高中生物选修复习专题

选修复习专题

一．单项选择题

1.(2007广东7)现有一长度为1000碱基对(by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用Kpn1单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200 by和600 by 两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是

2.(2007广东16)“猪一沼一茶”是华南山地丘陵地区常见的生态农业模式，由种植（茶树）、养殖（猪）、农户（人）和沼气生产（微生物）四个子系统构成。该生态农业模式

A．是由茶树、猪、人和微生物组成的生态系统

B．实现了物质和能量在系统中的多级循环利用

C．使整个生产过程进入了废物资源化的良性循环

D．注重系统内部的自身调节作用，不需要外部投入

3.（2008全国Ⅰ3）下列关于细菌的叙述，错误的是

A．硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质

B．某些细菌可以利用光能固定CO2合成有机物

C．生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质

D．含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌

4.（2010江苏18）下列关于转基因植物的叙述。正确的是

A．转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中

B．转抗虫基因的植物．不会导致昆虫群体抗性基因频率增加

C．动物的生长激素基因转入植物后不能表达

D．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题

5.（2011广东3）华南虎是国家一级保护动物，可采用试管动物技术进行人工繁殖，该技术包括的环节有

①转基因②核移植③体外受精④体细胞克隆⑤胚胎移植

A. ①③

B. ①④

C. ②⑤

D. ③⑤

6.（2011广东5）以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是

A.洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂

B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少

C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测

D.在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢

7.（2011 江苏3）下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是

A．腐乳制作所需要的适宜温度最高

B．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵

C．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌

D．使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA 和 RNA

8.（2011 江苏15）下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是

A．酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶

B．透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化

C．棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤

D．多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层

9.（2012广东2）培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是

A.组织培养

B.细胞杂交

C.显微注射

D.核移植

10.（2012浙江6）天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是

A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B B．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B

C．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞

D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞

11.（2012浙江2）下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的叙述，正确的是A．绝大多数精卵细胞的识别具有物种特异性

B．卵裂球细胞的体积随分裂次数增加而不断增大

C．囊胚的滋养层细胞具有发育全能性

D．原肠胚发育分化形成内外两个胚层

12.(2012天津1)下列关于细胞的叙述，错误的是

A.自体干细胞移植通常不会引起免疫排斥反应

B.胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化

C.组织的细胞更新包括细胞凋亡和干细胞增殖分化等过程

D.造血干细胞具有分化出多种血细胞的能力，可用于治疗白血病

13.（2012江苏9）通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是

A．对供体和受体母牛都要进行相同激素处理

B．受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行

C．对冲卵获得的原肠胚检查合格后方可移植

D．胚胎分割移植实现同卵多胎的成功率较低

二．双项选择题

14.(2007广东30)目前，一些地区采用人工浮床（如下图）治

理水体污染。人工浮床净化水体的机理包括

A．植物吸收水中悬浮物，提高水体透明度

B．植物吸收水中的NO3—、PO43—等，降低水中氮、磷等含量

C．浮床遮光，抑制浮游藻类的生长繁殖，防止水华发生

D．浮床下方水体氧浓度升高，减少微生物种类和数量

15.（2010广东22）新技术的建立和应用对生物学发展至关重

要。下列技术（或仪器）与应用匹配正确的是

A.PCR技术——扩增蛋白质

B.杂交瘤技术——制备单克隆抗体

C.光学显微镜——观察叶绿体的基粒

D.花粉离体培养——培育单倍体植物

16.（2010广东25）小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（见图10），恰当的做法是

A．加入适量的酵母菌

B．一直打开阀b通气

C．一直关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟

D．把发酵装置放到4℃冰箱中进行试验

三．非选择题

17.(2007广东40)（生物技术实践，15分）

为了实现燃料供应来源多样化，发展长期替代化石燃料的产品如燃料酒精、生物柴油、沼气等已经列入我国未来10年的发展计划。

广东省是我国甘蔗主产区之一。甘蔗是一种高光效的C4植物，单位面积产量很高，种植面积日益扩大，目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗→榨汁（蔗糖）→酵母发酵→蒸馏→成品（燃料酒精）。

