蜜蜂病理学复习资料

1.简述科赫假设（Koch's Postulates）的四个要点。

答: ①在每个病例中必会找到特定的致病因子
②致病微生物一定能通过纯培养分离得到
③将该培养物接种到健康易感动物体内会引起同样疾病
④被接种的动物体内必定会发现相同的微生物
2.引起蜜蜂病害的生物类型有哪些？请各举一例。

答: ①病毒:囊状幼虫病的病原体是囊状幼虫病毒（SBV）,蜜蜂麻痹病的病原体是蜜蜂麻痹病病毒
②细菌:美洲幼虫腐臭病（AFB）的病原体是幼虫芽饱杆菌，欧洲幼虫腐臭病（EFB）的病原体是蜂房蜜蜂球菌
③真菌:白垩病的病原体是蜜蜂子囊球菌，结石病（黄曲霉病）的病原菌是黄曲霉菌
④寄生虫:蜜蜂微孢子虫病的寄主是蜜蜂微孢子虫，蜜蜂马氏管变形虫病的寄主是蜜蜂马氏管变形虫
3.蜜蜂病害发生有何的特点？
答:①以群为单位②群内个体的互传
4.按病原的特性可将蜜蜂病害的分为哪三大类？各类病害中又有哪些病害？
答: ①传染性病害：病毒病、细菌病、真菌病、原虫病等。

②侵袭性病害：寄生类如寄生螨病、寄生昆虫病、寄生性线虫病等。

③非传染性病害：遗传病、生理障碍、营养障碍、代谢异常、中毒等。

5.病原入侵个体的途径有哪些？
答: 1.经口、消化道、肛门进入。

如病毒、细菌等。

2.经体壁：如真菌、某些原虫；
3.经气门：真菌、螨；
4.寄生行为：寄生昆虫及螨；
5.伤口：寄生虫、捕食者等。

6.病害感染成立必须包含三个方面的因素有哪些？
答:①病原菌②致病力③毒力
7.影响病原毒力的三个因素有哪些？
答:①病原菌的种②宿主的种③环境条件
8.原核细胞与真核细胞的差异主要表现在哪些方面？
答
原核生物 Prokaryotic 真核生物 Eukaryotic
无单位膜包围的细胞器有单位膜包围的细胞器
细胞壁成分为糖蛋白细胞壁成分为纤维素（植物）
无核膜 DNA裸露有核膜
无 cell cycle 有 cell cycle（受调控）
DNA只有exon DNA具有intron,exon
mRNA不经过剪接等作用mRNA须剪接,加帽,加尾
9.什么分类系统是最权威性细菌分类系统？细菌最重要的分类著作是什么？
答:伯杰氏分类系统，伯杰氏分类系统手册
10.根据细菌对氧的需求可将细菌分成哪五类？
答:①专性好氧②专性厌氧③耐氧（厌氧）微生物④微好氧微生物⑤兼性厌氧
11.常见的细菌计数方法有哪些？
答: ⑴直接计数法: ①显微计数法
⑵间接计数法: ①连续稀释法②标准平板计数法③最大可能数法④比浊法
12.芽饱抗性的原因是什么？
答: ①芽饱的含水率低38％～40％
②芽饱壁厚而密，分三层:外层是芽饱外壁，为蛋白质。

中层为皮层，由肽聚糖构成，含大量2，6-吡啶二羧酸（DPA）。

营养细胞和不产芽饱的细菌体内无DPA。

③代谢活力低，多数酶处于不活动状态。

而且，芽饱中含有耐热性酶。

13.构成细菌毒力的主要因子有哪些？
答: ①胞外酶:具有保护细菌或破坏宿主细胞结构
②粘附因子:菌体表面结构，如菌毛、荚膜③毒素④毒力岛
14.细菌获得外源基因（包括毒力、抗生素抗性基因）的主要途径有哪些？
答:①质粒②噬菌体③基因水平转移④基因重组产生的遗传交换作用
15.什么是菌落形成单位？
答:CFU:每个细菌代表一个菌落形成单位。

菌落形成单位（CFU）是指在琼脂平板上经过一定温度和时间培养后形成的每一个菌落，是计算细菌或霉菌数目的单位。

16.专性病原菌、兼性病原菌、潜势病原菌各自的特点？
答: ⑴专性病原菌: ①在自然界，只在特定的昆虫宿主体内增殖
②增殖要特殊的营养和环境条件，人工难培养
③很强的致病力
⑵兼性病原菌: ①营腐生生活，也可寄生于昆虫体内，寄主广
②在昆虫消化道内增殖，并侵入体腔，造成寄主染病死亡
③有些种类产生毒素，若毒素进入消化道内，能引起昆虫中毒
⑶潜势病原菌: ①多数为腐生菌，普遍存在于昆虫消化道，由于缺乏侵入肠壁的能力，很少造成昆虫的疾病。

