分子诊断检测项目介绍()-分子诊断检测项目介绍

分子诊断检测项目介绍

前言

天津万盖得门诊部是一家由海外归国人员为主体创办的股份制民营医疗机构, 以引进、开发和推广新的医学检验技术为主要经营内容。万盖得三字来自英语“Vanguard”的音译，其意译为前哨或尖兵的意思，这表明了创办者“敢为天下人先”的意愿。希望能够凭借自身的知识、技术、信息和观念优势，为国内医学检验方面的技术进步以及医疗体制的改革做出贡献。万盖得将以严肃、严谨和科学的态度开展各项业务，为医院和社区提供高质量的医疗和检验服务。

分子诊断是我们首先开展的实验诊断服务，这是一个全新的、被称之为实验诊断一场革命的领域，因为分子技术的临床应用已经使很多用常规技术根本无法检测的病理变化可以被精确的测到。我们首先开展的用细胞DNA定量分析系统进行肿瘤的早期诊断，处于世界领先地位，这项技术已使脱落细胞的检查成为一项客观、准确、自动化和高通量的肿瘤筛查和早期诊断的技术平台。我们自主开发的多重PCR 检测性病病原、病毒和难以培养的细菌性病原，将给感染性疾病的诊断和治疗带来新的突破性进展。在医疗服务方面，我们计划引入发达国家中行之有效的家庭医生服务模式，为中等收入以上的家庭和个人提供个体化和优质的医疗和保健服务，引导我们的服务对象建立起防病重于治病的观念，主动地提高自身的保健意识。与同等规模的医疗机构，保持一种即竞争又合作的新型关系。与大型综合医院和专科医院，我们希望能建立起互补和互利的协作关系。我们相信，万盖得在各级领导和医务界同仁的关怀和支持下，定能发展壮大。

万盖得首席科技顾问

临床微生物学博士

吴尚为

2006年元月

分子诊断目录

细胞分子生物学检测

细胞DNA定量分析系统简介

细胞DNA定量分析的基本原理

细胞DNA定量分析的临床应用价值

不同DNA指数（DI）在宫颈癌普查中的临床意义

宫颈癌和宫颈癌的早期诊断

宫颈癌筛查和常规宫颈细胞学检查

宫颈细胞学检查的方法

宫颈细胞DNA定量分析

细胞DNA定量分析的其他用途

核酸检测技术

基本概念

多聚酶链反应-PCR

人类乳头状瘤病毒的检测

人类乳头状瘤病毒

人类乳头状瘤病毒与宫颈癌

人类乳头状瘤病毒对宫颈癌的“预警”作用

万盖得宫颈癌筛查—预警—监测和早期诊断系统宫颈标本采集、送检注意事项

慢性生殖道感染和性传播疾病病原的检测慢性生殖道感染和性传播疾病

引起慢性生殖道感染和性传播疾病的常见病原

诊断困难造成对发病率统计的困难

实验检测方法及优、缺点

分子扩增技术的应用促进了对性病的了解

PCR已成为检测性病病原的金标准

万盖得多重PCR检测性病病原

脑脊液中感染病原的检测

中枢神经系统感染和诊断

人类疱疹病毒与中枢神经系统感染

脑脊液中检测病毒的困难

万盖得多重PCR检测脑脊液中的疱疹病毒

细菌性中枢神经系统感染

PCR检测脑脊液中细菌的优越性

万盖得多重PCR检测脑脊液中的致病菌

呼吸道感染病原的检测

呼吸道感染

呼吸道感染病原的检测

PCR检测法的优越性

万盖得多重PCR检测细菌性非典型肺炎病原

PCR是检测病毒非典型肺炎病原的最好方法

万盖得多重RT-PCR检测病毒性非典型肺炎病原

细胞分子生物学检测

细胞DNA定量分析

细胞DNA定量分析系统简介

1、系统组成：数码显微镜、自动送片机、计算机和先进的软件系

统（自动化控制软件和DNA定量分析软件）。

2、Feulgen染色中细胞核着色深浅度与DNA的含量正相关。细胞

DNA的定量检测是通过逐一检测每一个细胞核的积分光密度值（IOD）实现的。因此IOD代表细胞核DNA的含量。显微镜拾取细胞涂片的光学信号后，被数码相机转化为模拟电信号，在经模—数转化成为数字信号，经计算机处理，将运算产生的各种参数、储存的图像和数据进一步分析诊断。

3、对照设置：A. 染色对照:准备一批已知DNA含量的细胞涂片,

每次染色

取一张对照, 染色结果的IOD值要在对照片均

值±10%以内。

B．内对照细胞: 检测同一切片上100个

正常细胞作照。

4、工作效率：A：扫描时间:10~15分/例，24小时自动扫描诊断; B: 细胞病理学医生仅对＜10%的可疑病例进行复查。

细胞DNA定量分析的基本原理

每一个正常的细胞核内均有23对染色体，并有固定数量不变

的DNA含量（7pg）。占人体90%的细胞处于细胞周期总的静止

期（Go），其DNA指数（DI）为1。只有当细胞增殖时才有DNA

含量的增加。G1期是细胞增殖周期中的第一个阶段，此时细

胞尚未开始增殖，DI仍为1。S期为DNA复制期， DNA倍增，

DI为1~2。G2为有丝分裂期，DI为2（14pg）。M期为有丝分

裂期，细胞分裂为二个子细胞，DNA含量又恢复到7pg。DNA

是细胞生长、分化和繁殖的基础。致癌因子引起基因的突变，

导致DNA含量和信息的改变，即使DNA仅有2%的变化，都可

被现代的DNA图像分析系统所检出。细胞形态学改变如核增

大、染色质染色加深、核形态不规则等外在表现均提示细胞

DNA的变化。

细胞DNA定量分析的临床应用价值

1、提高细胞学诊断的准确性：80~90%的实体肿瘤细胞其DNA为非

整倍体，即异倍体。DNA异倍体细胞的出现是提示恶性细胞的

标志。细胞恶变过程中，出现DNA含量的改变较形态学改变要

早, 而且前者为量化诊断,更客观。

2、肿瘤的预后评估：整倍体系列的肿瘤其预后较非整倍体好。

3、指导肿瘤的治疗：经放、化疗治疗后，异倍体细胞是否消失直

接反映抗癌治疗的疗效好坏。

宫颈癌和宫颈癌的早期诊断

中国是宫颈癌高发生率和高死亡率的国家

宫颈癌是女性的主要恶性肿瘤之一，每年全世界有50余万新发病例，其中大约1/3来自中国。在中国，宫颈癌造成的死亡率也很高，以省市为单位的死亡率为3/10万（西藏）到20.5/10万（山西）。中国宫颈癌的平均死亡率（9.9/10万），甚至高于一些发达国家的宫颈癌发病率，如加拿大为3/10万。

全球不同国家或地区宫颈癌新发病数

（WHO上世纪80年代中期的资料）