专题17植物组织培养技术及有效成分提取

专题17植物组织培养技术及有效成分提取
专题17植物组织培养技术及有效成分提取

专题17植物组织培养技术及有效成分提取

1.对胡萝卜素的提取过程的分析正确的是

A.把新鲜的胡萝卜切成米粒大小的颗粒,置于烘箱中烘干时,温度越高、干燥时间越长,烘干效果越好

B.在萃取过程中在瓶口安装冷凝回流装置,是为了防止加热时有机溶剂的挥发C.在萃取后,没有必要进行过滤

D.将滤液用蒸馏装置进行蒸馏,要收集蒸发出去的液体,蒸发出去的是胡萝卜素,留下的是有机溶剂

【答案】B

【解析】把新鲜的胡萝卜切成米粒大小的颗粒,置于烘箱中烘干时,温度太高、干燥时间太长,会导致胡萝卜素分解,A错误;在萃取过程中在瓶口安装冷凝回流装置,是为了防止加热时有机溶剂的挥发,B正确;在萃取后,过滤的目的是除去固体残渣,C错误;将滤液用蒸馏装置进行蒸馏,要收集蒸发出去的液体,蒸发出去的是有机溶液,留下的是胡萝卜素,D错误。

2.在玫瑰精油和橘皮精油提取过程中,正确的是

A.玫瑰精油和橘皮精油都可用蒸馏、压榨和萃取的方法提取

B.分离出的玫瑰精油油层还会含有一定的水分,可加入无水Na2SO4吸水

C.新鲜的橘皮中含有大量的果蜡、果胶等,为了提高出油率,需用CaCO3水溶液浸泡D.用于提炼玫瑰精油的玫瑰花应避免在花开的盛期采收,因为此时花朵含油量较低【答案】B

【解析】橘皮易焦糊适宜用压榨法提取,不能用蒸馏法提取,这是因为橘皮精油的有效成分在用水蒸汽蒸馏时会发生部分水解,使用水中蒸馏又会产生原料焦糊的问题,A错误;分离出的玫瑰精油油层还会含有一定的水分,可加入无水Na2SO4吸水,放置过夜,再过滤除去固体Na2SO4就可以得到玫瑰油了,B正确;新鲜的橘皮中含有大量的果蜡、果胶等,为了提高出油率,需用Ca(OH)2溶液浸泡,能够破坏细胞结构,分解果胶,防止橘皮压榨时滑脱,提高出油率,C错误;用于提炼玫瑰精油的玫瑰花应在花开的盛期采收,因为此时花朵含油量较高,D错误。

3.如图是利用水中蒸馏法提取玫瑰精油的装置。下列有关该装置的描述,错误的是()

A.该装置在安装时需要先固定热源酒精灯,再固定蒸馏瓶,并要注意蒸馏瓶与热源的距离

B.在安装蒸馏头时,要使蒸馏头的横截面与铁架台平行

C.图中冷凝管的进水口、出水口接错,进水口应在下,出水口应在上

D.将温度计固定在蒸馏头上,固定的位置如图所示,使温度计水银球略高于液面

【答案】D

【解析】该装置在安装时需要先固定热源,再固定蒸馏瓶,并要注意蒸馏瓶离热源的距离,A正确;安装蒸馏头时,要使蒸馏头的横截面与铁架台平行,B正确;图中冷凝管进水口、出水口接反,应该与水蒸气流向相反,即进水口应在下,出水口应在上,C正确;图中温度计位置过低,温度计的液泡应与蒸馏烧瓶的支管口下沿保持水平,D错误。4.如图为胡萝卜素的纸层析结果示意图。下列有关说法不正确的是()

A.A、B、C、D 4点中,属于标准样品的样点是A和D,提取样品的样点是B和C B.点样应该快速细致,圆点要小,每次点样时都要保持滤纸干燥

C.图中①和②代表的物质分别是其他色素和杂质、β-胡萝卜素

D.该层析的目的是鉴定提取的β-胡萝卜素粗品

【答案】C

【解析】提取出来的胡萝卜素往往含有杂质,在纸层析结果示意图中会有其它色素带,而标准样品只有一个色素带,所以图中A、B、C、D四点中,属于标准样品的样点是A 和D,属于提取样品的样点是B和C,A正确;对提取出的胡萝卜素进行纸层析鉴定时,为保证色素经过纸层析后,色素点清晰,易于鉴别和区分,点样时应该快速细致,圆点要小,每次点样时都要保持滤纸干燥,B正确;标准样品的样点是A和D,则在图中的层析谱中,①代表的物质是β-胡萝卜素、②代表的物质是其他色素和杂质,C错误;D、该层析的目的是鉴定提取的β-胡萝卜素粗品,D正确。

5.如图所示为提取胡萝卜素的装置示意图,下列有关叙述正确的是()

A.该装置也可以用于提取柑橘和柠檬中的植物芳香油

B.提取胡萝卜素时,1的作用是防止加热时有机溶剂挥发

C.提取胡萝卜素时,2中可以加入酒精来提取

D.提取胡萝卜素时,为了提高温度,可以不要水浴锅直接用酒精灯加热

【答案】B

【解析】该装置是用萃取法提取胡萝卜素的萃取装置,提取柑橘和柠檬中的植物芳香油通常采用压榨法,A错误;1为冷凝管,提取胡萝卜素时,1的作用是防止加热时有机溶剂挥发,B正确;2为烧瓶,酒精是水溶性有机溶剂,萃取中能与水混溶而影响萃取效果,因此提取胡萝卜素时,2中不能加入酒精来提取,C错误;萃取剂为有机溶剂,易燃易爆,所以提取胡萝卜素的萃取过程不能直接用酒精灯加热,而应采用水浴加热,D错误。

6.下列有关植物有效成分提取的顺序的描述,正确的是()

①胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→浓缩→过滤→胡萝卜素

②石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→静置→橘皮油

③鲜玫瑰花+清水→水蒸气蒸馏→油水混合物→分离油层→除水→玫瑰油

A.①②③B.①②C.②③D.①③

【答案】C

【解析】提取胡罗卜素的流程是:胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素,①错误;提取橘皮精油的操作流程为:石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→静置→橘皮精油,②正确;提取玫瑰精油的操作流程是:鲜玫瑰花+清水→水蒸气蒸馏→油水混合物→分离油层→除水→玫瑰油,③正确。综上分析,②③正确。

7.橘皮精油的提取中,用压榨法得到压榨液,为了使橘皮油易于与水分离,还要分别加入两种物质,并调节pH至7~8,这两种物质是()

A.相当于橘皮质量0.25%的小苏打和0.25%的硫酸钠

B.相当于橘皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸钠

C.相当于橘皮质量5%的小苏打和0.25%的硫酸钠

D.相当于橘皮质量5%的小苏打和5%的硫酸钠

【答案】B

【解析】橘皮压榨时,为了使橘皮精油易于与水分离,还要分别加入相当于橘皮质量的0.25%的NaHCO3和5%Na2SO4,并调节pH至7-8,故选:B。

8.已知天然胡萝卜素是防癌抗癌食品、保健品和药品。胡萝卜素化学性质较稳定,可以用来治疗某些疾病。有关胡萝卜素及提取的叙述不正确的是

A.根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为a、β、γ三类

B.一分子β-胡萝卜素将被水解成两分子的维生素A

C.石油醚是萃取胡萝卜素的良好溶剂,水浴加热可以提高萃取效率

D.实验结果将需要对提取的胡萝卜素粗品与标准样品纸层析比较

【答案】B

【解析】胡萝卜素中含多个碳双键,根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为a、β、γ三类,A正确;一分子β-胡萝卜素在人或动物的小肠或肝脏等器官中被氧化成两分子的维生素A,B错误;石油醚沸点高,是萃取胡萝卜素的良好有机溶剂,水浴加热可以提高萃取效率,C正确;为了鉴定实验结果萃取的粗品中胡萝卜素,需要将提取的粗品与标准样品用纸层析法比较,D正确.

9.下图是提取玫瑰精油的实验流程示意图。有关叙述正确的是

A.芳香油具有很强的挥发性,只有动物和植物可以产生芳香化合物

B.图①过程采用的是压榨法提取玫瑰精油,原因是玫瑰精油挥发性强

C.玫瑰精油是制作高级香水的主要成分,能使人产生愉悦感

D.图中②、③的操作依次是加入柠檬酸钠、无水Na2SO4

【答案】C

【解析】芳香油主要来源于植物,具有很强的挥发性,A错误;图①过程采用的是蒸馏法提取玫瑰精油,原因是玫瑰精油挥发性强,B错误;玫瑰精油是制作高级香水的主要成分,能使人产生愉悦感,C正确;图中②、③的操作依次是加入氯化钠、无水Na2SO4,目的分别是利于油水分层、除去残留的水分,D错。

10.下列表格中,为达到相应实验目的所采用的实验方法,错误的是

A.A B.B C.C D.D

【答案】B

【解析】用鲜玫瑰花通过水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油;用橘皮通过压榨法提取橘皮精油;用胡萝卜通过有机溶剂萃取法提取胡萝卜素;测定蛋白质的分子量通过SDS—聚丙烯酰氨凝胶电泳。综上所述,B错误。

11.过滤是生物实验中经常用到的一种方法,下列相关叙述错误的是

A.血红蛋白样品处理时要用滤纸过滤,目的是除去脂溶性沉淀层

B.橘皮压榨液第一次用普通布袋过滤,目的是除去固体物和残渣

C.橘皮压榨液第二次用单层尼龙布过滤,目的是除去固体Na2SO4

D.胡萝卜素在萃取后要进行过滤,目的是除去萃取液中的不溶物

【答案】C

【解析】血红蛋白样品处理时要用滤纸过滤,目的是除去脂溶性沉淀层,A正确;橘皮压榨液第一次用普通布袋过滤除去固体物和残渣,然后离心进一步除去质量较小的残留固体物,B正确;橘皮压榨液第二次用分液漏斗过滤,目的是除去固体Na2SO4,C错误;

胡萝卜素在萃取后要进行过滤,目的是除去萃取液中的不溶物,D正确。

12.下列有关实验操作流程的表述中,步骤不完善的是

A.制作果醋:挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵→果醋

B.制作腐乳:让豆腐长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制→腐乳

C.提取玫瑰精油:鲜玫瑰花→水蒸气蒸馏→油水混合物→分离油层→玫瑰油

D.提取胡萝卜素:胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素

【答案】C

【解析】通过果酒发酵制作果醋的步骤:挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵→果醋,A正确;腐乳的制作流程为:让豆腐长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制→腐乳,B正确;提取玫瑰精油:鲜玫瑰花+水→油水混合物→水蒸气蒸馏→分离油层→除水→玫瑰油,C错误;提取胡萝卜素的实验流程:胡萝卜→粉碎→干燥→萃取

→过滤→浓缩→胡萝卜素,D正确。

13.胡萝卜素可用于治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病,下图是提取胡萝卜素的实验流程示意图,相关说法正确的是

