、月、年-

自定义文件名wsp）再点击Start，仪器开始自动测定。

13、测定结束后，点击File 选择print,直接打印测定参数与结果，或在最上方Edit选择Copy to Excel，

然后打开下方出现的Excel表（显示为板式数据）并打印结果。

14、关机，退出当前界面，点击左下角处Exit Megellan 退回到电脑主屏幕。

15、关电脑，关仪器电源和电插板电源。

三、可见、紫外、荧光测定的标准曲线法

1、开机：首先打开电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。打开电脑开关。（注意，一定要先开仪器，后开电脑，以免仪器连接出现问题。）

2、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。

3、放酶标板：仪器自检后，酶标板托架自动伸出（注意仪器前部不要放置物品，以免档住托架的

伸出）。将酶标板按数字正确的方向（A1位于左上角）放在托架上。点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标，酶标板将自动进入仪器中。（注意：千万不要用手将酶标板推入仪器，造成仪器损坏）。

4、创建方法：

4.1 在屏幕上选。Create/edit a method点击绿色箭头，