请根据上述材料，回答下列问题：

（1）简述甘蔗大规模快速繁殖技术的过程。

（2）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意和，加琼脂后灭菌，制成固体平板。

步骤3：将紫外照射后的菌液稀释涂布平板。

步骤4：根据筛选出突变菌。

（3）上述步骤2、3和4的依据分别是。（4）利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵还有哪些可行方法？（列举两种）

（5）甘蔗榨汁以后还有大量的蔗渣废弃物，主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌无法直接利用，原因是其。请提出解决该问题的方法。（列举两种方法）

（6）突变菌往往带有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物和DNA聚合酶的作用分别是什么？

18.(2007广东41)（现代生物科技专题，15分）

香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜冻影响，对香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒（BBTV，单链环状DNA

病毒）引起的香蕉束顶病，对香蕉生产的危害十分严重。当前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段提高其种质水平，具有重要意义。

请根据上述材料，回答下列问题：

（1）简述香蕉大规模快速繁殖技术的过程。

（2）脱毒香蕉苗的获得，可采用的方法，此方法的依据是

和。

（3）建立可靠的BBTV检测方法可以监控脱毒香蕉苗的质量，请问可用哪些方法检测病毒的存在？（列举两种方法）

（4）在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值，该基因可以从这些鱼的DNA中扩增得到。试述在提取和纯化DNA时影响提纯效果的因素及其依据。（列举两点）

（5）如何利用afp基因，通过转基因技术获得抗寒能力提高的香蕉植株？在运用转基因香蕉的过程中，在生态安全方面可能会出现什么问题？（列举两点）

（6）从细胞工程的角度出发，简述一种培育抗寒香蕉品种的方法及其依据。另外，抑制果胶裂解酶的活性可以延长香蕉果实储藏期，请描述采用蛋白质工程技术降低该酶活性的一般过程。

19.（2008广东38）．（生物技术实践，10分）

苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请回答下列问题：

（1）②中培养目的菌株的选择培养基中应加入作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基（A．影响；B．不影响）细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用法。

（2）④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于；使用法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？

（3）如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？

（4）实验过程中如何防止其它微生物的污染？

20.（2008广东39）．（现代生物科技专题，10分）

天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转人酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是，用将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子，以完成工程菌的构建。

（2）若要鉴定淀粉酶基因是否插人酿酒酵母菌，可采用的检测方法是；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用检测。将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，请解释该现象发生的原因。

（3）如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？

（4）微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？

21.（2009广东）请根据下述材料，回答第Ⅰ题、Ⅱ题。

材料：饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中，猪、禽等动物由于缺乏有关酶，无法有效利用植酸，造成磷源浪费，而且植酸随粪便排除后易造成环境有机磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成为目前重要的饲料添加剂之一。

Ⅰ.（10分）生物技术实践

（1）商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。

活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间 表示。

（2）利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图：

Ⅰ中的主要成分为 ；Ⅱ中包含多种酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化

得到植酸酶的方法及其依据。

（3）为建设基因工程菌，可用PCR 等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR 反

应包含多次循环，每次循环包括三步：____ 。反应过程中打开模板DNA 双

链的方法是 。

（4）除植酸酶外，微生物还应用在 的生产中。

Ⅱ.（10分）现代生物科技专题．．．．．．．．

（1）饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工

程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的 ，然后改变植酸酶

的 ，从而得到新的植酸酶。

（2）培育转植酸梅基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基

因导入大豆细胞常用的方法是 。请简述获得转基因植株的完整

过程。

（3）为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过 转入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期可通过 方法，从而一

次得到多个转基因猪个体。

（4）若这些转基因动、植物进入生态环境中，对生态环境有何影响？

22.（2010安徽31）II ．（9分）草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传

播给后代，导致产量降低。品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。

草莓微型繁殖的基本过程如下：

外植体??

→①愈伤组织??→②

芽、根??→植株 请回答：

（1）微型繁殖培育无病毒草莓苗时，一般选取_________作为外植体，其依据是_

___ 。

（2）在过程①中，常用的MS 培养基主要成分包括大量元素、微量元素和______，

在配制好的培养基中，常常需要添加________，有利于外植体启动细胞分裂形成

愈伤组织。接种后2~5d ，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是__________。

（3）在过程②中，愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其

原因可能是_____________。

23.（2010海南26）（18分）（现代生物科技专题）

请回答胚胎工程和基因工程方面的问题：

（1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、__________、_____________以及在母体中发育和产出等过程。

