basta筛选拟南芥的原理
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basta筛选拟南芥的原理
Basta筛选拟南芥的原理是基于转基因技术。首先,通过农杆菌转化法将含有激活标记质粒pSK1015的农杆菌直接喷雾进行转化拟南芥,构建拟南芥的激活标记突变体库。然后,以抗除草剂Basta为筛选标记,对转化后的拟南芥进行筛选。
在筛选过程中,不同时期喷洒不同浓度的Basta,以观察其对拟南芥生长的影响。研究发现,拟南芥转化体刚长出2叶时比较敏感,此时开始喷施Basta效果比较好。同时,PPT含量为135%的情况下,稀释2000~4000倍喷施效果好,此时既可有效筛选出阳性苗,又不会抑制阳性苗的生长。第一次喷施后6天左右移栽阳性苗较好,此时可以明显区分出阳性苗,且移栽后缓苗快、长势好。
因此,Basta筛选拟南芥的原理是基于转基因技术,通过抗除草剂Basta作为筛选标记,筛选出具有抗性的阳性苗。通过合理控制喷施时间和浓度,可以有效筛选出拟南芥的抗性阳性苗,为进一步的研究和应用提供基础。