血浆样本病毒DNA的提取

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血浆样本DNA的提取

取200 μl血浆于1.5ml 无菌EP管中,加入20μl蛋白酶K;再加入200μl AL缓冲液,涡旋振荡15秒,56℃孵育10分钟;瞬时离心EP管,加入200μl无水乙醇,涡旋振荡15秒,再瞬时离心收集管壁残液;将上述混合液加入到QIAMP离心柱中,6000g离心1分钟,弃去含废液的收集管,更换新的废液收集管,注意不要让离心柱沾染废液;离心柱中加入500μl缓冲液AW1,6000g离心1分钟,弃去含废液的收集管,更换新的废液收集管;离心柱中加入500μl缓冲液AW2,20000g离心3分钟,弃去含废液的收集管,更换新的废液收集管;20000g离心1分钟,弃去含废液的收集管,将离心柱插入1.5ml无菌EP管中,在离心柱中加入200μl 洗脱液AE (事先预热至70℃),室温孵育1分钟后,6000g离心1分钟,EP管中收集的即为目标DNA;0.7%TAE-琼脂糖凝胶电泳,验证DNA 提取质量,-20℃保存备用。

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