→→→→→→

A.图中干燥处理时的温度越高、时间越长越利于胡萝卜素提取

B.图中甲过程表示萃取,此过程用到的有机溶剂具有较低的沸点

C.图中乙过程表示浓缩,浓缩之前进行过滤的目的是除去萃取液中的不溶物

D.只能从植物中提取天然β-胡萝卜素

【答案】C

【解析】新鲜胡萝卜含大量水分,提取时应干燥,但要控制干燥时间和温度,若温度太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解,A错误;图中甲是萃取,所用萃取剂应具有较高的溶点,并能充分溶解胡萝卜素,B错误;图中乙过程表示浓缩,在此之前进行过滤的目的是除去萃取液中的不溶物,C正确;胡萝卜素的提取方法有三种:一是从植物中提取,二是从岩藻中获得,三是利用微生物发酵生产,D错误。

14.对于蒸馏法、萃取法、压榨法来提取芳香油各自的适用范围的叙述,正确的一项是A.玫瑰油、薄荷油、熏衣草油等芳香油主要通过压榨法获得

B.压榨法适用于范围广,要求原料的颗粒要尽可能细小,能充分浸泡在有机溶液中C.萃取法适用于提取柑橘、柠檬等易焦糊的原料

D.蒸馏法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油

【答案】D

【解析】玫瑰油、薄荷油、熏衣草油等芳香油易挥发,主要通过水蒸气蒸馏法获得,A 错误;压榨法适用于适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取,B错误;萃取法适用范围广,要求原料的颗粒要尽可能细小,能充分浸泡在有机溶剂中,C错误;蒸馏法利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来,适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油,D正确。

15.下列有关植物有效成分提取的说法正确的是

A.乙醇和丙酮虽然都是有机溶剂,但因其可与水混溶,所以不能用于胡萝卜素的萃取B.在高温下延长蒸馏时间,有利于充分提取玫瑰精油

C.对提取出的胡萝卜素进行纸层析鉴定时,可用最小号的滴管吸取少量的样品进行点样

D.提取橘皮精油的实验中,用石灰水浸泡的目的是使橘皮油易于与水分离

【答案】A

【解析】乙醇和丙酮虽然都是有机溶剂,但因其可与水混溶而影响萃取效果,所以不能用于胡萝卜素的萃取,A正确;如果蒸馏温度太高,时间太短,会导致产品的品质比较差,为了提高产品的品质,就需要严格控制蒸馏温度,适当延长蒸馏时间,B错误;对提取出的胡萝卜素进行纸层析鉴定时,为保证色素经过纸层析后,色素点清晰,易于鉴别和区分,点样时圆点要尽量细小,所以应选用最细注射器的针头,吸取少量的样品进行点样,C错误;提取橘皮精油的实验中,用石灰水浸泡的目的是破坏细胞结构,分解果胶,防止橘皮压榨时滑脱,提高出油率,D错误。

16.制取橘皮精油的过程,需先后进行A,B两次过滤,则橘皮精油为()

A.经过A后高速离心处理的上清液和B后的滤液

B.经过A和B后的滤液

C.经过B后的滤液

D.经过A后的滤液

【答案】A

【解析】提取橘皮精油时,为了提高出油率,首先将橘皮去水干燥,然后用石灰水浸泡,经漂洗、压榨得到压榨液后,用布袋过滤除去固体物和残渣(第一次过滤,即A过滤),对滤液进行离心进一步除去较小的残留固体物,再用分液漏斗或吸管将上层的橘皮精油分离出来,然后在5℃~10℃下静置5~7天,使果蜡等杂质沉淀,用吸管吸出上层澄清橘皮油,其余部分滤纸过滤(第二次过滤,即B过滤),滤液与吸出的上层橘油合并后成为最终的橘皮精油,即橘皮精油是经过A过滤后静置处理的上清液和B过滤后的滤液.故选A。

17.有关植物芳香油的提取方法,叙述正确的是

①植物芳香油具有较强的挥发性,能随水蒸气蒸发,因此可利用蒸馏法提取之②压榨法是利用机械压力榨出芳香油③将新鲜的植物材料浸泡在用于萃取的有机溶剂中,然后蒸去溶剂,即可获得植物芳香油,此为萃取法④吸香法利用的是油脂可以吸附油类的原理,此法采用的脂肪一般都含有猪油和牛油的成分

⑤浸泡法的原理与吸香法类似,但采用的是液体的油脂

A.①②③B.①③④C.①②③④D.①②③④⑤【答案】D

【解析】①植物芳香油具有较强的挥发性,可以用水蒸气蒸馏法提取,即利用水蒸气将挥发性强的植物芳香油携带出来,形成油水混合物,冷却后,混合物又会重新分离出油层和水层,①正确;②压榨法的原理是通过机械加压后,压榨出果皮中的芳香油,②正确;③萃取法是将新鲜的植物材料浸泡在用于萃取的有机溶剂中,然后蒸去溶剂,获得

植物芳香油,③正确;④吸香法又称脂吸法,原理是利用油脂可以吸附油剂的物理性质来提炼芳香油,一般选择猪油和牛油,④正确;⑤浸泡法的原理与吸香法类似,前者采用的是液体的油脂,⑤正确。综上所述,ABC不符合题意,D符合题意。故选D。18.橘皮精油提取操作中,应该注意的问题是

①橘皮在石灰水中浸泡时间为10小时以上②橘皮要浸透,压榨时才不会滑脱③压榨液的黏稠度要高,从而提高出油率④压榨时加入0.25%的小苏打和5%的硫酸钠

A.①②③B.②③④C.①②④D.①③④

【答案】C

【解析】橘皮在石灰水中浸泡时间为10小时以上,橘皮浸透,压榨时不易出现滑脱、出油率高,①②正确;③压榨液的黏稠度不能过高,否则会堵塞晒眼,③错误;④压榨时加入0.25%的小苏打和5%的硫酸钠,便于油水分离,④正确。综上所述,ABD不符合题意,C符合题意。故选C。

19.胡萝卜素可用于治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病。下图是提取胡萝卜素的实验流程示意图,相关说法正确的是:()

A.只能从植物中提取天然β-胡萝卜素,可用纸层析法进行鉴定

B.图中甲过程表示萃取,此过程用到的有机溶剂是水溶性有机溶剂

C.图中干燥处理时的温度越高、时间越长越利于胡萝卜素提取

D.图中乙过程表示浓缩,通过蒸馏除去滤液中易挥发的有机溶剂

【答案】D

【解析】提取天然胡萝卜素的方法主要有:一是从植物中提取;二是从大面积养殖的岩藻中获得;三是利用微生物的发酵生产,A错误;图中甲过程表示萃取,有机溶剂应具有较高熔点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶,B错误;图中干燥处理时的温度不能过高,否则会导致胡萝卜素分解,C错误;提取胡罗卜素的流程是:胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素,可见图中乙过程表示浓缩,通过蒸馏除去滤液中易挥发的有机溶剂,D正确。

20.组培苗在移栽前,一般需要炼苗,目的在于提高组培苗对外界环境条件的适应性。下图是不同炼苗方式组合对白兰地红枫组培苗移栽存活率的影响,以下叙述正确的是()

闭盖炼苗:T1=3d,T2=6d,T3=12d

开盖炼苗:t1=1d,t2=2d,t3=3d

不同炼苗方式组合(T+t)对白兰地

红枫移栽存活率的影响

A.炼苗初期应创设与室外环境相同的条件,促使组培苗适应环境

B.闭盖炼苗期间应控制的环境条件为:无菌、无光,并保持一定的湿度

C.白兰地红枫组培苗的最佳炼苗方式是闭盖锻炼6d后,再开盖炼苗3d

D.白兰地红枫组培苗的移栽存活率随着闭盖锻炼时间的增加先升高后降低

【答案】D

【解析】炼苗开始数天内,应和培养时的环境条件相似;炼苗后期,则要与预计的栽培条件相似,从而达到逐步适应的目的,A错误;组织培养期间需要无菌操作,长成幼苗后不需要无菌的环境条件了,B错误;分析题图可知白兰地红枫组培苗的最佳炼苗方式是闭盖锻炼6d后,再开盖炼苗2d,C错误;分析题图,白兰地红枫组培苗的移栽存活率随着闭盖锻炼时间的增加先升高后降低,D正确。

21.下列关于植物组织培养的叙述,正确的是()

A.需要对外植体进行严格的灭菌处理,以防止杂菌污染

B.在培养过程中需要给予适宜的光照,以诱导脱分化过程

C.培养基中所添加的激素种类和含量对培养过程起重要的调节作用

D.若制备人工种子,外植体只需培养成愈伤组织即可

【答案】C

【解析】植物组织培养需要对外植体进行严格的消毒处理,以防止杂菌污染,A项错误;在培养过程中需要给予避光条件下培养,以诱导脱分化过程,B项错误;培养基中所添加的激素种类和含量对培养过程起重要的调节作用,C项正确;若制备人工种子,外植体需培养到胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等,D项错误。

22.某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植,可应用多种技术获得大量优质苗,下列技术中不能选用的是

A.利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗

B.采用花粉粒组织培养获得单倍体苗

C.采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上

D.采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养

【答案】B

【解析】A项可以,即进行扦插繁殖;B项不能,花粉粒培养得到的是单倍体,单倍体生长瘦弱,可能会影响观赏品质;C项可以,即嫁接繁殖;D项可以,即微型繁殖。23.下列关于植物组织培养的叙述中,错误的是()

A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压

B.培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化

C.离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织

D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同

【答案】D

【解析】利用花药细胞培养得到单倍体植株,利用一般体细胞培养获得二倍植株,它们基因型不同。

24.科研人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响,结果如图。相关叙述错误的是

A.培育脱毒苗所依据的原理有基因突变和细胞全能性

B.培育脱毒苗的过程中涉及脱分化和再分化两个阶段

C.实验结果表明茎尖越小脱毒率越高,成苗率越低

D.根据本实验,培养脱毒苗时茎尖的适宜大小为0.27mm

【答案】A

【解析】马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒,因此可利用马铃薯茎尖进行组织培养形成脱毒苗,所依据的原理是细胞全能性,A错误;培育脱毒苗的过程中涉及脱分化和再分化两个阶段,B正确;由图可知,茎尖越小,脱毒率越高,成苗率越低,C正确;在茎尖外植体大小为0.27mm时,脱毒率和成苗率均较高,因此马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm,D正确。

25.下列关于一些实验试剂的选择及使用的叙述,正确的是

A.用健那绿染液染色线粒体时,需用盐酸处理人的口腔上皮细胞

B.可将酸性重铬酸钾加入酵母菌培养液,以检测生成的呼吸产物

C.观察低温诱导植物染色体数目变化时,可用龙胆紫染色染色体

D.在菊花组织培养中,可用酒精和氯化汞溶液对外植体进行灭菌

【答案】C

【解析】健那绿给线粒体染色,需要保持细胞的活性,不能用盐酸处理,A错误;在酸性重铬酸钾溶液中,酵母菌会死亡,B错误;龙胆紫染液可用于染色体染色,C正确;在菊花组织培养中,可用酒精和氯化汞溶液对外植体进行消毒,D错误。

26.下图是探究诱导植物根愈伤组织分化因素的实验示意图,据图判断下列说法错误的是( )

