E2(雌二醇)检测作业指导书

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《Procedure Circulation Form》文件名称（File Name）: 雌二醇（E2）检测作业指导书

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雌二醇检测作业指导书

1.目的

检测人血清或血浆样本中雌二醇（E2)的浓度，作临床辅助诊断用。

2.检测原理

采用Chemiflex®的化学发光微粒子免疫检测（CMIA）技术，对人血清，血浆中雌二醇进行定量测定。第一步，将样本、样本稀释液和雌二醇抗体（兔，单克隆）包被的顺磁微粒子混合。样本中的雌二醇与雌二醇抗体包被的微粒子结合，孵育后，将吖啶酯标记的雌二醇结合物添加至反应混合物中。进一步孵育和冲洗后，向反应混合物中添加预激发液和激发液。对产生的化学发光反应物进行测量，以相对光单位（RLUs）表示。样品中的雌二醇含量与ARCHITECT i光学系统检测到的RLUs值成反比。

3.样本的采集和贮存

3.1 ARCHITECT雌二醇项目可以使用人血清（包括采集于血清分离管中的血清）或采集于肝素锂（包括血浆分离管）或EDTA钾抗凝管中的血浆。

3.2标本溶血超过+++以上的情况下退单。

3.3稳定性： 2-8℃可稳定7天

3.4样本贮存：2-8℃保存10天

4.试剂和仪器

4.1试剂成分：

4.1.1检测试剂盒ARCHITECT孕酮测定试剂盒（7K72）

微粒子：1瓶或4瓶（9.9ml）雌二醇抗体（兔，单克隆）包被的微粒子,储存于含有蛋白（兔）稳定剂

的TRIS/BIS TRIS缓冲液中。最低浓度：0.0657%固体。防腐剂：ProClin。

结合物：1瓶（5.9ml）吖啶酯标记的雌二醇结合物,储存于含有表面活性剂稳定剂的柠檬酸盐缓冲液

中。最低浓度：63.36ng/mL。防腐剂：ProClin

4.1.2项目稀释液 1瓶或4瓶（

5.9ML）雌二醇项目稀释液，含有表面活性剂，储存于柠檬酸盐缓冲液中。防腐剂：ProClin。

4.1.3样本稀释液1瓶或4瓶（10.0ML）雌二醇样本稀释液，储存于含有蛋白（牛）稳定剂的TRIS缓冲液中。防腐剂：叠氮钠。

注意：仅供体外诊断使用；避免皮肤直接接触液体试剂；废弃物按生物危害垃圾处理。

4.2试剂准备：液体，即开即用，无需特殊准备。

4.3试剂贮藏要求：

未打开的试剂盒：2-8℃储存有效期内稳定。

分析仪上冷藏稳定性: 30天

4.4仪器

使用雅培I2000SR化学发光仪

5.安全防范

操作时必须穿戴手套和工作服；工作后的台面应消毒擦洗；用过的加样枪头等耗材应作为医用垃圾处理；为了避免形成气溶胶，所有样品尽可能不要在空气当中暴露太长时间；遇到样本洒出，被污染的区域应立即用次氯酸钠溶液清洗，擦拭用的物品应丢弃在标有生物污染的垃圾筒中。

6.项目校准

6．1校准品：雌二醇校准品。①按照指导储存和操作时，ARCHITECT雌二醇校准品在效期内保持稳定。②不能使用过期产品。③校准品必须密封避光保存。有效期：2-8℃，10个月。

使用说明：校准品从2-8℃取出后即可使用。每次使用前，轻轻颠倒混匀。每次使用后，盖紧瓶盖将试剂瓶放于盒中避光保存并将校准品放回2-8℃储存。

6．2 当下列任何一种情况存在时，请重新校准：

●试剂批号改变进行六点定标；

●根据质控需要进行六点定标。

6.3 校准步骤

6.3.1校准品的准备：从2-8℃冰箱中取出雌二醇校准品，颠倒混匀后将校准品滴入日立杯中（500微升）放置五分钟到室温。

6.3.2在仪器界面点击申请，选择校准申请，输入架子号，选择雌二醇项目，点击添加申请，按照指定位置放置校准品。

6.3.3放入样品架，仪器开始定标。

6.3.4查看定标结果：在仪器界面点击质控-校准，选择校准历史，查看定标结果。

6.3.5校准原始结果的记录：每天校准过的项目打印出来，保存在《定标记录》文件夹中。

6.3.6测定定值质控品或常规使用质控品，看结果是否在允许范围内。

7.质量控制

具体操作步骤及要求详见《生化/发光室内质控作业指导书》。在报告试验结果之前，应评估质控结果是否失控。只有在质控结果验证在可接受范围时才可报告临床试验结果。

8.溯源性

本检测方法已按照Abbott Internal Reference Standard推荐的方法校准标准化。

9.操作步骤

具体操作步骤内容详见《雅培i2000SR自动分析仪操作、维护程序》

10.单位换算

浓度（pg/mL)×（3.67）=pmol/L

浓度（pg/mL)×（0.00367）=nmol/L

11.性能指标

科室验证性能指标见《方法学验证》文件夹

12.生物参考区间

男成人：40.4-161.5pmol/L

女卵泡期：77.1-921.2pmol/L

女排卵期：139.5-2381.8pmol/L

女黄体期：77.1-1145pmol/L

女绝经期：0-102.8pmol/L

接受激素替代疗法的绝经期女性,0-528.5pmol/L

13.干扰物质

胆红素,干扰物质浓度:20,干扰物质单位:mg/dL,影响程度:≤10%

甘油三酯,干扰物质浓度:1000,干扰物质单位:mg/dL,影响程度:≤10%

血红蛋白,干扰物质浓度:500,干扰物质单位:mg/dL,影响程度:≤10%

胆固醇，干扰物质浓度:240,干扰物质单位:mg/dL,影响程度:≤10%

14.最大允许误差及最小检测差异

雌二醇（E2)的最大允许误差为：25%；最小检测差异为：15.0pg/ml；最低检测临界值为：60.0pg/ml。

【±25%(＞60.0pg/ml）；±15.0pg/ml(≤60.0pg/ml）】

15.临床意义

测定雌二醇对青春前女性内分泌疾病的诊断，对闭经、月经紊乱、卵巢功能评估有重要意义，是研究生殖生理与诊断不孕的重要的手段。1．雌二醇增高常见于女性性早熟、男性乳房发育、妊娠（尤其双胎或多胎）、雌激素