（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其__________。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和__________。

（3）通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞，常使用的激素是__________。

（4）利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤是__________、基因表达载体的构建、__________和__________。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、__________、__________、__________和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是__________（显微注射法、农杆菌转化法），为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是__________（受精卵、乳腺细胞）。

24.（2011新课标39）．（生物技术实践）（15分）

有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即

和。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、1 和。无菌技术要求实验操作应在酒精灯

附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

25.（2012全国卷新课标40）现代生物科技专题（15分）根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

(1)限制性内切酶切割ＤＮＡ分子后产生的片段，其末端类型有和。

(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA 除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是。

(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即DNA 连接酶和DNA连接酶。

(4)反转录作用的模板是，产物是。若要在体外获得大量反转录产物，常采用技术。

(5)基因工程中除质粒外，和也可作为运载体。

(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是。

26.（2012山东35）（8分）（现代生物科技专题）

毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF Ⅱ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

（1）过程①中最常用的运载工具是______，所需要的酶是限制酶和_________。（2）在过程②中，用_______处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是______________。（3）在过成③中，用_________处理以获取更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行_________处理。

（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是_________。在胚胎移植前，通过_______技术可获得较多胚胎。

27.(2012天津7)（13分）生物分子间的特异性结合的性质广泛用于生命科学研究。以下实例为体外处理“蛋白质-DNA复合体”获得DNA片段信息的过程图。

据图回答：

（1）过程①酶作用的部位是键，此过程只发生在非结合区DNA，过程②酶作用的部位是键。

（2）①、②两过程利用了酶的特性。

（3）若将得到的DNA片段用于构建重组质粒，需要过程③的测序结果与1 酶的识别序列进行对比，以确定选用何种酶。

（4）如果复合体中的蛋白质为RNA聚合酶，则其识别、结合DNA序列位基因的。

（5）以下研究利用了生物分子间的特异性结合的有（多选）

A.分离得到核糖体，用蛋白酶酶解后提取rRNA

B.用无水乙醇处理菠菜叶片，提取叶绿体基粒膜上的光合色素

C.通过分子杂交手段，用荧光物质标记的目的基因进行染色体定位

D.将抑制成熟基因导入番茄，其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合，终

止后者翻译，延迟果实成熟。

参考答案：

选择题：

1-5.DCDAD 6-10.DDAAA 11-13.ABD 14.BC 15.BD 16.AC

非选择题：

17. （1）选取甘蔗外植体，通过诱导脱分化产生愈伤组织，然后通过调整植物激素比例，再分化形成芽和根，获得大量试管苗（或通过诱导大量形成胚状体，制成人工种子，适宜条件下萌发长成幼苗）。

（2）添加高浓度蔗糖（葡萄糖）；调低pH值；是否能在选择培养基上生长。（3）提供高糖和酸性的筛选环境；获得单菌落；能生长代表该菌落具有耐高糖和耐酸的特性。

（4）①利用突变菌的耐酸特性，降低培养基的pH值，达到抑菌的目的；②利用突变菌的耐高糖特性，通过高渗环境达到抑菌目的；③保持厌氧环境，达到抑菌目的；

④在培养基中添加一些抑制物如特殊的抗生素，达到抑菌目的。

（5）缺乏相应分解酶系（或缺乏纤维素酶和半纤维素酶）。在酵母菌中转入分解酶系相关基因；利用酶或微生物分解蔗渣；利用物理和化学方法分解蔗渣；将酵母菌与其他能分解蔗渣的微生物混合发酵。

（6）引物的作用是结合在模板DNA上，提供DNA延伸起始位点；DNA聚合酶的作用是从引物的3' 端开始催化DNA链的延伸。

（立意：综合考查考生对生物技术实践模块中的植物组织培养、特殊微生物的筛选及应用、酶的应用以及PCR技术的基本操作和应用等内容的掌握；理论联系实际，针对生物学问题进行初步研究，设计实验路线，对实验结果和现象进行正确的分析与判断，综合运用所学知识解决实际问题的能力。）

18. （1）选取香蕉外植体，通过诱导脱分化产生愈伤组织，然后通过调整植物激素比例，再分化形成芽和根，获得大量试管苗（或通过诱导大量形成胚状体，制成人工种子，适宜条件下萌发长成幼苗）。