A.实验①中生长素可以渗入根的愈伤组织

B.本实验体现了对照原则和单一变量原则

C.根愈伤组织分化是由实验①中根产生的“某物质”直接诱导

D.实验②④分别排除了玻璃纸和琼脂块对实验的干扰

【答案】C

【解析】实验①中用玻璃纸阻挡幼芽,目的是不让幼芽与根愈伤组织直接接触,但幼芽产生的生长素可透过玻璃纸渗入根愈伤组织,A正确;本实验体现了对照原则和单一变量原则,B正确;根愈伤组织分化是由实验①中幼芽产生的“某物质”直接诱导,C错误;实验②排除了玻璃纸对实验的干扰,实验④排除了琼脂块对实验的干扰,D正确。

27.将菊花外植体接种到MS培养基中,可以培育出菊花试管苗。下列叙述正确的是A.配制MS培养基母液时,大量元素一般浓缩100倍

B.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养,同时调节渗透压

C.培养基中生长素与细胞分裂素的比值低时,有利于根的形成

D.长出丛芽和生根的过程中菊花组织细胞的遗传物质要发生改变

【答案】B

【解析】配制母液时,无机物中大量元素浓缩10倍,微量元素浓缩100倍,A错误;植物组织培养时在培养基中添加蔗糖的目的是为了提供营养和调节渗透压,B正确;生长素与细胞分裂素的用量比值高,有利于根的形,C错误;长出丛芽和生根的过程是细胞分化的结果,菊花组织细胞的遗传物质没有发生改变,D错误。

28.下列有关月季花药培养的叙述,正确的是

①月季花粉是由花粉母细胞经过减数分裂而形成的单倍体生殖细胞

②被子植物花粉形成过程中的四分体与高等动物精子形成过程中的四分体概念相同

③被子植物一个小孢子母细胞经过分裂最终共形成了8个精子

④任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织成胚状体

⑤花药培养初期不需要光照,幼小植株形成后才需要光照

A.①③④B.②④⑤C.①③⑤D.①④⑤

【答案】C

【解析】月季花粉是由花粉母细胞经过减数分裂形成的花粉粒进行有丝分裂形成的单倍体生殖细胞,①正确;被子植物花粉形成过程中的四分体是四个细胞连在一起,高等动物精子形成过程中的四分体是一对同源染色体含有四个染色单体,②错误;被子植物一个小孢子母细胞经过减数分裂形成4个花粉粒,再经有丝分裂最终共形成了8个精子,③正确;不同时期的花粉发育的能力是不同的,植物的花粉都只有某一时期对离体刺激敏感,④错误;在花药培养初期不需要光照,而幼小植株形成后需要光照进行光合作用,⑤正确。所以,①③⑤正确,故选C。

29.下列对于相关实验共性的叙述,错误的是

A.“分离绿叶中的色素”和“胡萝卜素粗品的鉴定”都要用到纸层析法

B.“分离土壤中分解尿素的细菌”和“菊花的组织培养”都要使用琼脂

C.“果酒制作”和“探究酵母菌细胞呼吸方式”都用重铬酸钾检测酒精

D.“分离纯化大肠杆菌”和“分离纯化血红蛋白”都要使用差速离心法

【答案】D

【解析】分离绿叶中的色素的方法为纸层析法,利用萃取法提取的胡萝卜素粗品,对其进行鉴定也采用的是纸层析法, A项正确;分离土壤中分解尿素的细菌和菊花的组织培养的培养基都属于固体培养基,在配制过程中都要使用琼脂,B项正确;果酒的制作所选用的菌种为酵母菌,其原理是:酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,大量繁殖,在无氧条件下进行酒精发酵,而在酸性条件下,橙色的重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色,所以“果酒制作”和“探究酵母菌细胞呼吸方式”都用重铬酸钾检测酒精,C项正确;“分离纯化大肠杆菌”时常用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种培养,没有使用差速离心法,“分离纯化血红蛋白”时可使用差速离心法,D项错误。

30.下列相关生物技术的实验操作,能达到相应实验目的的是

A.将新鲜胡萝卜烘干后萃取,可提高胡萝卜素的提取效率

B.向发酵瓶中持续通入空气,可提高酿制果酒的产酒效率

C.向培养基中添加蛋白胨,可提高分解尿素细菌的筛选效率

D.增加菊花愈伤组织培养基中2,4-D 浓度,可提高芽的诱导效率

【答案】A

【解析】将新鲜胡萝卜烘干(和粉碎)后萃取,可提高胡萝卜素的提取效率,A项正确;向发酵瓶中持续通入空气,会抑制酵母菌的无氧呼吸,会降低酿制果酒的产酒效率,B项错误;筛选分解尿素的细菌,应以尿素为唯一碳源和氮源,C项错误;增加菊花愈伤组织培养基中2,4-D 浓度,可提高根的诱导效率,反之提高芽的诱导率,D项错误。

二、非选择题

1.β-胡萝卜素是一种对人体有益的天然色素类食品添加剂,被广泛地用作食品、饮料、饲料的添加剂。下图表示从产胡萝卜素的酵母菌菌体或胡萝卜中提取、获得胡萝卜素的操作流程。请回答下列问题:

(1)在发酵罐内培养酵母菌R时,向培养基中添加玉米粉和豆饼的目的主要是为微生物的生长提供________________。培养过程中,除了控制好温度等条件外,还要适时通入无菌空气,其目的是______________________________________________。

(2)上图中A过程是_____________,该过程应控制好温度和处理时间,其目的是________。萃取过程所用的有机溶剂都是易燃物,若直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸,所以该过程宜采用的加热方式是________________________________________。

(3)图中B过程表示_____________,其目的是___________________________________。

(4)除了采用上述方法外,还可采用酶解法来提取胡萝卜素,此时,应该将胡萝卜制成胡萝卜泥,然后加入适量且温度相同的_________反应一段时间,以达到去除细胞壁的目的。

【答案】碳源和氢源促进酵母菌R大量繁殖干燥防止胡萝卜素分解水浴加热过滤除去萃取液中的不溶物纤维素酶和果胶酶

【解析】(1)微生物酵母菌的培养要提供生物所需的水、无机盐、碳源、氮源和生长因子,向培养基中添加玉米粉和豆饼是为微生物的生长提供碳源和氮源;培养过程中,要适时通入无菌空气的目的是使菌体处于有氧呼吸状态,有利于酵母菌R快速大量繁殖。(2)胡萝卜粉碎之后,使用萃取法提取胡萝卜素之前,必须对胡萝卜样品进行干燥处理,为保证胡萝卜素不被破坏,要注意温度和时间,以防止胡萝卜素分解;由于胡萝卜素是脂溶性植物色素,一般不溶于水,易溶于酒精、乙醚和氯仿等有机溶剂,所以常用有机溶剂萃取胡萝卜素,有机溶剂用明火直接加热容易引起燃烧、爆炸所以要采用水浴加热。

(3)图中B过程是对实验材料萃取后,要进行的是过滤处理,可以去除萃取液中的不溶物,便于后续对色素的提取。

(4)植物细胞细胞壁的的成分为纤维素和果胶,因此加入纤维素酶和果胶酶有利于去除细胞壁。

2.番茄中的番茄红素和胡萝卜中的β-胡萝卜素都属于类胡萝卜素,两种色素都具有很强的抗氧化能力,在生活和生产中得到广泛应用;固定化酶技术在农副产品加工中也起到重要作用。回答下列问题。

(1)从番茄中提取番茄红素常用萃取法,提取的效率主要取决于__________;提取过程应采用水浴加热,在加热瓶口还要加_______装置,以防止加热时有机溶剂挥发。胡萝卜中的胡萝卜素也可用萃取法提取,原因是__________________________。

(2)工业生产上,常利用微生物发酵的方法提取天然β-胡萝卜素。已知红酵母细胞内的[H]可将无色的TTC还原为红色复合物,且菌体细胞内[H]含量越高,还原能力越强,胡萝卜素合成能力也越强。欲从红色淤泥中筛选出能合成β-胡萝卜素的红酵母菌株,首先将红色淤泥制成菌液,涂布到含TTC的培养基上,挑选出___________菌落,然后通过_________法进行分离纯化。

(3)工业生产番茄汁时,常常利用果胶酶以提高出汁率,原因是果胶酶能瓦解________和胞间层。为了反复利用果胶酶,适宜采用______法进行固定化,并通过检测固定化果胶酶的_______确定其应用价值。

【答案】提取剂的性质和使用量冷凝回流胡萝卜素易溶于有机溶剂红色平板划线细胞壁化学结合和物理吸附法酶活性(或酶活力)

【解析】(1)从番茄中提取番茄红素常用萃取法,提取的效率主要取决于提取剂的性质和使用量,同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。提取过程应采用水浴加热,在加热瓶口还要加冷凝回流装置(冷凝管),以防止加热时有机溶剂挥发。胡萝卜中的胡萝卜素也可用萃取法提取,原因是胡萝卜素易溶于有机溶剂。

(2)由题干可知,红酵母细胞内的[H]可将无色的TTC还原为红色复合物,且菌体细胞内[H]含量越高,还原能力越强,胡萝卜素合成能力也越强。因此欲从红色淤泥中筛选出能合成β-胡萝卜素的红酵母菌株,首先将红色淤泥制成菌液,涂布到含TTC的培养基上,挑选出红色菌落,然后通过平板划线法进行分离纯化。

(3)工业生产番茄汁时,常常利用果胶酶以提高出汁率,原因是果胶酶能瓦解细胞壁和胞间层。为了反复利用果胶酶,适宜采用化学结合和物理吸附法法进行固定化,并通过检测固定化果胶酶的酶活性(或酶活力)确定其应用价值。

3.研究人员采用水蒸气蒸馏法和石油醚萃取法提取玫瑰精油,并测定玫瑰精油的抑菌

活性。请回答下列问题:

(1)玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取,其原理是玫瑰精油具有_______________的性质。

(2)石油醚适宜作玫瑰精油萃取剂的原因是__________________________。为提高萃

取效率,萃取前对玫瑰花瓣进行的处理是___________________。

(3)研究人员采用琼脂扩散法测定玫瑰精油的抑菌活性。操作步骤如下:

①用打孔器将滤纸制成直径为 6.0 mm 的小圆纸片,并进行_________灭菌处理;

②制备LB培养基(适合细菌生长)平板,利用___________将3 种供试细菌分别接种

到平板上,制成含菌平板;

③将灭菌的滤纸片分别放入__________________中浸泡10 min,然后将滤纸片放在含

菌平板表面,最后将平板放入____________中倒置培养24 h;

④通过测量________________来判断玫瑰精油对3 种供试细菌的抑菌活性。

【答案】易挥发、难溶于水、化学性质稳定玫瑰精油在石油醚中的溶解度高、石油醚沸点高、与水不混溶粉碎和干燥干热涂布器玫瑰精油和无菌生理盐水(或“无菌水”)恒温培养箱(或“恒温箱”)抑菌圈直径(或“透明圈直径”)【解析】(1)玫瑰精油化学性质稳定,难溶于水,易溶于有机溶剂,易挥发,能随水蒸气一同蒸馏,且不会导致原料焦糊和有效成分水解等,所以适合用水中蒸馏进行提取。(2)玫瑰精油在石油醚中的溶解度高,且石油醚沸点高、与水不混溶,因此石油醚适

