食品中糖精钠的测定
食品中苯甲酸山梨酸和糖精钠的测定-标准文本(食品安全国家标准)
食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定1 范围本标准规定了食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量的测定方法。
本标准第一法适用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定；第二法适用于酱油、水果汁、果酱中苯甲酸、山梨酸的测定。
第一法液相色谱法2原理样品经处理后，用液相色谱分离，紫外检测器检测，外标法定量。
3试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1氨水（NH3•H2O）。
3.1.2氢氧化钠（NaOH）。
3.1.3硫酸（H2SO4）。
3.1.4亚铁氰化钾（K4Fe(CN)6•3H2O）。
3.1.5乙酸锌（Zn(CH3COO)2•2H2O）。
3.1.6氯化钠（NaCl）。
3.1.7酒石酸（C4H6O6）。
3.1.8硅酮树脂。
3.1.9磷酸二氢钠（NaH2PO4•12H2O）。
3.1.10磷酸二氢钾（KH2PO4）。
3.1.11中性氧化铝。
3.1.12甲醇（CH3OH）：色谱纯。
3.1.13乙酸铵（CH3COONH4）。
3.2 试剂配制3.2.1 氨水（1+1）：氨水与水等体积混合，经微孔滤膜过滤后备用。
3.2.2 氢氧化钠溶液（4 g/L）：称取4 g氢氧化钠，溶于水并稀释至1000 mL。
3.2.3硫酸溶液（0.5 mol/L）：移取30 mL浓硫酸（约70%）边搅拌边慢慢加入至500 mL水中，冷却至室温后，转移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。
3.2.4亚铁氰化钾溶液（92 g/L）：称取106 g亚铁氰化钾加水至1000 mL。
3.2.5 乙酸锌溶液（183 g/L）：称取220 g乙酸锌溶于少量水中，加入30 mL冰乙酸，加水稀释至1000 mL。
3.2.6 酒石酸溶液（15%）：称取15 g酒石酸，用水定容100 mL。
3.2.7的磷酸盐缓冲液（pH 7.2）：分别称取16.72 g磷酸二氢钠和2.72 g磷酸二氢钾，用水溶解后定容至1000 mL，经微孔滤膜过滤后备用。
食品中糖精钠的气相色谱测定法
食品中糖精钠的气相色谱测定法糖精钠是食品加工过程中添加的一种添加剂，它可以提供丰富的味道和口感，在食品中有重要的作用。
随着糖精钠在食品中的广泛应用，其残留量也显得越来越重要。
而要确定其含量，则需要采用一种可靠的测定方法。
气相色谱具有分离、测定、快速等优点，能够有效的测定糖精钠的含量。
因此，本文旨在介绍以气相色谱分析法测定食品中糖精钠含量的原理、设备及操作流程。
二、原理糖精钠主要有三种形式：钠糖、钙糖和锌糖三种形式。
气相色谱分析法可用于区分和测定这种复杂组合中的糖精钠。
气相色谱仪包括色谱柱、检测仪和电脑控制系统三部分组成，它们之间建立起紧密的通讯和控制，通过添加曲线中的校正点来使色谱仪的重现性得到提高。
色谱柱上的层析材料被用来和高温的溶剂混合，产生的气体将经过检测仪，并发出特定的光谱，经由程序的处理和添加校正点，以计算出糖精钠的含量。
三、设备及操作分析1.设备气相色谱分析仪是一种测定食品中糖精钠含量的专业仪器，它由色谱柱、检测仪和电脑控制系统三部分组成。
A.色谱柱:色谱柱是一种特殊的分析柱，由层析材料组成，其中固体树脂准备里包含着吸附性分子，使得物质容易地通过质量分析仪而被检测。
B.检测仪：检测仪通常由紫外可见光检测器、红外检测器及激发源组成，当物质通过紫外可见光检测器时，会发出特定的光谱，从而可以得到糖精钠的含量大小。
C.脑控制系统：电脑控制系统用于实现自动化控制和添加校正点，协助进行数据处理，以确定糖精钠的含量。
2.操作步骤（1）将样本加入至实验室，然后通过离心机进行离心，其中注意温度控制在恒定温度下。
（2）将离心液放入比色皿中，在有温度控制的情况下加入氧化剂和碱。
（3）将比色液在恒定的温度和压力下，经过色谱分析仪进行检测，用光谱图表示出检测值，并经由计算机添加校正点，以计算出糖精钠的含量。
（4）比较测定值和规定的食品标准，以合格标准为准。
四、结论气相色谱测定法是一种有效的测定食品中糖精钠的方法，其设备简单、操作简便，分析精确。
食品中糖精钠的测定方法
食品中糖精钠的测定方法1主题内容与适用范围本标准规定了食品中糖精钠的测定方法。
本标准适用于食品中糖精钠的测定。
最低检出量：高效液相色谱法取样量为10g，进样量为IOUL时，最低检出量为1.5ng0第一篇高效液相色谱法（第一法）2原理样品加温除去二氧化碳和乙醇，调PH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。
取样量为10g,进样量为IOUL时最低检出量为1.5ng0 3试剂3.1 甲醇：经滤膜（0.5μm）过滤。
3.2 氨水（1+1）：氨水加等体积水混合。
3.3 乙酸铉溶液（0.02mol∕L）：称取L54g乙酸铁，加水至IoOOmL溶解，经滤膜（0.45Pm）过滤。
3.4 糖精钠标准储备溶液：准确称取0.0851g经120C烘干4h后的糖精钠（C6H4C0NNaS02∙2H20）,加水溶解定容至100.OmL0糖精钠含量LonIg∕mL,作为储备溶液。