（2）茎尖（分生组织）组织培养；茎尖不带病毒（或病毒在植物体内分布不均匀）；植物细胞全能性。

（3）①BBTV病毒基因的检测（DNA分子杂交技术）；②BBTV病毒蛋白的检测（获得抗血清，利用抗原一抗体的杂交反应，判断病毒是否存在）。

（4）①选择NaCl溶液的合适浓度，利用DNA和其它杂质在不同NaCl溶液中溶解度不同的特性，达到分离目的；②加入一定量酒精，使部分蛋白质杂质溶解于酒精，与DNA分离；③加入蛋白酶，除去蛋白质杂质的干扰；④控制DNA提取的温度，使大多数蛋白质杂质变性。

（5）将afp基因插入土壤农杆菌的质粒，构建表达载体，通过农杆菌的转化导入香蕉受体细胞，成功转化的香蕉细胞通过组织培养形成植株。生态安全问题包括：①外源基因扩散到其他物种（外源基因漂移）；②转基因植株扩散影响生态系统的结构和功能；③转基因植株扩散对生物多样性的影响；④转基因植物残体或分泌物对环境的影响。

（6）体细胞杂交育种，其依据是将不同品种的香蕉体细胞利用细胞融合技术融合成杂种细胞后培育出抗寒香蕉品种（或体细胞诱变育种，其依据是利用诱变剂等方法使香蕉离体培养细胞发生基因突变，然后筛选培育出抗寒品种）。

蛋白质工程方法的步骤为：①果胶裂解酶蛋白的功能分析，②果胶裂解酶蛋白的结构预测和设计，③果胶裂解酶基因的改造。

（立意：引导考生关注对科学、技术和社会发展有重要意义的生物学新进展；考查考生对细胞工程、基因工程及蛋白质工程等现代生物科技内容的掌握，考查考生对转基因生物的安全性问题的理解；考查合理运用现代生物科技手段解决自然界和社会生活中的生物学问题。）

19. （1）苯酚（1分）A（1分）平板菌落计数（活菌计数或菌落计数）（1分）。

（2）④含除苯酚外的其它碳源，⑤以苯酚作为唯一碳源（1分）。

平板分离（稀释涂布平板或平板划线分离）（1分）。

避免培养过程产生的水分影响微生物的生长（1分）。

（3）用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚含量（1分）。

（4）培养基灭菌（1分）接种环境灭菌（1分）接种过程无菌操作（1分）。

命题立意：考查考生对微生物的分离、培养、数量测定、无菌操作等基本技术的掌握和应用所学知识解决实际问题的能力。

20. （1）限制酶（限制性核酸内切酶）（1分）DNA连接酶（1分）导入酿酒酵母菌（1分）。

（2）DNA分子杂交技术（1分）抗原—抗体杂交或淀粉酶活性（1分），该工程菌产生的淀粉酶可分泌至培养基，水解淀粉后的区域，遇碘不再变蓝色，产生透明圈（1分）。

（3）测定相同培养条件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精产量（1分）。

（4）①工具酶主要来自微生物；②最重要的目的基因供体库之一；③目的基因的载体之一；④作为受体细胞；⑤提供用于发酵的工程菌（任选3条，每条1分，共3分）。

命题立意：考查考生对基因工程原理和技术的理解和掌握，引导考生关注科学、技术与社会发展中重要的生物学问题，要求考生能合理应用现代科技解决生产和生活中的生物学问题。

21. Ⅰ.（1）透明圈植酸钠的消耗量（肌醇和磷酸的生成量）

（2）小分子杂质

凝胶色谱法：根据蛋白质之间分子大小，吸附性质等差异进行纯化。（或电泳法：根据蛋白质之间电荷，分子大小等差异进行纯化。）

（3）变性，复性，和延伸加热

（4）蛋白酶，脂肪酶，纤维素酶

解析：本题考查对微生物的分离和培养，蛋白质的纯化，酶活性鉴定等知识，结合实际应用。

Ⅱ. （1）空间结构氨基酸序列

（2）农杆菌介导的转化法外源植酸酶基因→农杆菌→大豆细胞→大豆植株再生→鉴定

（3）显微注射法胚胎分割移植

（4）减少环境中磷的污染，但该基因可能扩散到环境中。

解析：本题考查了基因工程，蛋白质工程，胚胎工程，生态工程的基本技术，并且深入考察基础知识，对蛋白质改造时，首先要知道蛋白质的结构，有氨基酸序列构成的一级结构和折叠组装成的空间结构。转基因技术有四个基本步骤，经常采用农杆菌介导法，因为农杆菌容易侵染植物细胞，重组质粒被导入受体细胞时，经常用