宜作为玫瑰精油的萃取剂,萃取后可通过蒸馏获得玫瑰精油。萃取前对玫瑰花瓣进行粉碎、干燥处理,有利于玫瑰精油溶解于石油醚中。

(3)采用琼脂扩散法测定玫瑰精油的抑菌活性,可以进行有无玫瑰精油的对照实验。

将沾有玫瑰精油和无菌水的滤纸片置于接种细菌的培养皿上,观察抑菌圈的有无和大小。

①为保持滤纸的干燥,灭菌时应采用干热灭菌法,不宜采用高压蒸汽灭菌;

②根据实验思路,应采用涂布器将3 种供试细菌分别均匀接种到平板上,制成含菌平板;

③将灭菌的滤纸片分别放入玫瑰精油和无菌生理盐水(或“无菌水”)中浸泡10 min,

然后将滤纸片放在含菌平板表面,最后将平板放入恒温箱中中倒置培养24 h,防止培养皿盖上凝结的水珠滴落造成污染。

④根据测量抑菌圈直径(或“透明圈直径”)可判断玫瑰精油对3 种供试细菌的抑菌活性,抑菌圈越大,说明抑菌活性越强。

4.(1)实验室中提取胡萝卜素常选用胡萝卜作为材料。新鲜的胡萝卜含有大量的水分,

在干燥时要注意控制温度和时间,温度太高、时间太长会导致_________________。胡萝卜素萃取的效率主要取决于_____________和_________,同时还受原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。

(2)提取的胡萝卜素粗品进行鉴定时,待各种色素在滤纸上完全分开后,取出滤纸,让层析液自然挥发,观察提取样品在滤纸上的_____是否与标准样品相同(同一水平线上)。

(3)请根据血红蛋白的提取和分离流程图将实验流程补充完整:A为________,B为_____。在填充凝胶柱时,为了加速凝胶颗粒的膨胀,可以采用_____________的方法。

(4)凝胶色谱法是根据______________________________________的有效方法。

【答案】胡萝卜素分解萃取剂的性质使用量(最前沿的)层析带血红蛋白的释放样品的加入和洗脱沸水浴加热相对分子质量的大小分离蛋白

【解析】(1)新鲜的胡萝卜含有大量的水分,在干燥时要注意控制温度和时间,温度太高、时间太长会导致胡萝卜素分解,胡萝卜素萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和用量,同时还受原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。(2)提取的胡萝卜素粗品通过纸层析法进行鉴定,等各种色素在滤纸上完全分开后,取出滤纸,让层析液自然挥发,观察提取样品在滤纸上的层析带是否与标准样品相同。(3)血红蛋白的提取和分离实验中样品处理过程为:红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析,所以A表示血红蛋白的释放,B表示样品的加入和洗脱。在填充凝胶柱时,为了加速凝胶颗粒的膨胀,可以采用沸水浴加热的方法。

(4)凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法;分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快;分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部,路程长,流动慢。

5.请回答下列与酶和物质提取有关的问题:

(1)某植物富含果胶、淀粉、蛋白质和纤维素成分。在用该材料提取过果胶和淀粉后的剩渣加工饮料工艺研究中,将剩渣制成的汁液经蛋白酶和纤维素酶彻底酶解处理后,发现仍存在浑浊和沉淀问题,为了解决这一问题,可在汁液中加入果胶酶和淀粉酶。而为了提高果胶酶的使用效率和产品纯度,一般需要将酶用______________________ 法进行固定化处理。

(2)用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时,用生理盐水洗涤红细胞,用___________破裂红细胞使血红蛋白得以释放,如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡,气泡会

__________________,降低分离效果。

(3)某植物的花中含有油性物质A、果肉中含有物质B。物质A是易挥发、难溶于水的无色物质;物质B是易溶于有机溶剂、不溶于水、不易挥发,受潮易分解的有色物质。

①根据题干信息判断,提取物质A不确定能否利用水中蒸馏法,原因是还需要确定水中蒸馏时是否会导致原料焦糊或者____________________。

②物质B可使用______法提取,提取物质B时应选用_____(填“干燥”或“新鲜”)的果肉。

③以上两种提取得到的植物芳香油,可通过_________法进行鉴定。

【答案】化学结合法或物理吸附法蒸馏水和甲苯搅乱蛋白质的洗脱次序有效成分水解萃取干燥纸层析

【解析】(1)将酶固定化可提高果胶酶的使用效率和产品纯度,由于酶分子很小,容易从包埋材料中漏出,所以常用化学结合法或物理吸附法固定酶。

(2)用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时,用生理盐水洗涤红细胞去除杂蛋白,用蒸馏水和40%体积的甲苯破裂红细胞,可使血红蛋白得以释放。如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡,气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。

(3)①由于水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题,所以有些原料不适合用水中蒸馏提取芳香油。而物质A是易挥发、难溶于水的无色物质,所以提取物质A不确定能否利用水中蒸馏法,原因是还需要确定水中蒸馏时是否会导致原料焦糊或者有效成分水解。

②物质B是易溶于有机溶剂、不溶于水、不易挥发,受潮易分解的有色物质,所以可用萃取法提取,提取物质B时应选用干燥的果肉。

③不同物质在层析液中的溶解度不同,可通过层析结果区分,所以鉴定芳香油的纯度可用纸层析法。

6.生物技术拥有巨大的发展空间,给人们的生活带来了深刻的变化。某兴趣小组翻阅资料发现橙皮精油和乳酸菌素都具有抑菌的效果,如图为制备橙皮精油和乳酸菌素的流程及其抑菌实验结果,回答下列问题:

(1)筛选乳酸菌A时,所用培养基需经________法进行灭菌。将某种细菌接种到培养基上并形成菌膜,最可能采用的接种方法是____________。

(2)图中,橙皮精油或乳酸菌素接种在培养基上________所在的位置。

(3)橙子的果肉可用于制备果酒和果醋。为监测发酵状况,可用________________法对发酵菌种进行计数,一段时间后统计结果分析可发现,培养液中的菌种种群数量的增长曲线变化规律是种群数量经过一定时间的增长后,趋于稳定。

(4)用蒸馏法提取玫瑰精油时,如果想提取较高品质的产品,对温度和时间的要求是

____________________。

(5)果胶酶是分解果胶的酶的总称,包括______________、果胶分解酶和果胶酯酶。

(6)凝胶色谱法是根据_____________________________分离蛋白质的有效方法。“血红蛋白的释放”步骤中,在______________的作用下,红细胞破裂,释放出血红蛋白。

【答案】高压蒸汽灭菌稀释涂布平板法透明圈显微镜直接计数法(抽样检测)温度不宜过高,适当延长时间多聚半乳糖醛酸酶相对分子质量大小蒸馏水和甲苯

【解析】(1)培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法,图中进行抑菌实验时,接种的方法最可能是稀释涂布平板法。

(2)图中进行抑菌实验时,最终可通过测量透明圈的直径(或大小)来比较橙皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

(3)检测培养液中的菌种种群数量的变化可以采用抽样检测法,对发酵菌种进行计数,一段时间后统计结果分析可发现,培养液中的菌种种群数量的增长曲线变化规律是种群数量经过一定时间的增长后,趋于稳定,呈现S型曲线。

(4)用蒸馏法提取玫瑰精油时,由于水中蒸馏有时会导致原料焦糊,如果想提取较高品质的产品,蒸馏时温度不宜过高,并且适当延长时间。

(5)果胶酶是分解果胶的酶的总称,包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。

(6)凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。“血红蛋白的释放”步骤中,在蒸馏水和甲苯的作用下,红细胞破裂,释放出血红蛋白。

7.请回答下列关于植物芳香油提取的相关问题:

(1)被誉为香料工业中的“液体黄金”的玫瑰油具有__________________ 以及能随水蒸气一同蒸馏的特点,所以一般采用水蒸气蒸馏法提取,该方法可使用图1中的_____(填字母)装置。

(2)工业生产上,提取天然β-胡萝卜素的方法主要有三种,一种是从植物中获取,二是____,二是利用微生物发酵生产。按照“胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素”流程_____(填“能”或“不能”)得到纯净的β-胡萝卜素,理由是___________(不考虑杂质)。

(3)提取柠檬精油的步骤如图2所示。提取该精油不采取水蒸气蒸馏法的原因是

___________;甲过程需用到石灰水,其作用是___________。乙过程一般加入相当于柠檬果皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸钠,其目的是___________。

【答案】化学性质稳定,难溶于水,易溶于有机溶剂 A 从大面积养殖的岩藻中获得不能获得的胡萝卜素中除β-胡萝卜素外还有其他类型的胡萝卜素会发生部分有效成分水解破坏细胞结构,分解果胶,防止压榨时果皮滑脱,提高出油率为了使柠檬油易与水分离

【解析】(1)玫瑰油具有化学性质稳定,难溶于水,易溶于有机溶剂以及能随水蒸气一同蒸馏的特点,所以一般采用水蒸气蒸馏法提取;根据蒸馏过程中原料放置的位置的标准,将水蒸气蒸馏法划分为水中蒸馏、水上蒸馏和水气蒸馏等,该方法可使用图1中的A装置。

(2)工业生产上,提取天然β-胡萝卜素的方法主要有三种,一种是从植物中获取,二是从大面积养殖的岩藻中获得,三是利用微生物发酵生产。按照“胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素”流程获得的胡萝卜素中除β-胡萝卜素外还有其他类型的胡萝卜素,即不能得到纯净的β-胡萝卜素。

(3)从柠檬皮中提取柠檬油若采用水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分部分水解的问题,所以提取柠檬油不采取水中蒸馏法而常采用压榨法进行提取。甲过程需用到石灰水,

其可以破坏细胞结构,分解果胶,防止压榨时果皮滑脱,提高出油率。乙过程一般加入相当于柠檬果皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸钠,其目的是为了使柠檬油易与水分离。

8.金合欢油有独特的香气,常用于高级香料的制作。下图是提取金合欢油的装置示意图,请回答下列问题:

(1)植物芳香油的具体提取方法要根据____来决定,例如用图示水中蒸馏的方法提取金合欢油时,除了考虑金合欢油的挥发性外,还需要考虑该方法是否会导致____等问题。(2)向乳浊液中加入氯化钠的目的是________,得到的金合欢油中有少量的水分,常用____除水。当原料量等其他条件一定时,精油提取量随蒸馏时间的变化趋势是

________

(3)密封不严密的瓶装金合欢油在保存时,最好放在温度____(填“较低”或“较高”)的地方,目的是________

【答案】植物原料的特点原料焦糊和有效成分水解氯化钠能使水和油分层,以利于水、油分离无水Na2SO4在一定的时间内提取量随蒸馏时间的延长而增加,一定时间后提取量不再增加较低减少精油挥发

【解析】(1)不同的芳香油提取的方法不同,由植物原料的特点确定其提取方法,如水中蒸馏的方法提取金合欢油时,除了考虑金合欢油的挥发性外,还需要考虑该方法是否会导致原料焦糊和有效成分水解等问题。