3.5 糖精钠标准使用溶液：吸取糖精钠标准储备液10.OnlL放入IOOmL容量瓶中，加水至刻度。
经滤膜（0.45μm）过滤。
该溶液每亳升相当于0.1Omg的糖精钠。
4仪器高效液相色谱仪，紫外检测器。
5分析步骤5.1 样品处理5.1.1 汽水：称取5.00〜10.00g,放入小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水（1+1）调PH约7。
加水定容至适当的体积，经滤膜（0.45μm）过滤。
5.1.2 果汁类：称取5.00〜10.00g,用氨水（1+1）调PH约7,加水定容至适当的体积，离心沉淀，上清液经滤膜（0.45μm）过滤。
5.1.3 配制酒类：称取10.0g,放小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水（1+1）调PH约7,加水定容至20ml,经滤膜（0.45μm）过滤。
5.2 高效液相色谱参考条件5. 2.1色谱柱：YwG-CI84.6mmX250mml0um不锈钢柱。
6. 2.2流动相：甲醇：乙酸铉溶液（0.02mol∕L）（5+95）°7. 2.3流速：lmL∕minβ5. 2.4检测器：紫外检测器，波长230nm,灵敏度0.2AUFS。
糖精钠实验报告
一、实验目的1. 熟悉糖精钠的性质和用途。
2. 掌握糖精钠的鉴定方法。
3. 培养实验操作能力和观察、分析实验现象的能力。
二、实验原理糖精钠是一种常用的食品添加剂，具有甜度高的特点。
在酸性条件下，糖精钠会分解产生糖精，糖精是一种白色结晶性固体，具有甜味。
本实验通过加入酸性溶液，使糖精钠分解，观察其溶解情况和颜色变化，从而鉴定糖精钠的存在。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：糖精钠、无水硫酸铜、盐酸、蒸馏水。
2. 实验仪器：试管、试管架、滴管、酒精灯、铁架台、石棉网。
四、实验步骤1. 取少量糖精钠置于试管中。
2. 向试管中加入少量蒸馏水，振荡使其溶解。
3. 向溶解后的糖精钠溶液中加入少量无水硫酸铜。
4. 观察溶液颜色变化，若出现蓝色，则说明糖精钠已溶解。
5. 用滴管吸取少量盐酸，滴加至试管中，观察溶液颜色变化。
6. 若溶液颜色由蓝色变为绿色，则说明糖精钠已分解产生糖精。
五、实验结果与分析1. 实验现象：在加入无水硫酸铜后，溶液变为蓝色，说明糖精钠已溶解。
在滴加盐酸后，溶液颜色由蓝色变为绿色，说明糖精钠已分解产生糖精。
2. 结果分析：糖精钠在酸性条件下分解产生糖精，溶液颜色由蓝色变为绿色。
通过观察溶液颜色变化，可以鉴定糖精钠的存在。
六、实验结论通过本实验，我们成功鉴定了糖精钠的存在。
在实验过程中，我们掌握了糖精钠的鉴定方法，提高了实验操作能力和观察、分析实验现象的能力。
七、实验注意事项1. 实验过程中，注意安全操作，避免与酸、碱等腐蚀性物质接触。
2. 在滴加盐酸时，动作要轻柔，避免溅出。
3. 实验过程中，注意观察溶液颜色变化，以便及时得出实验结论。
八、实验总结本实验通过对糖精钠的鉴定，使我们更加了解糖精钠的性质和用途。
在实验过程中，我们掌握了实验操作方法和观察、分析实验现象的能力。
此次实验，对我们今后的学习和工作具有重要意义。
糖精钠的检测
苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/T5009.29-2003，糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-2003，即可开展实验。
苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。
笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。
2 样品前处理的注意事项GB/T5009.28-2003和GB/T5009.29-2003 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。
食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。
这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。
GB/T5009.29-2003使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。
如用1 0％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。
具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1mol/L)1.0 ml，加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液，9.50mL 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。
用这种方法简单易行，接触有机试剂少，重复性和回收率都令人满意；缺点是一定要用液相色谱法检测，有一定局限。
食品中糖精钠测定方法的研究