到显微注射法，而胚胎分割移植能快速繁育优良种畜，基因工程能够使个体表现出人们所需要的性状，减少环境中磷的污染，但可能会随个体的杂交,扩散到环境中去，造成基因污染。

22. （1）茎尖（或根尖）茎尖（或根尖）病毒极少，甚至无病毒

（2）有机物植物激素外植体消毒不彻底（3）培养基中生长素浓度偏低解析：培育无病毒植株苗，应选择不含病毒部分培养，而植物体新生部位不含病毒，植物组织培养培养基成分应包含大量元素、微量元素、有机物，另外常常需要添加植物激素诱导植物细胞分裂、分化，外植体边缘局部污染，说明消毒不彻底，不同植物激素的比例影响植物细胞发育方向，生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成，比值高低，有利于芽的分化、抑制根的形成。

23.（1）早期胚胎培养（1分）胚胎移植（2分）

（2）获能第一极体（每空1分，共2分）

（3）促性腺激素（其他合理答案也给分）（2分）

（4）获取目的基因（2分）将目的基因导入受体细胞（2分）

目的基因的检测与鉴定（2分）人干扰素基因（或目的基因）（1分）

终止子（1分）标记基因（1分）显微注射法（1分）受精卵（1分）. 解析:试管牛的培育过程是:将精子与卵子取出体外受精,将受精卵在体外培养获得早期胚胎,将早期胚胎移植到母体内进一步发育,成熟后从母体内产生。精子与卵子受精时，精子要经过获能处理，卵子要发育到减数第二次分裂的中期才具备受精能力。要想使使奶牛产生更多的卵子，通常用促性腺激素处理。基因工程操作的四个基本步骤是：获取目的基因，基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定。培育转基因动物时，，一般用受精卵和胚胎干细胞作为受体细胞，因为这些细胞的全能性最大，易培养在一个新个体。当动物细胞作受体细胞时，一般采用显微注射法将目的基因导入。24.（1）原油选择（2）平板划线法稀释涂布平板法（3）强（4）干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰

解析:⑴该同学筛选能降解原油的菌株，可以将样品稀释液置于以原油为唯一碳源的固体培养基中培养，该培养基功能上属于选择培养基。⑵菌株的接种方法，常用的有两种：平板划线法和稀释涂布平板法。⑶菌株分解周围的营养物质，出现分解圈，分解圈大说明该菌株的降解能力强。⑷实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌；微生物的培养要求严格的无菌技术，操作时在酒精灯火焰附近进行，避免周围其他细菌的污染。

25. (1)平末端和粘性末端 (2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 (3)T４Ecoli (4)mRNA 单链DNA PCR（多聚酶链式反应）

(5)动植物病毒λ噬菌体的衍生物 (6)未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱

26. （1）质粒DNA连接酶

（2）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）维持培养基（液）的pH

（3）促性腺激素（或促滤泡素，孕马血清）去核

（4）（早期）胚胎培养胚胎分割

解析：本题综合考查基因工程的基本工具、动物细胞工程和胚胎工程的基础知识，考查识图、获取信息与处理信息的能力。

27. （1）磷酸二酯键，肽键

（2）专一

（3）限制性核酸内切酶

（4）启动子

（5）ACD

解析:（1）DNA酶作用的部位是DNA的磷酸二酯键，蛋白酶作用的部位是肽键。

（2）①②过程利用了各种酶催化一种或一类化学反应的特性，即专一性。

（3）DNA要构建重组质粒，需要用限制性DNA内切酶切割，再与质粒重组。

（4）RNA聚合酶识别和结合在基因的启动子上，才能驱动基因转录。

（5）蛋白酶能特异性的酶解蛋白质，分子杂交手段也是利用各物质分子结合的特异性，抑制成熟基因转录出的mRNA与催化成熟酶基因的mRNA碱基互补结合，也具有特异性，光合色素易溶于有机溶剂，与酒精并不是特异性的溶解，所以选ACD。