(2)向乳浊液中加入氯化钠,能使水和油分层,以利于水、油分离,再加入无水Na2SO4可以除去其中的水分;当原料量等其他条件一定时,在一定的时间内精油提取量随蒸馏时间的延长而增加,一定时间后提取量则不再增加。

(3)金合欢油具有挥发性,在密封不严密的瓶装金合欢油在保存时,为了减少精油挥发,最好放在温度较低的地方。

9.花青素是一类广泛存在于植物细胞中的天然色素,易溶于甲醇等有机溶剂中,在中性或碱性溶液中不稳定,在60℃以下的热稳定性较好。花青素的提取流程如下图所示,回答下列问题:

植物组织培养实验基本步骤。。

植物组织培养实验基本步骤 一、母液的配置 1、MS大量元素母液的配制 将大量元素配制成10倍的母液,使用时再稀释10倍。按照配方表中用量依次分别称取扩大10倍的:NH4NO3 、KNO3 、KH2PO4 、 MgSO4·7H2O 、CaCl2·2H2O ,所有药品称取完毕后用蒸馏水逐个溶解,待全部溶解后,最后定容至500ml,转入500ml细口试剂瓶中,贴上标签,注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名,置于4℃冰箱中保存备用。 2、MS微量元素母液的配制 将微量元素配制成100倍的母液,使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别依次称取:MnSO4· 4H2O 、ZnSO4·7H2O 、 H3BO3 、KI 、CuSO4·5H2O 、CoCl2·6H2O ,用蒸馏水逐个溶解,待全部溶解后,用容量瓶定容至500ml,转入500ml细口试剂瓶中,贴上标签,注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名,置于4℃冰箱中保存备用。 3、MS铁盐母液配制 将铁盐配制成100倍的母液,使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的:称

FeSO4·7H2O 和Na2·EDTA ,把FeSO4·7H2O和Na2·EDTA·2H2O分别置于200ml蒸馏水中,加热并不断搅拌使之溶解(磁力搅拌器,边加热,边搅拌)。保持加热,把FeSO4溶液慢慢倒入Na2·EDTA溶液中并不断搅拌,接近沸腾时停止加热,待溶液冷却后加蒸馏水到最终容积500ml,置于棕色细口瓶中,用力振荡1~2min,贴上标签,注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名。在室温下避光保存一段时间令其充分反应后,再置于4℃冰箱中保存备用。 4、MS有机化合物母液的配制 将有机化合物配制成100倍的母液,使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的:肌醇、维生素B1 、烟酸、甘氨酸、维生素B6 、蔗糖,用蒸馏水依次溶解并定容至500ml后,转入500ml 细口试剂瓶中,贴上标签,注明母液名称、配制日期、配制人姓名,置于4℃冰箱中保存备用。 二、植物激素的配置 常见激素:二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、吲哚乙酸(IAA)、吲哚-3-丁酸(IBA)、激动素(6-糠氨基嘌呤、 KT)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、赤霉素(GA3)、 1、生长素类: (1)、生长素类在组织培养中的主要作用是:诱导细胞的分裂和根的分化,诱导愈伤组织

植物组织培养的基本步骤

植物组织培养的基本步骤 成熟细胞离体——(脱分化)——分生细胞——(分裂)——愈伤组织——(再分化)——形态建成————完整植株。 培养基的主要成分 【水分】 【无机盐】1.大量元素:N,P,K,Ca,Mg,S(由相关的无机盐提供) 2.微量元素:Fe,B,Cu,Mn,Mn,Zn,Co 【有机营养成分】1.糖类 2.维生素 3.氨基酸 4.肌醇 5.天然有机物【植物生长调节剂】1.生长素 2.细胞分裂素 3.其他生长调节剂 【凝固剂】琼脂 【其他物质】1.活性炭 2.抗生素 3.抗氧化物质 4.硝酸银 培养基和组织培养用具的灭菌方式 【培养基,无菌水】高压蒸汽灭菌,0.105MPa灭菌15~30分钟 【移栽基质】曝晒,甲醛熏蒸或高压蒸汽灭菌0.14MMPa灭菌1~2h 【接种室,缓冲室】紫外线灯照射30min,或气雾消毒剂 【超净工作台】紫外线灯30min,之后打开风机过滤除菌 【外植体】不同的化学消毒剂浸泡消毒 【接种工具】70%乙醇浸泡或擦拭,之后用火焰灼烧灭菌 【培养室】3%来苏尔喷雾,或甲醛,气雾消毒熏蒸 【皮肤】先用肥皂洗手,接种前用70%乙醇擦拭 【瓶口,管口】70%乙醇擦拭,用火焰封口

【培养瓶表面】70%乙醇擦拭 【台面,桌面】70%乙醇擦拭或喷雾消毒 植物外植体的灭菌方式 【茎尖,茎段,叶片】1. 用70%乙醇浸泡30秒,再用无菌水冲洗1次。 2.用2%次氯酸钠浸泡15min或0.1%升汞浸泡5~10min。 3.若材料有绒毛,最好在消毒液中加入几滴吐温。 4.消毒时要不断震荡,使植物材料与消毒剂充分接触。 5.最后用无菌水冲洗3~5次。 【果实】1.用乙醇迅速漂洗一下,再用无菌水冲。 2.用2%次氯酸钠浸泡10min,用无菌水冲洗2~3次。 【种子】用10%次氯酸钠浸泡20~30min,或0.1%升汞消毒5~10min,然后再用无菌水冲洗3~5次。 【花蕾】1.用70%乙醇浸泡10~15秒,无菌水冲洗一次。 2.在漂白粉中浸泡10min,用无菌水冲洗2~3次。 【根及地下部器官】用0.1%升汞浸泡5~10min 或用次氯酸钠浸泡10~15min,再用无菌水冲洗3~5次。 【消毒后的外植体应及时按照无菌操作技术接种在适宜的培养基上】

植物组织培养技术及应用进展_盛玉婷

植物组织培养技术及应用进展 盛玉婷 (南京农业大学生命科学学院,江苏南京 210095) 摘 要:植物组织培养技术作为一种科研手段,发展异常迅猛。本文回顾了植物组织培养的基本原理、培养基、以及各种激素的作用机理和培养方法,简述了离体无性系快速繁殖与无毒化、植物育种、遗传物质的保存及植物次生代谢物的生产等组织培养技术在应用研究领域所获得的突破。 关键词:植物组织培养;植物激素;快繁;脱毒;转基因 中图分类号 Q944.6 文献标识码 A 文章编号 1007-7731(2008)09-45-03 A d v a n c e o f P l a n t T i s s u e C u l t u r e a n dI t s A p p l i c a t i o n S h e n g Y u t i n g (N a n j i n g a g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y,J i a n g s u N a n j i n g210095) A b s t r a c t:T i s s u e c u l t u r e,a s a w a y o f s c i e n c e r e s e a r c h,h a s d e v e l o p e dr a p i d l y.P l a n t t i s s u e c u l t u r ew a s w i d e l yu s e di n t h e c r o p b r e e d i n g,t a k i n g o f v i r u s,r e p r o d u c i n g q u i c k l y,p r e s e r v i n gg e n e t i c m a t e r i a l s,p r o d u c i n gs e c o n d a r y m e t a b o l i t e s a n di n t h e t r a n s f o r m a t i o n o f p l a n t g e n e.T h i s a r t i c l e m a i n l y i n t r o d u c e s t h e p r i n c i p l e a n d t h e a p p l i c a t i o n o f t i s s u e c u l t u r e i n c l u d i n g i t s c u l t u r e,m e t h o d,a n dt h e m e c h a n i s m. K e y w o r d s:P l a n t t i s s u e c u l t u r e;p h y t o h o r m o n e;i n t e r m e d i a t e p r o p a g a t i o n;d e t o x i c a t i o n;t r a n s g e n i c 自哈布兰特(G.H a b e r l a n d t)提出细胞全能性理论以来,在无数科学家的努力下,离体培养经过80多年的历程后,其培养技术日趋完善。20世纪50年代以来,植物组织培养发展十分迅速。利用组织培养,不仅可以生产大量的优良无性系,并可获得人类需要的多种代谢物质;细胞融合可打破种属间的界限,克服远缘杂交不亲和性障碍,在植物新品种的培育和种性改良中有着巨大的潜力;其植物细胞也成为在细胞水平上分析研究的理想材料。植物组织培养技术已渗透到植物生理学、病理学、遗传学、育种学以及生物化学等各个研究领域,成为生物学科中的重要研究技术和手段之一,并广泛应用于农业、林业、工业、医药业等多种行业,产生了巨大的经济效益和社会效益,已成为当代生物科学中最有生命力的一门学科[1]。 1 组织培养的基本原理 1.1 植物组织培养的概念 植物组织培养技术是指在无菌条件下,将离体的植物器官(如根尖、茎尖、叶、花、未成熟的果实、种子等)、组织(如形成层、花药组织、胚乳、皮层等)、细胞(如体细胞、生殖细胞等)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、原生质体培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱发产生愈伤组织或潜伏芽等,或长成完整的植株的技术[1]。 1.2 植物组织培养的依据 植物组织培养的依据是植物细胞“全能性”及植物的“再生作用”。1902年,德国著名植物学家G.H a b e r l a n c l t根据细胞学理论,大胆地提出了高等植物的器官和组织可以不断分割,直到单个细胞,即植物体细胞在适当的条件下具有不断分裂和繁殖,发育成完整植株的潜力的观点。1943年,美国人W h i t e在烟草愈伤组织培养中,偶然发现形成一个芽,证实了G.H a b e r l a n c l t的论点。在许多科学家的努力下,植物组织培养技术得到了迅速发展,其理论和方法趋于完善和成熟,并广泛应用产生了巨大的经济效益和社会效益。 1.3 培养基的选择 组织培养的基础培养基有M T、M S、S H、W h i t e等。由于不同植物所需要的生长条件有所不同,会对培养基做一些不同的处理,一般采用较多的是M S。组织培养采用固体培养基的较多,但只有在植物周围的营养物和激素被吸收,如果其他残留的培养基也能被利用,对工厂化生产的成本减少方面有很大的帮助。董雁等[2]利用回收转换后废弃的继代培养基,加入原继代培养基30%浓度母液的培养基,培养效果与原继代培养基的基本相同,说明继代培养基再利用是可行的,这为规模化组培育苗开辟了新的途径。杜勤[3]等在无外源激素条件下,研究液体和固体培养基对黄瓜子叶培养器官分化的影响,结果用液体培养基直接诱导花芽率更高,分化高峰期出现的时间也更早,说明液体培养基对外植体的生长更有利,只是固体培养基更易操作而被较广泛应用。 1.4 各种激素的作用机理 I A A能促进细胞壁的扩张和诱导纤维素酶的形成[5]。H a i l从燕麦芽鞘分离出原生质体,它可以保存在11%的蔗糖溶液中,若添加少量I A A,只需5m i n原生质体就会破裂。这是I A A首先作用于质膜的一个证据。当I A A直接同原生质膜结合时,引起膜构象和透性的变化,增加了离子流动,产生生物电位变化或一系列代谢变化,发生快速效应。 2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)诱导体细胞胚胎发生的作用机制是诱导一些特异蛋白质形成,2,4-D的浓度 作者简介:盛玉婷,南京农业大学生命科学学院本科在读。 收稿日期:2008-02-01