食品中糖精钠测定方法的研究文章建立了两种食品中糖精钠的测定方法，研究了食品中糖精钠的荧光分光光度测定方法，最后对这两种方法的准确度进行了比较。
标签：糖精钠；荧光光度法；亚甲基蓝糖精钠，是最古老的甜味剂。
在各种食品生产过程中都很稳定[1]。
但糖精的安全性一直存在争议。
1977年，加拿大的一项多代大鼠喂养实验发现，大量的糖精可导致雄性大鼠膀胱癌。
但是糖精至今在我国和许多国家仍广泛用作食品和药物制剂中的人工非营养甜味添加剂，为了避免过量使用，许多国家已先后设置了容许限量。
因此研究其可靠、方便的检测方法，对于打击假冒、伪劣食品和药品，保护消费者的权益和健康，为食品、药品生产厂家和各级产品质量监督机构等部门提供科学、可靠、方便的检测方法，具有广泛的实际意义。
糖精钠的测定方法有多种，本次研究中主要研究了荧光分光光度法和次甲基蓝法，并对其各自的回收率，精密度及某些影响因素进行了测定，并对这两种方法的精密度进行了比较。
1 材料1.1 荧光光度法测定饮料中糖精钠含量1.1.1 仪器及试剂仪器：荧光分光光度计主要试剂：糖精钠标准溶液、0.03mol/L碳酸钠溶液其他试剂如无水乙醚、盐酸、磷酸、氯化钠等均为分析纯。
1.2 次甲基蓝分光光度法1.2.1 仪器及工作条件723-分光光度计1.2.2 主要试剂糖精钠标准溶液、次甲基蓝溶液：4×10-3mol/L、硫酸溶液：0.2mol/L、氯仿。
以上试剂均为分析纯，试验用水为蒸馏水。
2 结果与分析2.1 荧光光度法2.1.1 荧光配合物的激发与发射波长的选择和确定荧光光度法是基于糖精钠能碳酸钠形成荧光配合物而设计的[2]。
启动荧光分光光度计，对糖精（钠）与碳酸钠所形成的荧光配合物进行激发与发射光谱扫描，其结果是：激发波长为251nm，发射波长为500.8nm；起始波长分别为250～300nm和300～500nm。
2.1.2 标准曲线的绘制从50μg/mL的荧光配合物溶液中分别移取0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0mL于10mL容量瓶中，依次测定其荧光强度，绘制标准曲线其结果见图1。
食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定
食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定1 范围本方法适用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量的测定。
2 依据GB/T 23495-2009《食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定 高效液相色谱法》。
3 原理不同样品经提取后，将提取液过滤，经反相高效液相色谱分离测定，根据保留时间定性，外标峰面积定量。
.4 试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T 6682要求。
甲醇，乙酸铵等。
苯甲酸标准储备液：称取0.0638g 苯甲酸，用少量乙醇溶解并用水定容至100mL 。
山梨酸标准储备液：称取0.0766g 山梨酸，用少量乙醇溶解并用水定容至100mL 。
糖精钠标准储备液：称取0.0766g 糖精钠，用水溶解并定容至100mL 。
混合标准使用液：分别吸取不同体积苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准储备溶液，将其稀释成适当浓度，见附后标准曲线图谱。
5 分析步骤 5.1 样品处理称取适量样品（雪菜）于小烧杯中，用50mL 水分数次将样品移入100mL 容量瓶中，80℃水浴提取30min ，冷却后定容、过滤，滤液待上机分析。
5.2 色谱条件a) Agilent 高效液相色谱仪；b) 色谱柱：C 18柱，250mm ×4.6mm ，5μm ；c) 流动相：0.02mol/L 乙酸铵溶液+甲醇（90+10）； d) 流速：1mL/min ； e) 检测波长：230nm ； f) 进样量：20μL ； g) 柱温：25℃。
5.3 测定取处理液和混合标准使用液各20μL 注入高效液相色谱仪进行分离，以其标准溶液峰的保留时间为依据定性，以其峰面积求出样液中被测物质含量。
6 结果计算样品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的含量按下式计算： X =式中：X ——样品中待测组分含量，g/kg ；c ×Vm ×1000c ——由标准曲线得出的样液中待测物的浓度，μg /mL ； V ——样品定容体积，mL ； m ——样品质量，g 。
糖精钠含量的测定(测定原理与试剂配制)
定容至 1000mL
— 11 —
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• 4.标准品
糖
精
钠 含
• 糖精钠（C6H4CONNaSO2，CAS号：128-44-9），
量 的
纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书
测
定
的标准物质。
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谢谢
• 1.试剂（除另有说明，所用试剂均为分析纯）