②当昆虫因饥饿，咽下污染食物，受到其他病原体污染或同类相残造成损伤等时，便可能进入体腔，大量增殖，引起败血症。

17.幼虫类芽饱杆菌的毒力（侵染性）与什么有关？
答: ①与寄主（虫龄）有关:对1d幼虫侵染性最强，随日龄增大，侵染性减弱。

不感染成虫（why？）:成虫中肠提取物完全抑制幼虫类芽饱杆菌的营养体发育，其中的抑菌物质较耐热，125℃15min,生长抑制率扔达60％
②与菌种有关:不同株的毒力相差大，幼虫只要食入10个孢子的高毒力菌株就可导致死亡。

18.什么是“半数感染剂量”，如何设计蜜蜂病原菌的IC50的测定方法？
答:半数感染剂量指单位时间内，通过一定的途径，使一定体重的某种实验动物半数死亡或被感染所需要的最少量的细菌数或细菌毒素量。

IC50的测定方法:①配制系列浓度的菌液②实验动物分组③饲养条件:温度、湿度、光照（有无、持续时间）④结果计算
19.苏云金杆菌内毒素的杀虫机理？它的杀虫活性受哪些因素影响？
答: 杀虫机理：
（1）伴孢晶体使昆虫发生败血症死亡，即由于晶体毒素使肠壁受损，中肠的碱性、高渗内含物进入血腔，血淋巴pH升高从而导致感病幼虫麻痹死亡。

（2）芽孢可提高伴孢晶体对昆虫的致病力。

芽孢萌发及与菌体一道通过由晶体毒素损坏的中肠肠壁进入血腔，菌体的繁殖引起昆虫败血症。

影响着杀虫活性因素：
①毒素的来源②晶体的溶解性
③昆虫对毒素的内在敏感性,敏感性与中肠液pH、蛋白酶活性和毒素受体的类型、数量有关。

20.消化道细菌中的潜势病原体在何种情形下易造成危害？
答:当昆虫因饥饿，咽下污染食物，受到其他病原体污染或同类相残造成损伤等时，便可能进入体腔，大量增殖，引起败血症。

第三章真菌
21.真菌界分为哪四大门，它们的有性生殖可分别形成怎样的孢子？
答:①壶菌门:卵孢子②结合菌门:结合孢子③子囊菌门:子囊孢子④担子菌门:担孢子22.真菌的无性生殖的方式有哪些？
答: ①裂殖:如裂殖酵母菌
②芽殖:无性孢子
③孢子:游动孢子、孢囊孢子、分生孢子
23.真菌是如何通过体壁侵入昆虫体腔的？
答:孢子在昆虫体壁上发芽，产生芽管分泌各种酶溶解昆虫体壁后直接穿透或生成结构特殊的附着孢，然后产生芽管直接穿入表皮。