植物组培培养基的成分

植物组培培养基的成分 培养基是人工配制的,满足不同材料生长,繁殖或积累代谢产物的营养物质。在离体培养条件下,不同种类植物对营养的要求不同,甚至同一种植物不同部位的组织以及不同培养阶段对营养要求也不相同。筛选合适的培养基是植物组织培养极其重要的内容,是决定成败的关键因素之一。 大多数植物组织培养基的主要成分是无机营养物质(大量营养元素和微量营养元素)、碳源、有机添加物、植物生长调节剂和凝胶剂。一些组织可以生长在简单的培养基上,这些培养基只含无机盐和可利用的碳源(蔗糖),但大多数组织必须在培养基中添加维生素、氨基酸和生长物质,而且经常还将一些复合的营养物质加入到培养基中,这种由“化学定义”的化合物组成的培养基称为“合成”培养基。 人们已设计了许多培养基用于特殊组织和器官的培养。 怀特培养基是最早的植物组织培养基之一,最初作为根培养的培养基。为了诱导培养组织器官发生和再生植株,广泛使用含有大量无机盐成分的MS(Murashige和Skoog,1962)和LS(Linsmaier 和Skoog,1965)培养基。原本为细胞悬液或愈伤组织培养而设计的B5培养基,经过改良后,被证实有利于原生质体培养。同时,B5培养基也被用于诱导原生质体再生植株。尽管Nitshch(1969)为花药培养设计的培养基仍然使用频繁,但另一个称为N6的培养基,专门用于禾谷类花药培养和其他组织培养。类似的,N6培养基越来越多地

用于大豆、红三叶草和其他豆科植物的培养。该培养基营养成分促进胚性细胞和原生质体再生细胞快速生长。使用这些培养基成功的原因很可能是营养元素的比例和浓度基本上满足不同培养体系中细胞或组织生长和分化的最适需要。 植物组织培养基中无机和有机成分的浓度用质量浓度(mg/L 或ppm,但现在习惯用mg/L)或物质的量浓度(mol/L)表示。按照国际植物生理学协会的推荐,应该用mol/L表示大量营养元素和有机营养成分浓度,用μmol/L表示微量营养元素、激素、维生素和有机成分浓度。用物质的量浓度的优点是,每一种化合物每一摩尔的分子数是常数,所以按照特定培养基配方配制培养基时,无论无机盐化合物的水分子数为多少,原物质的量浓度都可以使用。但是,用质量浓度来表示浓度的话,就不能不考虑无机盐化合物的水分子数目了。 1、水分 水分是植物体的主要组成部分,也是一切代谢过程的介质和溶媒,在植物生命活动过程中不可缺少。配制培养基母液时要用蒸馏水或纯水,以保持母液及培养基成分的精确性,防止储藏过程中发霉变质。研究培养基配方时尽量用蒸馏水,以防成分的变化引起不良效果。而在大规模工厂化生产时,为了降低生产成本,常用自来水代替蒸馏水。如自来水中含有大量的钙、镁、氯和其他离子,最好将自来水煮沸,经过冷却沉淀后再使用。

植物组织培养技术

植物组织培养技术 植物组织培养是指将植物体的一部分接种在合成培养基上,使其按照预定目标生 长发育成新植株。近年来,花卉组织培养及快繁脱毒技术越来越多地应用于花卉种苗 繁殖生产中。 一、组织培养在花卉产业中的应用 1.快速、大量繁殖优良品种组织培养技术已成为种苗生产的主要技术之一。经组织 培养,可增加繁殖系数,加快繁殖速度,可生产出种性纯、品质好、产花量高的生产 性用苗。在花卉育种过程中,不断的杂交、选种极大地扩展了花卉的花形与颜色,使 得花卉在各方面都越来越接近人们的需求。但在同时,也造成了花卉基因类型的高度 异质化———子代不易有均一表现。而组培苗是在母株器官、组织或细胞的基础上发展起来的,可以保持母株的全部特性(花形、花色、株形、开花习性、抗逆性等), 因而可以根据需要来选择集多种优良性状于一体的植株加以分生,从而得到大量与母 株一模一样的植株。 2.培育脱毒苗木采用组织培养技术,利用植株的分生组织不易感染病毒的原理,可 以对花卉植株的分生组织进行组织培养来繁殖苗木,防止亲代植株的病害传递给子代,从而达到脱毒的目的。 病毒病对长期应用营养繁殖(分株、扦插等)的观赏植物及其生产的危害相当严重。由于观赏植物多采用营养繁殖,如嫁接、分株、压条等方法繁殖时,病毒(及类 病毒)则通过营养体及刀具、土壤传递给后代,大大加速了病毒病的传播与积累,导 致病毒病的危害越来越严重。据统计,观赏植物的病毒已多达100多种,并且逐年有 新增病毒的报道。观赏植物因病毒病大大影响其观赏价值,表现在康乃馨、菊花、百合、风信子等的鳞茎、球茎与宿根类花卉及兰科植物等严重退化,花少且小,花朵畸形、变色,大大影响观赏价值,严重者甚至导致某些品种的灭绝,严重制约观赏植物 生产的发展,这也是我国切花品种跨不出国门的原因之一。组培快繁技术已应用到蝴蝶兰的栽培中非洲菊也可以通过组培快繁技术进行繁殖 植物组织培养脱毒的原理主要是利用茎尖分生组织不带毒或少带毒。感病植株体内的病毒分布不均匀,其数量随植株部位和年龄而异,越靠近茎尖顶端的区域,病毒 的浓度也越低。分生区域无维管束,病毒只能通过胞间连丝传递,赶不上细胞不断分 裂和活跃的生长速度,因此生长点含有病毒的数量极少,几乎检测不出病毒。因此, 茎尖培养时,切取茎尖的大小对脱毒效果有很大影响,茎尖越小效果越佳,但太小时 不易成活,过大则不能保证完全除去病毒。不同种类的植物和不同种类的病毒在茎尖

植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告 Modified by JACK on the afternoon of December 26, 2020

院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术(师范)年级13级学号 姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成,掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法; 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项,了解接种室的灭菌方法; 4.了解组织培养的基本程序; 5.掌握接种的方法和材料的培养过程; 6.掌握无菌操作技术,包括外植体除菌和接种技术; 7.观察外植体的生长状况、染菌状况,剔除染菌外植体; 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成,细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。 植物细胞含有全套遗传信息,具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态; 2.有一定的营养物质,激素和其他外界条件(无菌、温度、pH); 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件

把植物的组织、器官等,使其在人工控制的无菌条件下,使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的,在接种前必须进行表面消毒,这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的,所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织,在一定条件下,其细胞被诱导改变原来的发育途径,逐步逆转其原有的分化形态,转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固,琼脂本身并不提供任何营养,它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来,仅溶解于热水,成为溶胶,冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克/升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外,还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关,长时间的高温会使凝固能力下降,过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力,存放时间过久,琼脂变褐,也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基,特点是:无机盐浓度较高,元素间的比例适当,离子平衡性好,具有较强的缓冲性,因而在培养的过程中可维持较好的稳定性;营养丰富,在一般培养中无须额外加

植物组织培养技术在农业生产的应用

[植物组织培养技术在农业生产的应用] ●研究性课题(2014----2015) ●南春中学高三(2)班 组长:杨坤贤 指导老师:卢英钦 组员:陆创伟、陈庆祥、魏斯狄 陈逵、陈勤莹、陈银涛 蔡承楷

一、课题提出 近年来,组培苗工厂化生产已作为一种新兴技术和生产手段,在园艺植物的生产领域蓬勃发展。组培苗工厂化生产,是以植物组织培养为基础,在含有植物生长发育必需物质的人工合成培养基上,并附加一定量的生长调节物质,把脱离于完整植株的本来已经分化的植物器官或细胞,接种在不同的培养基上,在一定的温度、光照、湿度及pH值条件下,利用细胞的全能性以及原有的遗传基础,促使细胞重新分裂、分化长成新的组织、器官或不定芽。最后长成和母株同样的小植物体。工厂化生产组培苗,是按一定工艺流程规范化程序化生产的,具有繁殖速度快、整齐、一致、无虫少病、生长周期短、遗传性稳定的特点,可以加速产品的发展,尽快获得繁殖无性系。特别是对一些繁殖系数低、杂合的材料有性繁殖优良性状易分离、或从杂合的遗传群体中筛选出表现型优异的植株,需要保持其优良遗传性,有更重要的作用。组培苗的无毒生产,可减少病害传播,更符合国际植物检疫标准的要求,扩大产品的流通渠道,增加产品市场的销售能力,同时减少了气候条件对幼苗繁殖的影响,缓和了淡、旺季供需矛盾。因此,小组开展了关于“植物组织培养技术在农业生产的应用”的课题研究。 二、研究目的 1、了解植物组织培养技术。 2、研究有关植物组织培养技术在农业生产的应用。 3、学会对知识的探讨与研究。 三、研究过程 1、查找资料:网上搜索,农业报刊等。 2、总结整理:(1)整理资料,分析内容。(2)制作电子文本。 四、研究成果 (1)技术原理 植物组织培养即植物无菌培养技术,又称离体培养,是根据植物细胞具有全能性的理论,利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等)、组织(如形成层、表皮、皮层、

植物组织培养实验设计及.doc

植物组织培养实验设计及 常用设备的使用与维护 一.实验目的 1.熟悉植物组织培养实验室的组成及设备 2.掌握植物组织培养实验室的设计要求 3.熟悉植物组织培养所需的仪器设备 二.实验原理 植物组织培养是通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。要达到无菌操作和无菌培养,就需要人为创造无菌的环境,使用无菌的器皿及器械,同时还需要人工控制的温度,光照,湿度等培养条件。无菌环境和培养条件的创造需要一定的设施及设备。 三.实验步骤 1.实验室的设计要求 功能齐全、布局合理、环境清洁、易于灭菌 2.实验室的组成及功能 实验室的组成: 洗涤室、药品室、称量室、培养基配制室、灭菌室、接种室、培养室、观察记录室、储藏室、移苗室 实验室的功能: 洗涤室用于玻璃器皿、实验用具的清洗、干燥、培养材料清洗、预处理也可在本室完成。室内应建造大型水槽和一个或几个浸泡

池,水槽最好上一内衬白瓷片的水泥槽,为防止碰坏玻璃器皿,下面可铺一活动的橡胶板。备有晾瓶架,用于放置刷净的培养器皿,配备有一定数量的周转盘或小推车,用于运输培养器皿。地面要注意防滑,排水通畅,墙壁要有耐湿、防潮功能。 药品室用于存放各种药品试剂。室内要求干燥、通风,避免光照,配有药品柜、冰箱等设备。化学试剂物品分类存放于柜中,有毒物质如升汞需要专人密封保存。原药可室温下存放,配好的母液,宜置于4℃冰箱中保存。药品室紧邻称量室较好,便于工作。 称量室进行化学药品的称量。要求干燥、密闭,无直射光照,避免腐蚀性药品和水气直接接触。有固定的水磨石平台,安放普通天平、精密天平和分析天平,要有电源插座,最好设计在阴面的房间,这样对怕光药品的保存和称量有利,称量室紧邻培养基配制室较好,以方便配制母液和培养基。房间较少时,可以与药品室合二为一。 培养基配制室主要进行母液的配制,培养基的配制、分装、包扎和灭菌前的暂时存放。在条件允许下,面积宜大不宜小,室内应有大型实验台。配有电炉、锅子、量具、培养基分装器具、吸管、培养容器、水浴锅和酸度计等。如规模较小,可与洗涤室、灭菌室合并在一起。