糖
精
钠
含 量
（1）氨水（NH3·H2O） 。
（6）甲醇（CH3OH）：色谱纯。
的 测
（2）亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O]。 （7）乙酸铵（CH3COONH4）:色谱纯。
定
（3）乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]。 （8）甲酸（HCOOH）：色谱纯。
（4）无水乙醇（CH3CH2OH）。 （9）水：GB/T 6682规定的一级水。
（5）正己烷（C6H14）。
（10）冰乙酸（CH3COOH）。
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• 2.仪器准备
糖
精
钠
仪器
规格
仪器
规格
含 量
电子天平
0.001g
量筒
100mL
的 测
移液枪
洗瓶
定
塑料离心管
50mL
试管
水性微孔滤膜
（4）甲酸－乙酸铵溶液（2 mmol/L甲酸+20 mmol/L乙酸铵）：称取1.54g
含 量
乙酸铵，加入适量水溶解，再加入75.2μL甲酸，用水定容至1000mL，经
的
0.22μm水相微孔滤膜过滤后备用。
测
定
一级水
75.2μL甲
食品中苯甲酸山梨酸和糖精钠的测定-标准文本(食品安全国家标准)
食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定1 范围本标准规定了食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量的测定方法。
本标准第一法适用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定；第二法适用于酱油、水果汁、果酱中苯甲酸、山梨酸的测定。
第一法液相色谱法2原理样品经处理后，用液相色谱分离，紫外检测器检测，外标法定量。
3试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1氨水（NH3•H2O）。
3.1.2氢氧化钠（NaOH）。
3.1.3硫酸（H2SO4）。
3.1.4亚铁氰化钾（K4Fe(CN)6•3H2O）。
3.1.5乙酸锌（Zn(CH3COO)2•2H2O）。
3.1.6氯化钠（NaCl）。
3.1.7酒石酸（C4H6O6）。
3.1.8硅酮树脂。
3.1.9磷酸二氢钠（NaH2PO4•12H2O）。
3.1.10磷酸二氢钾（KH2PO4）。
3.1.11中性氧化铝。
3.1.12甲醇（CH3OH）：色谱纯。
3.1.13乙酸铵（CH3COONH4）。
3.2 试剂配制3.2.1 氨水（1+1）：氨水与水等体积混合，经微孔滤膜过滤后备用。
3.2.2 氢氧化钠溶液（4 g/L）：称取4 g氢氧化钠，溶于水并稀释至1000 mL。
3.2.3硫酸溶液（0.5 mol/L）：移取30 mL浓硫酸（约70%）边搅拌边慢慢加入至500 mL水中，冷却至室温后，转移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。
3.2.4亚铁氰化钾溶液（92 g/L）：称取106 g亚铁氰化钾加水至1000 mL。
3.2.5 乙酸锌溶液（183 g/L）：称取220 g乙酸锌溶于少量水中，加入30 mL冰乙酸，加水稀释至1000 mL。
3.2.6 酒石酸溶液（15%）：称取15 g酒石酸，用水定容100 mL。
3.2.7的磷酸盐缓冲液（pH 7.2）：分别称取16.72 g磷酸二氢钠和2.72 g磷酸二氢钾，用水溶解后定容至1000 mL，经微孔滤膜过滤后备用。
食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定液相色谱法
食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的液相色谱法是一种常用的分析方法，由于其操作简便、分离效果好以及分析结果准确可靠而得到广泛应用。
下面将详细介绍该方法的原理、仪器设备、操作步骤以及常见问题及解决方法。
一、方法原理：该方法采用液相色谱法进行分析，根据待测样品中的目标化合物与色谱柱之间的相互作用来实现物质的分离和定量。
主要包括样品的预处理、色谱分离、定量检测和数据分析等步骤。
二、仪器设备：液相色谱仪是该方法的主要仪器设备，其中包括色谱柱、检测器和数据处理系统等，常用的色谱柱有C18反相色谱柱、正相色谱柱等。
常用的检测器有紫外检测器、荧光检测器等。
三、操作步骤：1. 样品的预处理：将待测食品样品取适量加入提取溶剂中，超声或搅拌混合，静置一段时间使目标化合物溶解。
然后通过滤膜过滤，以获取纯净的样品溶液。
2. 色谱分离：将样品溶液注入色谱柱中，通过不同组分在色谱固定相和流动相之间的相互作用来实现分离。
可以调整流动相的组成和流速等条件来优化分离效果。
3. 定量检测：分离后的组分进入检测器，根据目标化合物的特性进行定量检测。
常用的方法是通过比较待测样品和已知浓度的标准溶液的峰面积或峰高来确定目标化合物的含量。
4. 数据处理：将检测到的信号转化为对应的色谱图，并通过计算机数据处理系统进行数据分析和结果计算。
四、常见问题及解决方法：1. 色谱柱选择：根据目标化合物的特性选择合适的色谱柱，如苯甲酸和山梨酸可以选择C18反相色谱柱，糖精钠可以选择离子交换色谱柱。