24.昆虫病原真菌从入侵直至在寄主上重新形成孢子要经历哪些过程？
答: 可分为9个阶段：
(1)附着：各类孢子或菌丝附着于昆虫体表。

(2)孢子萌发：高湿（＞90%）的微环境。

(3)穿透体壁。

(4)以酵母状菌丝段（虫菌体）在血淋巴中生长，以出芽方式增殖。

(5)形成毒素：通常在寄主死亡的菌丝大量增殖的种不形成毒素；而那些大量感染寄主而引起快速死亡的种产生毒素。

(6)寄主死亡。

(7)菌丝生长侵入全身器官。

此阶段有的病原真菌可寄主着色，如球孢白僵菌使虫体呈淡红色，有的虫霉使虫体呈黒色。

(8)在湿润条件下菌丝体穿出体壁，尤其在节间膜。

(9)在寄主体重新形成孢子。

25.子囊菌最突出的结构特征是什么？子囊果有几种类型？
答:最突出特征是产生子囊，子囊内有子囊孢子。

子囊的类型：A.球形；B.广卵形；C.有分隔的；D.棍棒形；E.圆柱形。

26.真菌对蜜蜂的危害表现在哪些方面？
答: 一是直接侵害蜜蜂，如蜜蜂球囊菌；
二是侵染蜜蜂的巢房或食物，影响蜜蜂的正常生活。

如，青霉属（Penicillium）是蜂箱中常见的真菌，虽然它实际上不会寄生于蜜蜂，但长满青霉菌的巢脾，蜜蜂不太接受。

27.如何判断蜂群是否患有白垩病？蜂群患白垩病的症状有哪些？其病原是什么？子实体结构如何？如何分离提纯？
答: ①患白垩病的幼虫在封盖后的前2d或前蛹期死亡。

幼虫被侵染后躯体先肿胀，微软，后期则失水缩小成坚硬的块状物。

②白垩病的病原体是蜜蜂子囊球菌，形态上位异宗配合的具分隔菌丝体，雄性菌丝形成受精突，雌性菌丝形成产囊体。

③子囊果（子实体）由外到内分为三个层次结构:闭囊壳、子囊、子囊孢子。

④分离纯化:
第四章病毒
28.病毒有哪些特点？
答: 1）形体极小，具有比较原始的生命形态和生命特征，缺乏细胞结构；
2）只含一种核酸，DNA或RNA；
3）DNA或RNA含有复制、装配子代病毒所必须的遗传信息；
4）缺乏完整的酶和能量系统；
5）严格的细胞内寄生，任何病毒都不能离开寄主细胞独立复制和增殖。

29.什么叫正义RNA病毒和反义RNA病毒？正义RNA病毒和反义RNA病毒有何不同？
答:正义RNA病毒指RNA可直接作为模板翻译成蛋白质的RNA病毒，反义RNA病毒指RNA需经过正义RNA方可作为模板翻译成蛋白质的RNA病毒。

30.病毒依遗传物质分类，可分为哪些类别？蜜蜂病毒主要属于哪类？
答: DNA病毒 RNA病毒 RNA-DNA逆转录病毒
蜜蜂病毒主要属于双链DNA病毒、正链SSRNA病毒
31.+ssRNA病毒是如何进行繁殖的？
答：
32.病毒的侵入与增殖包括哪些过程？
答①吸附和穿入②脱壳③核酸游离④mRNA 转录⑤早期蛋白质翻译
⑥病毒DNA复制⑦MRNA转录⑧晚期蛋白质翻译⑨组装成熟⑩释放
33.病毒复制过程的早期和晚期产生的mRNA有何不同？
答：早期mRNA：病毒设法利用宿主细胞内原有的RNA聚合酶转录出病毒的mRNA，再由这些mRNA进行转译，以合成病毒特有的蛋白质。

此时的mRNA为早期mRNA。

此时的早期蛋白，最重要的一种是只能转录次早期基因的次早期mRNA聚合酶。

晚期mRNA：mRNA转译后可产生一大批可用于子代病毒装配的“部件”——晚期蛋白，包括头蛋白、尾部蛋白、各种装配蛋白和溶菌酶。

34.昆虫病毒根据结构特征基本分哪三大类？
答：①病毒核衣壳颗粒为游离的，没有囊膜包被，也没有结晶状蛋白质包被的；
②核衣壳外有囊膜包被的；
③核衣壳外面有很多蛋白质晶体包被，形成多角形的包涵体（inclusion body），呈四面、长方、六面和十二面等，所以称为多角体病毒。

如家蚕NPV、CPV。

35.囊状幼虫病病毒的传播和发生有何特点？从蜂群管理角度如何控制？
答: 传播：蜂群内传播，可通过饲喂未感染幼虫、与其他成年蜂交换食物、污染食物
发生特点：1.5-6日龄的大幼虫或前蛹期的幼虫死亡
2.病虫尖头状，头部上翘，体内充满液体，无异味，体色逐渐变深，逐渐变干。

3．病虫蜡盖被咬开，出现穿孔
4.脾上出现插花子，见子不见蜂
5.螨的寄生会恶化病情
目前没有很好的化学治疗方法：
1.良好的管理，采用不易感染的蜜蜂种群
2.除去带有大量SBV侵染而死亡的幼虫巢脾
3.控制大蜂螨
36.病毒感染细胞可能发生哪些情形？
答: ①杀细胞性感染②稳定性感染③整合感染
37.简述病毒蛋白的种类和功能？
答: ①结构蛋白（组成病毒体的成分）：衣壳蛋白、包膜蛋白、基质蛋白（连接衣壳蛋白与包膜蛋白的部分，有跨膜及锚定功能区）
②非结构蛋白：病毒内的酶、感染细胞内（特殊作用蛋白）
38.蜜蜂病毒在蜂群中传播的方式有哪些？
答: ①水平传播：
同代之间的传播：工蜂-工蜂-蜂王-雄蜂
狄氏瓦螨对DVW和KBV的携播：螨a-蜜蜂（成蜂、幼虫）-螨b
②垂直传播：
亲代之间的传播：蜂王-卵，蜂王-卵
39.病毒病检测的方法有哪些？各有何优缺点？
答: ①典型症状：
②细胞学方法：
③血清学方法：
多克隆抗体：专一性不强，容易造成假阳性
单隆抗体：酶联免疫技术，快速、灵敏、简单、成本低
④分子生物学方法：
（1）RT-PCR：DNA模板品质不良，导致假阳性
（2）斑点杂交；
（3）原位杂交。