植物组织培养的应用及发展前景修订稿

植物组织培养的应用及 发展前景 集团档案编码:[YTTR-YTPT28-YTNTL98-UYTYNN08]

植物组织培养技术应用及进展 摘要:本文综述了植物组织培养理论的发展,重点论述其再脱毒、快繁、育种与有机化合物工业生产以及种质资源的保存等方面的应用,并对应用的前景作简单的展望。 关键词:植物组织培养;应用;进展 中图分类号: 1.理论起源 19世纪30年代,德国家施莱登和德国动物学家创立了细胞学说,根据这一学说,如果给细胞提供和生物体内一样的条件,每个细胞都应该能够独立生活。1902年,德国植物学家哈伯兰特在的理论是植物组织培养的理论基础。1958年,一个振奋人心的消息从传向世界各地,美国植物学家斯等人,用韧皮部的细胞进行培养,终于得到了完整,并且这一植株能够开花结果,证实了哈伯兰特在五十多年前关于细胞全能的预言。 植物组织培养的简单过程如下:剪接植物器官或组织——经过(也叫去分化)形成愈伤组织——再经过形成组织或器官——经过培养发育成一颗完整的植株。 植物组织培养的大致过程是:在无菌条件下,将植物器官或组织(如芽、茎尖、根尖或花药)的一部分切下来,用纤维素酶与果胶酶处理用以去掉细胞壁,使之露出原生质体,然后放在适当的人工上进行培养,这些器官或组织就会进行,形成新的组织。不过这种组织没有发生分化,只是一团薄壁细胞,叫做。在适合的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下,愈伤组织便开始分化,产生出植物的各种器官和组织,进而发育成一棵完整的植株。 植物组织培养即植物无菌培养技术,又称离体培养,是根据植物细胞具有全能性的理论,利用植物体离体的器官如根、茎、叶、茎尖、花、果实等)组织(如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等)或细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等)以及,在无菌和适宜的人工培养基及光照、温度等人工条件下,能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根,最后形成完整的植株的学科 2.植物组织培养发展简史 植物组织培养是20世纪30年代初期发展起来的一项生物技术。它是在人工配制的培养基上,于无菌状态下培养植物器官、组织、细胞、原生质体等材料的方法。 植物细胞的全能性是植物组织培养的理论基础。20世纪初,曾有人提出能否将植物的薄壁细胞培养成完整植株研究者从胡萝卜根的韧皮部取下一块组织,并在液体培养基中培养,使其分化出了愈伤组织,从愈伤组织又得到胚状体,胚状体转移到固体培养基上继续培养后,获得了完整的胡萝卜试管植株。经过栽培,此植株能够正常生长并开花结果,其种子繁衍出来的后代与正常植株的种子所繁衍出的后代别无二致。根据此实验可以得出以下结论:即不经过有性生殖过程也能将植物的薄壁细胞培养出与母体一样的完整植株。由于植物的每个有核细胞都携带着母体的全部基因,故在一定条件下,它们均能发育成完整植株,这就是所谓的植物细胞全能性。

植物组织培养MS培养基配方

植物组织培养MS培养基配方 (一)母液配制与保存 配制培养基时,如果每次配制都要按着杨成分表依次称量,既费时,又增加了多次称量误差。为了提高配制培养基的工作效率,一般将常用的基本培养基配制成10~200倍,甚至1000倍的浓缩贮备液,即母液。母液贮存于冰箱中,使用时,将它们按一定的比例进行稀释混合,可多次使用,并在配制较多数量的培养基时,降低工作强度,也提高试验的精度。 基本培养基的母液有四种:大量元素(浓缩20倍),微量元素(浓缩100倍),铁盐(浓缩200倍),除蔗糖之外的有机物质(浓缩100倍) 1大量元素 配制大量元素母液时要分别称量,分别溶解,在定容时按表1中的序号依次加入容量瓶中,以防出现沉淀。倒入磨口试剂瓶中,贴好标签和做好记录后,可常温保存或放入冰箱内保存。 表1大量元素母液(配1L20倍的母液) 序号成分配方浓度/(mg.L-1)称取量/mg 配1mL培养基吸取 量/mL 1 硝酸铵NH4NO3 1650 33000 50 2 硝酸钾KNO 3 1900 38000 3 磷酸二氢钾KH2PO 4 170 3400 4 七水合硫酸镁MgSO4.7H2O 370 7400 5 氯化钙无水CaCl2 440 6644 2微量元素母液 在配制微量元素母液时,也应分别称量和分别溶解,定溶时不分先后次序,可随意加入溶量瓶中定容(表2),一般不会出现沉淀现象。倒入磨口试剂瓶中,贴好标签和做好记录后,可常温保存或放入冰箱内保有存。 表2微量元素母液(配制1L100倍母液) 成分配方浓度/(mg.L-1) 称取量/mg 配制1L培养基吸取 量/mL 碘化钾KI 0.83 83 10 硫酸锰MnSO4.H2O 22.3 2230 硼酸H3BO3 6.2 620 硫酸锌ZnSO4.7H2O 8.6 860 钼酸钠Na2MoO4.2H2O 0.25 25 硫酸铜CuSO4.5H2O 0.025 2.5 氯化钴CoCl2.6H2O 0.025 2.5 3铁盐母液 由于铁盐无机化合物不易被植物吸收利用,只有基螯合物才能被植物吸收利用,因此需要单独配成螯合物母液表3)。 配制方法:称取5.56g硫酸亚铁和7.46g乙二胺乙酸二钠,分别用450ml的去离子水溶解,分别适当加热不停搅拌,分别溶解后将硫酸亚铁溶液缓缓加入到乙二胺四乙酸二钠溶液中,将两种溶液混合在一起,最后用去离子水定溶于1000mL,倒入棕色贮液瓶中,贴好标签和做好记录后放入冰箱内保存。

植物组织培养实验报告

如对你有帮助,请购买下载打赏,谢谢! 院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术(师范)年级13级学号姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期2016.3-6 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成,掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法; 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项,了解接种室的灭菌方法; 4.了解组织培养的基本程序; 5.掌握接种的方法和材料的培养过程; 6.掌握无菌操作技术,包括外植体除菌和接种技术; 7.观察外植体的生长状况、染菌状况,剔除染菌外植体; 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成,细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。植物细胞含有全套遗传信息,具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态; 2.有一定的营养物质,激素和其他外界条件(无菌、温度、pH); 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件 把植物的组织、器官等,使其在人工控制的无菌条件下,使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的,在接种前必须进行表面消毒,这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的,所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织,在一定条件下,其细胞被诱导改变原来的发育途径,逐步逆转其原有的分化形态,转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固,琼脂本身并不提供任何营养,它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来,仅溶解于热水,成为溶胶,冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克/升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外,还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关,长时间的高温会使凝固能力下降,过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力,存放时间过久,琼脂变褐,也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基,特点是:无机盐浓度较高,元素间的比例适当,离子平衡性好,具有较强的缓冲性,因而在培养的过程中可维持较好的稳定性;营养丰富,在一般培养中无须额外加入复杂的有机成分;微量元素种类全,浓度高。这类培养基是目前使用最广泛的培养基。 6.生长调节物质 包括天然植物激素额人工激素类似物。植物激素是一类植物自身合成、同时对其生长发育具有重要调节作用的有机化合物。生长调节物质对于离题培养中的细胞分裂分

植物组织培养的培养基

植物组织培养的培养基中,需要添加糖类作为碳源物质,因此糖类是影响植物组织培养成功与否的关键之一。高中生物教材中明确指出,植物组织培养的培养基中添加的糖类是蔗糖。那么为什么不添加葡萄糖呢?很多资料上解释为蔗糖较葡萄糖便宜,易被植物细胞吸收。其实并非如此。之所以以蔗糖作为碳源,主要有三个方面的原因: (1)同样作为碳源为植物细胞提供能量来源,蔗糖较葡萄糖能更好地调节培养基内的渗透压。配制相同质量分数的培养基,蔗糖形成的渗透压要明显低于葡萄糖,因此若采用葡萄糖作为碳源,易使植物细胞脱水而生长不良。同时,植物细胞吸收蔗糖的速率要明显慢于吸收葡萄糖的速率,所以蔗糖形成的渗透压可相对长期的保持稳定。 (2)植物组织培养过程中,要时刻注意防止培养基受到微生物的污染。微生物生长所需的碳源最常用的是葡萄糖,一般很少利用蔗糖。因此,采用蔗糖作为培养基的碳源,可一定程度上减少微生物的污染。 (3)诱导作用。在培养基成分中,增加生长素的浓度,导致木质部形成,增加蔗糖浓度则导致韧皮部形成。当生长素水平恒定时,2%蔗糖使分化出的全部是木质部,4%蔗糖使分化出的几乎全部是韧皮部,3%蔗糖则可以分化出两者。所以,生长素和蔗糖浓度决定愈伤组织中维管束的类型与数量。因此,在植物组培中要选用蔗糖而不选用葡萄糖。 通过细胞膜内外的液体的浓度差来调节 当细胞膜内的浓度小于细胞膜外的时候蔗糖救能进入细胞中了 植物细胞培养中最常用的培养基的碳源是蔗糖,已知葡萄糖和果糖也能使某些植物生长得很好。植物细胞可以分解蔗糖,蔗糖是由一分子果糖和一分子葡萄糖组成的,蔗糖是可以直接进入细胞的,蔗糖跨质膜从质外体进入细胞是由载体介导并需要消耗能量的质子-蔗糖共运输机制进行的,另外,植物能够利用的某些其他形式的碳源有麦芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖等。葡萄糖更不稳定,培养基需添加葡萄糖一般都在灭菌后再兑换。实在要添加葡萄糖那么灭菌温度一般控制在108~110左右,120度灭出来的就有一定程度的碳化了。所以用蔗糖更简单 动物细胞只能吸收葡萄糖,二糖蔗糖是无法吸收的。 以蔗糖为植物培养基碳源有两个原因: 1.抑制杂菌生长.细菌等不能直接以蔗糖为碳源,故可起抑制其生长的作用 2.蔗糖被植物细胞利用机理目还无定论.主要有以下两个学说(1)植物细胞先以次级主动运输的方式在细胞内外形成质子梯度,然后蔗糖就会利用这个梯度被吸收进细胞. (2).植物的细胞壁中含有能分解蔗糖的相关酶,蔗糖先在细胞膜外被分解为单糖,然后这些单糖再以主动运输的方式进入细胞,从而被细胞利用.