2. 流动相的选择：合理选择流动相的组成和流速，以实现目标化合物的高效分离。
这需要根据不同化合物的极性和溶解度等参数进行优化。
3. 检测器的选择：根据不同化合物的特性选择合适的检测器，如苯甲酸和山梨酸可以选择紫外检测器进行检测，糖精钠可以选择荧光检测器进行检测。
4. 样品的提取：提取过程要注意样品的充分溶解和提取溶剂的选择，以获得准确的分析结果。
食品中糖精钠的气相色谱测定法
食品中糖精钠的气相色谱测定法
食品中糖精钠含量测定是食品安全的关键环节，由于糖精钠的特殊性质，传统的测定方法较为复杂，耗时长，因此开发了气相色谱技术(Gas Chromatography, GC)，用以测定食品中糖精钠的含量，为食品质量的监测提供准确可靠的数据支持。
二、原理及操作步骤
1.理：气相色谱技术是一种分析技术，它通过将溶液中的物质按照其极性程度分离，分析溶液中物质的组成；在气相色谱分析中，将溶液中的物质做小分子量极性分离，也称为溶剂萃取，然后检测柱的色谱峰，根据检测出的色谱峰的强度来进行定量分析，最后测定食品中糖精钠的含量。
2.作步骤：
(1)先采用烘干法处理样品，将样品加入烘干管，在高温下用热风烘干；
(2)烘干后的样品加入标准溶液中，进行混匀；
(3)混匀后的溶液加入柱中，在色谱仪上选择合适的检测参数，并调整温度；
(4)开柱面集管，启动真空泵，在色谱仪上进行检测；
(5)据检测的色谱峰的强度，计算出糖精钠的含量；
(6)据结果，对样品进行定量分析。
三、结论
气相色谱技术具有准确度高、灵敏度强、效率高、操作简便等优
点，是一种重要的食品安全分析方法。
食品中糖精钠的气相色谱测定法能够有效、快捷、准确的检测出样品中的糖精钠的含量，是一种快速、经济、有效的测定方法。
食品中糖精钠的测定
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五、所用仪器和试剂
1、试剂 乙醚：不含过氧化物。 无水硫酸钠。 无水乙醇及乙醇（95%）。 聚酰胺粉：过200目筛。 盐酸（1+1）：取100mL盐酸，加 水稀释至200mL。
6
展开剂：正丁醇-氨水-无水乙醇
（7+1+2）；异丙醇-氨水-无水乙醇 （7+1+2）。 显色剂：溴甲酚紫溶（0.4g/L）。
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醚提取液，用5mL盐酸酸化的 水洗涤一次，弃去水层。乙 醚层通过 无水硫酸钠脱水后，挥发乙 醚，加2.0mL乙醇溶解残留 物，密塞保 存，备用。
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2、薄层板的制备 聚酰胺粉板：称取3.2g聚酰胺粉， 加0.8g可溶性淀粉，加约12mL 水， 研磨3min～5min，立即涂成0.25～ 0.30mm 厚10cm×20cm的薄层板，室 温干燥后，在80℃下干燥1h。置于 干燥器中保存。 硅胶板：称取3.2g硅胶J，加 0.8gCMC，加约12mL 水，研磨 3min～5min，立即涂成0.25～ 0.30mm 厚10cm×20cm的薄层板，室 温干燥后，在80℃下干燥1h。置于 干燥器中保存。
食品中糖精钠 的测定
一、实验目的与意义
糖精钠俗称糖精，是广泛使用 的一种人工甜味剂常用食品如酱菜、 冰淇淋、蜜饯、糕点、饼干、面包 等，均可以糖精钠作甜味剂来提高 其甜度。糖精钠的定量分析方法有 高效液相色谱法、薄层色谱法、离 子选择电极法及紫外分光光度法等。 目前使用较多的是高效液相色谱法。 本次实验所使用的方法是薄层色谱 法。
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二、实验原理
在酸性条件下，食品中的糖 精钠用乙醚提取、浓缩、薄层色 谱分离、显色后，与标准比较， 进行定性和半定量测定。
食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的测定
食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的测定食品安全检验手册26~27页1．试剂和溶液方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为重蒸水。
（1） 甲醇 色谱纯（2） 稀氨水（1+1）氨水加水等体积混匀。
（3） 0.02mol/L 乙酸铵溶液 称取1.54g 乙酸铵，加水溶解并定容至1000mL，溶液经滤膜（0.45μm）过滤。
（4） 亚铁氰化钾溶液： 称取10g 亚铁氰化钾，用水溶解，并稀释至100 mL。
（5） 硫酸锌溶液：称取15g 硫酸锌，用水溶解，并稀释至100 mL。
（6） 苯甲酸标准储备溶液 准确称取10.0mg 苯甲酸，加少量乙醇溶解，移入10mL容量瓶中，加水定容至10mL。
此溶液苯甲酸含量为1mg/mL，作为储备液。
（7） 山梨酸标准储备溶液 准确称取10.0mg 山梨酸，加少量乙醇溶解，移入10mL容量瓶中，加水定容至10mL。
此溶液山梨酸含量为1mg/mL，作为储备液。
（8） 糖精钠标准储备溶液 准确称取10.0mg 糖精钠，加少量水溶解，移入10mL容量瓶中，加水定容至10mL。
此溶液糖精钠含量为1mg/mL，作为储备液。
（9） 苯甲酸、山梨酸、糖精钠混合标准使用液 取苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准储备溶液各1.0mL，放入100 mL 容量瓶中，加水至刻度。
此溶液含苯甲酸、山梨酸、糖精钠各10μg/mL，将此溶液用水稀释成2.0，4.0，6.0，8.0，10.0μg/mL 标准系列。
溶液通过滤膜（0.45μm）过滤后进样。
2.测定方法（1） 样品处理①汽水饮料果汁类：（汽水需温搅拌除去二氧化碳）吸取2.0 mL 样品， 加入已装有中性氧化铝（3.5cmⅹ1.5 cm）的小柱中，过滤，弃去初滤液，然后用流动相洗脱苯甲酸、山梨酸、糖精钠，接收于25mL 带塞量筒中，洗脱至刻度，摇匀。
此溶液通过0.45μm 微孔滤膜后进样。
②配制酒类：称取10.0g 样品，放入小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水（1+1）调节pH 约7，加水定容至适当体积，经滤膜（0.45μm）过滤。
食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定液相色谱法
食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定液相色谱法食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定液相色谱法是一种常用的分析方法。
本文将从原理、方法及操作步骤等方面进行详细解析。
首先，液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种基于物质在固定相和移动相的作用下，依据其在两相间分配不同的速度和平衡常数进行分离和测定的方法。
液相色谱法在分析食品中的添加剂，如苯甲酸、山梨酸和糖精钠等方面具有广泛应用。
其次，对于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定，可以通过液相色谱法进行定性和定量分析。
液相色谱法主要分为正相液相色谱法和反相液相色谱法。
正相液相色谱法使用非极性固定相，极性移动相；反相液相色谱法则相反。
由于苯甲酸为非极性物质，山梨酸为极性物质，糖精钠为离子物质，所以在测定食品中的苯甲酸、山梨酸和糖精钠时，一般采用反相液相色谱法。
操作步骤如下：1. 准备样品：将待测食品样品称量并取样，可选择适当的提取方法进行提取。
一般采用乙酸乙酯等有机溶剂进行提取。
2. 进样操作：将提取的样品溶液通过滤膜滤过，除去悬浮物和杂质，得到清晰的样品溶液。
将溶液用微量注射器吸取一定体积后，注入进样器中。
3. 色谱条件设置：选择适当的色谱柱，一般使用反相色谱柱。
设置好流速、柱温和检测波长等参数。
常用的固定相可以是C18、C8等，移动相可以是甲醇和水的混合液。
4. 开始分析：通入移动相以开始分离分析过程。
根据样品中目标物的特性，优化流速、温度等参数，使其尽快分离并得到良好的色谱峰。
5. 数据处理：通过检测波长进行测定，根据标准曲线计算出样品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的含量。
总结起来，食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定液相色谱法是一种快速、准确的分析方法。
通过选择适当的色谱柱和优化色谱条件，可以对食品中的目标物进行定性和定量分析。
这种方法在食品安全监测和质量控制中具有重要意义。
然而，需要注意的是，为了获得更准确的结果，实验人员还应定期校准仪器，制备标准品并建立标准曲线，以确保测定结果的准确性和可靠性。
甜味剂--糖精钠的测定
糖精及其钠盐是使用较广的甜味剂之一，它的化学名是邻磺酰苯亚胺（O-sulfobenzolc acidimide）。
分子式为C7 H5SO3N。
白色结晶或粉状，无臭或微有酸性芳香气，在水中溶解度极小，味极甜。
糖精钠进入人体后不分解，不供给热能，无营养价值，随尿排除体外。
测定糖精的方法较多，有薄层色谱法、纳氏比色法、硫代二苯胺比色法及紫外分光光度法等，下面简要介绍两种测定方法。
一．紫外分光光度法1. 原理样品经处理后，在酸性条件下用乙醚提取食品中的糖精钠，经薄层分离后，溶于碳酸氢钠溶液中，于波长270nm处测定吸光度，与标准液比较定量。
2. 试剂与仪器(1) 2%碳酸氢钠溶液(2) 4%氢氧化钠溶液(3) 6mol/LHCL溶液(4) 乙醚（不含过氧化物）(5)10%硫酸铜(6) 无水硫酸钠(7) 0.02mol/L氢氧化钠(8) 硅胶GF254(9) 聚酰胺，200目(10) 糖精钠标准溶液(11) 展开剂：苯-乙酸乙酯-乙酸（12:7:3），硅胶薄层用。
(12) 展开剂：正丁醇-浓氨水-无水乙醇（7:1:2），聚酰胺薄层用(13) 显色剂：0.04%溴甲酚紫的50%乙醇溶液，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调至PH值为8(14) 紫外分光光度计(15) 薄层板10*20cm；展开槽(16) 微量注射器3.测定方法(1)样品提取1)饮料、冰棍、汽水类：取10ml均样置100ml分液漏斗中，加2ml6mol/L盐酸，用30、20、20ml乙醚提取三次。