植物组织培养实验参考答案9

植物组织培养实验复习题 一、名词解释 1、大量元素:指含量占生物总重量万分之一以上的元素,包括C、H、O、N、P、S、K、C、Mg等。 2、微量元素:含量占生物总重量万分之一以下的元素。 3、植物生长调节剂:人工合成的对植物的生长发育有调节作用的化学物质。 4、外植体:把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官 5、细胞全能性:植物体的每个细胞都含有该植物全部的遗传信息。 6、基础培养基:根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人工配置的营养基质。 7、愈伤组织:人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团不定形的疏松排列的薄壁细胞。 8、褐变:植物组织中多酚氧化酶被激活,使酚类物被氧化成醌类物,可抑制其他酶活性,毒害外植体。 9、茎尖脱毒:茎尖分生区的病毒传播速度很慢,利用茎尖组培获得无病毒苗,来达到脱毒的目的。 10、不定芽:凡从叶、根或芽节间或是离体培养的愈伤组织上等通常不形成芽的部位生出的芽。 11、污染率:污染数除以接种数,再乘以100%。 12、诱导率:愈伤数除以未污染数,再乘以100%。 13、成活率:成活数除以未污染数,再乘以100%。 14、接种:将表面消毒的外植体转接到无菌的培养基上的过程。 15、消毒:消灭材料上的病菌(不损伤植物材料)。 16、灭菌:利用物理或化学的方法,达到组织培养所学的无菌环境。 17、母液:欲配培养液的浓缩液。 18、无病毒苗:指不含该种植物的主要危害病毒,即经检测主要危害病毒在植物内的存在表现为阴性反应的苗木。 19、植物组织培养:在无菌条件下,将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体,培养在无菌培养基上和人工控制的环境中,使其生长、分化、增殖,甚至长出新的植株的过程和技术。 20快速繁殖:采取培养基配制,材料灭菌,无菌培养,幼苗转移到苗床,成苗转至大田栽种五步走的繁殖培养方式 21、继代培养:继代培养是指愈伤组织在培养基上生长一段时间后,营养物枯竭,水分散失,并已经积累了一些代谢产物,此时需要将这些组织转移到新的培养基上的培养方式。 22、生根培养:将长到一定长度的微枝(>10mm)转移到生根培养基上培养。 23、玻璃化现象:试管苗的茎叶变成透明水渍状,生长畸形,增殖系数明显下降,难以诱导生根,即使诱导生根,其根系质量极差,移栽成活率极低。 24、暗培养: 25、液体培养:将所需培养物的悬浮液在液体培养基中培养的方法。 26、脱分化:一个成熟细胞回复到分生状态或胚性细胞状态的现象。 27、分化:由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变或发育方式改变的过程。 28、热处理脱毒:利用高温下使植物组织中的病毒部分钝化或完全失去活性的方法。 1 / 6 29、微尖嫁接技术:把极小(<0.2mm)的茎尖作为接穗嫁接到实生砧木上(无菌种子培养获无菌

第五章 植物组织培养技术实验方案

第五章植物组织培养技术 一、植物组织培养中的基本概念 (1) 植物组织培养技术: 在无菌培养的条件下,将离体的植物器官(根,茎,叶,花,果实等)、组织(形成层,花药组织等)、细胞(体细胞,生殖细胞等)以及原生质体等培养在人工配制的培养基上,并给予适当的培养条件,使其长成完整植株的过程。 (2) 理论依据: 植物细胞的全能性,即指植物机体的每个细胞都含有该物种全套的基因组,具有发育成完整个体的潜力。 (3) 外植体: 从活体植株上切下的,用于组织培养的细胞、组织和器官。一般包括茎尖、根、茎、叶、花、种子等器官以及他们形成的体细胞胚等材料。 (4) 分化: 在个体发育过程中,由一种相同的细胞类型经细胞分裂后逐渐在形态、结构和功能上形成稳定性差异,产生不同的细胞类群的过程称为细胞分化。 (5) 脱分化: 已经高度分化的植物器官、组织或细胞,在切割损伤和培养物内外因素的共同作用下,逐渐丧失原来的分化结构和功能,最后形成无组织的细胞团或愈伤组织的过程。 (6) 愈伤组织: 在人工培养基上由外植体脱分化形成的一团无序生长的薄壁细胞。(具有细胞分裂能力)。 (7) 再分化: 已经脱分化的细胞在一定条件下,又可经过愈伤组织或胚状体,再分化出根和芽,形成完整植株,这一过程叫作再分化。 (8) 不定芽: 在高等植物正常的个体发育中,芽一般是只从茎尖或叶腋等的一定位置生出。所以这种象顶芽、腋芽、副芽等均在一定部位生出的芽,称为定芽。与此相反,凡从叶、根、或茎节间等通常不形成芽的部位生出的芽,则统称为不定芽。 (9) 胚状体: 在离体植物细胞、组织或器官培养过程中,由一个或一些体细胞,经过胚胎发生和发育过程,形成的与合子胚相类似的结构。 二、植物组织培养过程(菊花为例) 1、培养基的配制: 方法:培养基干粉配制法 称取培养基干粉42g加水加热煮沸溶解后定溶至1L,按照需要的浓度分别加入激素。 (其中生根用的植物激素NAA为0.2mg/1000ml) 用1mol/L NaOH和1mol/L HCl调节pH至5.8。将配好的培养基迅速分装至150ml组培瓶中,拧上盖子,放入灭菌锅121℃,灭菌20min。 2、菊花接种与培养:

植物组织培养新技术的应用现状与发展前景

植物组织培养新技术的应用现状与发展前景 摘要:植物组织培养是以细胞全能性为理论基础建立的一种离体培养技术,它作为一种基本的试验技术和基础的研究手段,已经显示出了巨大的应用价值。自其诞生以来得到了迅速发展,为了加快组培苗的生长速度,提高其质量,改善其品质,并降低生产成本,国内外的学者将环境控制技术和组培技术有机的结合起来做了大量研究, 改善组培苗的生长环境。本文对植物组织培养过程中所采用的新技术进行了综述, 介绍了这些新技术的应用现状, 并提出了植物组培技术发展的前景。 关键词: 组织培养、新技术、应用现状、发展前景 植物组织培养技术自20 世纪初建立以来,在理论研究和应用技术上不断发展,广泛应用于植物的快速繁殖、品种改良、基因工程育种、种质资源保存、次生代谢产物生产等方面,产生了巨大的经济效益和社会效益,对现代农业和医药等领域产生了深刻影响,。但这些传统组培技术, 培育出的苗生长缓慢、污染严重、存活率低等,会导致成本过高, 不利于组培苗的大规模商品化生产, 无法满足市场对高质量低价位组培苗的需求。随着对植物组织培养技术的不断深入研究,一些新的培养方法和技术不断出现,不断将这些问题解决。 1 传统组培技术存在的问题和缺陷 植物外植体在组织培养过程中, 许多环境因素如光照、CO2 浓度、温度、相对湿度和培养基组成成分等对试管苗的生长发育有较大影响。在相对密闭的培养容器中,容器内外环境差异极大。传统组培容器环境特征使得在其内生长的组培苗蒸腾速率下降, 光合作用能力低下, 水和CO2 以及其他营养成分的吸收率低, 暗期呼吸作用增强, 受污染的机会增加导致组培苗的生长缓慢, 损失率高。另外,驯化阶段的小苗存活率低,难以实现规模化生产,试管苗不生根或生根率低; 外源激素的使用, 可能导致苗的变异, 由此造成繁殖周期不稳定、生产计划难以安排,且传统组培用于灭菌等的能量消耗较大, 所用光源为日光灯, 占用空间大等导致成本费用偏高。 2 植物组培新技术的应用 2.1 开放组培技术 植物开放式组织培养, 简称开放组培, 是在使用抗菌剂的条件下, 使植物组

实验一 植物组织培养基母液配制的若干关键环节

实验一、植物组织培养基母液配制的若干关键环节目的与要求: 熟悉MS培养基的组成,掌握贮备液的配制方法. 植物组织培养(plant tissue culture)是指植物的任何器官、组织或细胞,在人工预知的控制条件下,放在含有营养物质和植物生长调节物质等组成的培养基中,使其生长、分化形成完整植株的过程.植物组织培养具有取材少,培养材料经济;人为控制培养条件,不受自然条件影响;生长周期短,繁殖率高;管理方便,利于自动化控制等特点.因而被广泛应用于各种植物的快速繁殖之中. 为了避免每次配制培养基都要对几十种化学药品进行称量,应该将培养基中的各种成分,按原量10倍、100倍或1000倍称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做母液。这样,每次配制培养基时,取其总量的1/10、1/100、1/1000,加以稀释,即成培养液。现将培养液中各类物质制备母液的方法说明如下。 以MS培养基为例,其母液的配制包括大量元素、微量元素、铁盐、维生素、氨基酸、植物生长调节物质和有机附加物等种类.(见表1) 表1 MS培养基母液的配制 成分规定用量 /mg.L-1 扩大倍 数 称取量/ mg 母液定溶 体积/ml 配1LMS培 养基吸取量 /ml 大量元素 KNO3 NH4NO3 MgSO4·7H2O KH2PO4 CaCl2·2H2O 微量元数 MnSO4·4H2O ZnSO4·7H2O 1900 1650 370 170 440 22.3 8.6 20 20 20 20 20 1000 1000 38000 33000 7400 3400 8800 22300 8600 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 50 50 50 50 50 1 1

植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告 一实验目的 让植物组织经过脱分化作用,形成愈伤组织,经过再分化作用,愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官,最终形成完整的植株。 二实验原理 植物组织培养是把植物的器官,组织以至单个细胞,应用无菌操作使其在人工条件下,能够继续生长,甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下,原来已经分化停止生长的细胞,又能重新分裂,形成没有组织结构的细胞团,即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”,已经“脱分化”的愈伤组织,在一定条件下,又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官,这一过程称“再分化作用”。植物激素在此过程中起着重要的作用,吲哚乙酸(IAA )和 6 –苄基氨基腺嘌呤(6 – BA )的比例,决定了根和芽的分化。 三实验器材 (一)试剂 乙醇、IAA 或 2 ,4 – D 、HgCl 2 (或次氯酸钠)、6- 苄基氨基腺嘌呤(6-BA ) MS 培养基 (二)仪器设备 培养室,高压灭菌锅,水浴锅,解剖刀,三角烧瓶(100mL ),烧杯,量筒,培养皿,超净工作台,分析天平,长镊子,剪刀,橡皮筋等 三实验步骤 1. 配制培养基 (1 )愈伤组织诱导培养基:MS 培养基(蔗糖含量为10 g/L ,2,4 – D 含量为 2 mg/L ,琼脂10 g/L )。 (2 )试验培养基:在MS 培养基中按表33 – 1 加入IAA 和6–BA 。 吲哚乙酸先用少量0.1 mol/L NaOH 溶解,6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量0.1 mol/L HCl 溶解,然后用蒸馏水稀释,再加入培养基中。 2. 培养基灭菌 将配好的培养基加入琼脂加热溶解,调至pH 5.8 ,趁热分装于100 mL 三角烧瓶中,每瓶约20 mL 。待培养基冷却凝固后,用两层称量纸包扎瓶口,并用橡皮筋扎牢,然后在高压灭菌锅中121 ℃( 1 kg/cm 2 )下灭菌20 min 。取出三角烧瓶放在台子上,

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