合并乙醚提取液，用5ml盐酸酸化的水洗涤一次，以洗去水溶性杂质，弃去水层。
乙醚层通过无水硫酸钠脱水后，挥发干乙醚。
加20ml乙醇溶解残渣，密封保存，备用。
2)酱油、果汁、果酱、乳等：称取20.0g或吸取20.0ml均样置100ml容量瓶中，加水至约60ml，加20ml10%硫酸铜溶液，混匀,再滴加4.4ml4%氢氧化钠溶液，加水至刻度，混匀。
静置30min后过滤，取滤液50ml置150ml分液漏斗中，以下同1)中后序操作。
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我国食品中糖精钠的使用范围及最 大使用量
食品名称／分类
熟制豆类（五香豆、炒豆） 带壳烘焙／炒制坚果与籽类 脱壳烘焙／炒制坚果与籽类 面包 糕点 饼干 复合调味料 饮料类（包装饮用水类除外）
配制酒
最大使 备 注
用量
/(g/kg)
1.0
以糖精计
1.2
以糖精计
1.0
以糖精计
0.15 以糖精计
0.15 以糖精计
• 3．在酸性溶液中以糖精的形式存在，出峰较早；在 碱性溶液中以糖精钠的形式存在，出峰较晚。因此加入 少量氨水使其缓冲液的pH在7.5左右，这样出峰顺序为 苯甲酸、山梨酸、糖精钠，分离效果好。值得注意的是， 一般色谱柱的最高允许pH为8，所以加入氨水的量不宜 太多，以免损坏柱子。根据不同的柱子和柱子在不同的 使用时期选择不同的比例，调节缓冲液的pH非常重要。
0.2AUFS。
2
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注
• 1．波长的选择：有时实验要求同时测定苯甲酸、山梨 酸和糖精钠，山梨酸的灵敏测定波长为254 nm，但在此 波长下糖精钠和苯甲酸的灵敏度降低，为了照顾三者的 灵敏度，本方法采用测定波长为230 nm。
• 2．流动相和色谱柱的选择：测定糖精钠也可采用氨 基柱，流动相也可采用甲醇、水。本方法采用的柱子和 流动相系统均和测定合成色素的条件一致，更便于同时 测定糖精钠和合成色素。
0.15 以糖精计
0.15 以糖精计
0.15 以糖精计，固体饮料按冲 调倍数增加使用量
0.15 以糖精计
1
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二、 (GB/T 5009.28-2003)食品中糖 精钠的测定
• 1 范围 • 本标准规定了食品中糖精钠的测定方法。 • 本标准适用于食品中糖精钠的测定。 • 本方法检出限：高效液相色谱法为取样
分析步骤
• 1试样处理 • 汽水：称取5.00 g～10. 00 g，放入小烧杯中，
微温搅拌除去二氧化碳，用氨水(1+1)调pH约7 【注解1】。加水定容至适当的体积，经0.45 µm滤膜过滤。 • 果汁类：称取5.00 g-10.00 g，用氨水(1+1)调 pH约7，加水定容至适当的体积，离心沉淀， 上清液经0.45 µm滤膜过滤。 • 配制酒类：称取10.00 g，放小烧杯中，水浴加 热除去乙醇，用氨水(1+1)调pH约7，加水定容 至20 mL，经0.45 µm滤膜过滤。
注
• 4．对于豆粉、奶粉、月饼等高蛋白高油脂样品， 可先加适量蒸馏水，再加入一定量的1 mol/L的氢氧 化钠，再用10%的亚铁氰化钾、20%的乙酸溶液沉 淀蛋白，振荡混匀后用稀氨水或稀乙酸调pH至 7.0～8.0，用蒸馏水定容至刻度，混匀静置，沉淀 蛋白后用滤纸过滤，滤液经0.45 µm的微孔滤膜后于 样品瓶中保存待测。经过去蛋白、调节酸碱度、过 膜等处理后的样品，结果准确、干扰少、峰形好， 还可以减少色谱柱的污染，减低柱压，延长使用寿 命。由于现在食品的基体越来越复杂，在工作中要 不断摸索，根据具体的食品成分选择有效的前处理 方法，消除干扰，从而保证结果的准确性和可靠性。
80℃下干燥1h。置于干燥器中保存。
•
2）点样：在薄层板下端2cm处，用微量注射器点
10µL和20μL的样液二个点，同时点3.0，5.0，7.0，
10.0μL糖精钠标准溶液，各点间距1.5cm。
• 3）展开与显色：将点好的薄层板放入盛有展开剂的展 开槽中，展开剂液层约0.5cm，并预先已达到饱和状态。 展开至10cm，取出薄层板，挥干，喷显色剂，斑点显黄 色，根椐样品点和标准点的比移值进行定性，根据斑点 颜色深浅进行半定量测定
食品中糖精钠的测定
2015-3-23
一、概述
• 糖精钠(saccharin sodium dihydrate)是一种合成的甜 味剂。1879年Fahlberg等在邻氨磺酰苯甲酸的制造 中，发现其无水品有很强的甜味，将其命名为糖精， 含2个结晶水的邻氨磺酰苯甲酸的钠盐为糖精钠。 其甜度约为蔗糖的500倍，即使将其稀释10000倍， 其稀释后的水溶液还具有甜味。
分析步骤
• 试样提取
• 1）饮料、冰棍、汽水：取10.0mL均匀试样(如 试样中含有二氧化碳，先加热除去。如试样中 含有酒精，加4%氢氧化钠溶液使其呈碱性， 在沸水浴中加热除去)，置于100mL分液漏斗 中，加2mL盐酸(1+1)，用30，20，20mL乙醚 提取三次，合并乙醚提取液，用5mL盐酸酸化 的水洗涤一次，弃去水层。乙醚层通过无水硫 酸钠脱水后，挥发乙醚，加2.0mL乙醇溶解残 留物，密塞保存，备用
• 1 适用范围 • 本方法适用于食品中糖精钠的测定
• 原理及方法提要 • 在酸性条件下，试样中的糖精钠用乙
醚提取、浓缩、薄层色谱分离、显色后与 标准比较，进行定性和半定量测定。
主要试剂和材料
• 乙醚：不含过氧化物。 • 无水硫酸钠。 • 无水乙醇及乙醇(95%)。 • 聚酰胺粉：200目。 • 盐酸(1＋1)：取100mL盐酸，加水稀释至200mL。 • 展开剂：①正丁醇＋氨水＋无水乙醇(7＋1＋2)；②异丙醇＋氨水＋无
• 糖精钠水溶液呈微碱性。易溶于水，不溶于乙醚、三氯 甲烷等有机溶剂。在pH3.8以下的酸性溶液中不稳定， 尤其在加热时分解，生成氨磺酰苯甲酸后丧失甜味。在 中性溶液中稳定，但长久加热时，也会丧失甜味。在碱 性溶液中比较稳定，但长久煮沸时，一部分可分解成氨 磺酰苯甲酸。在通常的加工条件下其甜度不会降低。由 于其具有以上特性，因而不适合于一般酸性强的食品加 热，将其与其他甜味剂合并使用时，可使其甜味成倍增 加。
量为10 g，进样量为10 µL时检出量为1.5 ng。
第一法 高效液相色谱法
• 2原理 • 试样加温除去二氧化碳和乙醇，调pH至
近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反 相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进 行定性的定量。
试剂和仪器
• 3.1 甲醇：经0.5 um滤膜过滤。 • 3.2氨水(1+1)：氨水加等体积水混合。 • 3.3乙酸铵溶液(0.02 mol/L)：称取1.54 g乙酸铵，加水至
注
• 使含糖精钠1 mg～2 mg。 • 糖精钠在酸性条件下生成糖精，易溶于乙
醚中，使提取完全。 • 盐酸酸化水洗的目的，是除去水溶性杂质，
并防止糖精损失
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分析步骤
• 试样提取
• 2）酱油、果汁、果酱等：称取20.0g或吸取20.0mL 均匀试样，置于100mL容量瓶中，加水至约60mL， 加20mL硫酸铜溶液(100g/L)，混匀，再加4.4mL氢 氧化钠溶液(40g/L)，加水至刻度，混匀，静置 30min，过滤，取50mL滤液置于150mL分液漏斗中， 以下按1）自“加2mL盐酸(1＋1)”起依法操作。
注
• 这些食品不能直接提取，用透析法可去除 大部分蛋白质、淀粉、脂肪等的干扰，使 分子质量较小的糖精钠渗透到溶液中
分析步骤
• （2） 薄层测定
•
1）薄层板的制备：称取1.6g聚酰胺粉，加0.4g可溶
性淀粉，加约7.0mL水，研磨3～5min，立即涂成0.25～
0.30mm厚的10cm×20cm的薄层板，室温干燥后，在
• 糖精钠化学式为C7H4NNaO3S．2H2O，相对分子 质量为241.19，化学名称为邻-磺酞苯甲酞亚胺钠， CA编号为128-44-9，结构式如下
• 糖精钠一般为具有2分子结晶水的斜方晶系片状结 晶，在空气中可逐渐风化失掉结晶水而成为白色粉 末。其化学结构被推断为内酰胺型(1)和内酰亚胺型 (2)，根据重氮甲烷甲基化作用的研究结果认为本品 的结晶体为(1)型，而溶液中的一部分属(2)型，结构 式如下
苯甲酸、山梨酸和糖精钠色谱图
精密度【注解4】
• 在重复性条件下获得的两次独立测定结果 的绝对差值不得超过算术平均值的10%
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注
• 方法的技术取样量为10 g，进样量为10 µL 时，最低检出量为1.5 ng。在重复性条件下 获得的两次独立测定结果的绝对差值不超 过10%
食品中糖精钠的测定 薄层色谱法 （GB/T 5009.28-2003）
•
3）固体果汁粉等：称取20.0g磨碎的均匀试样，
置于200mL容量瓶中，加100mL水，加温使溶解、
放冷。以下按②自“加20mL硫酸铜溶液(100g/L样提取
• 4）糕点、饼干等蛋白、脂肪、淀粉多的食品：称 取25.0g均匀试样，置于透析用玻璃纸中，放入大小 适当的烧杯内，加50mL氢氧化钠溶液(0.8g/L)，调 成糊状，将玻璃纸口扎紧，放入盛有200mL氢氧化 钠溶液(0.8g/L)的烧杯中，盖上表面皿，透析过夜。 量取125mL透析液(相当12.5g试样)，加约0.4mL盐酸 (1＋1)使成中性，加20mL硫酸铜溶液(100g/L)，混 匀，再加4.4mL氢氧化钠溶液(40g/L)，混匀，静置 30min，过滤。取120mL(相当10g样品)，置于 250mL分液漏斗中，以下按1）自“加2mL盐酸(1＋1)” 起依法操作
测定【注解3】
• 取处理液和标准使用液各10 µL(或相同体积) 注入高效液相色谱仪进行分离，以其标准 溶液峰的保留时间为依据进行定性，以其 峰面积求出样液中被测物质的含量，供计 算。
注
• 干扰情况：
• 本方法不受蔗糖、柠檬酸和合成色素的影响，并 可同时测定抗坏血酸，其相对保留时间为1.86 min(流速2 mL/min)。
醇溶解，移入100mL容量瓶中，加乙醇(95%)稀释至刻度。此溶液每 毫升相当于1mg糖精钠(C6H4CONNaSO2·2H2O)
注
• 乙醚中过氧化物检查方法：取乙醚10 mL， 加新煮沸放冷的蒸馏水20 mL，振摇3 min， 静置分层，分取水层，加15%碘化钾溶液和 0.5%淀粉溶液各数滴，振摇后应不显蓝色
1000 mL溶解，经0.45 µm滤膜过滤。 • 3.4糖精钠标准储备溶液：准确称取0. 0851 g经120℃烘