⑤生理生化法：酶、同工酶等其他生理生化指标
40.什么是PCR和RT-PCR?在病原检测方面比传统方法有哪些优势？
答: ①PCR（聚合酶链式反应）：是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，目的是使DNA得以迅速扩增
②RT-PCR（聚合酶链式反式反应）：将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。

首先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA，再以cDNA为模版扩增合成目的的片段。

③优势：高度灵敏性、特异性、操作简便易行、用途广泛
41.传染性病害如何在群间传播的？
答:
42.画简图说明蜜蜂病毒在蜂群中的可能传播途径。

答:
43.画简图说明双顺反子病毒科与传染性软腐病病毒科的基因排列差异。

答:
44.如何证明黑蜂王台病毒和残翅蜜蜂病毒可以垂直传播？
答: 1.蜂王收集 2.蜂王血淋巴的收集及解剖 3.总RNA 的提取
4.RT-PCR
5.pcr产物的定量
6.产物的测序
45.慢性麻痹病病毒与其卫星病毒有何关系？
答: ①病毒复制依赖于CBPV
②两种病毒粒子无血清学关系。

③干扰慢性麻痹病毒的复制,可能具有抗病的意义。

第五章原生动物
46.什么是原生动物？
答:原生动物是动物界最原始的一门，由单细胞组成，故也称单细胞动物。

简称原虫。

为单细胞动物，或单细胞聚集而成的群体的总称，是自然界中最原始最低等的动物。

47.蜜蜂的原生动物病原有哪种？它主要侵染哪个组织？造成哪些危害？
答: ①蜜蜂微孢子、蜜蜂马氏管变形虫病
②蜜蜂马氏管变形虫病：内部马氏管肿胀，外部无明显症状。

③蜜蜂微孢子：孢子被蜜蜂吞食后，迅速进入中肠，在消化液刺激下，放射极丝，侵染中肠上皮细胞，然后散布孢子，侵染新的细胞，生长、繁殖，如此循环。

48.蜜蜂微孢子虫是如何侵染蜜蜂的？如何通过实验室检查确定一群蜂或蜂场的微孢子虫感染率？
答:
第六章寄生螨
49.蜂螨对蜜蜂的危害有哪些？
答: ①以吸食血淋巴为生，造成宿主发育不良衰竭而亡
②将毒素注入皮下，使宿主中毒
③传播疾病
④抑制蜜蜂的免疫系统
50.大蜂螨有几种？危害我国西方蜜蜂的主要是哪个种？
答:
51.简述大蜂螨的个体发育？它要经历哪两个生活阶段？
答: 卵→幼螨→前期若螨→后期若螨→成螨①成蜂附着阶段②繁殖阶段
52.如何评估蜂群中的蜂螨感染状况？
答:
53.如何检测气管螨的存在？
答: ①检查②解剖胸部的第一对气门
第七章流行病学及病原诊断
54.病原的生存能力主要包含哪些方面？
答: ①在蜂巢内的生存能力
②在蜂体内的生存能力
③在其他生物体内或蜂巢以外的生存能力
55.蜜蜂病害流行的条件有哪些？
答: ①寄主：易感品种，
②病原：强毒力和感染力，繁殖数量多，传播快，适应性强。

③环境：适宜。

④病害流行的季节变化和年份变化：季节变化、年份变化及预测
56.流行病学调查的意义？
答: (1)了解病害在不同地域、时期、条件下的发病率。

(2)了解影响病害发生和发展的原因和规律。

(3)从内外不同因素中弄清病害的发病原因、诱因，并研究发病机理。

(4)根据不同病因及诱因提出有效的防治措施。

57.蜜蜂病害的诊断方法有哪些？
答: ①临诊诊断：箱外观察、开箱检查
②实验室诊断：
（1）病原分离镜检
（2）生理生化法
（3）血清学诊断
（4）基因诊断
58.传染性病害如何在群间传播？
答: 蜂群间病原体传播，主要通过水平传播发生的，如工蜂雄蜂迷巢，失王逃群，盗蜂和病健群共同采集同一种水源蜜粉源。

另外，不恰当的合并蜂群，对蜂王，王台，病群健群互调子脾，蜜粉脾，添加巢脾等管理系统措施，也是引起蜂群间传播的重要途径。

59.常见的蜜蜂非侵染性病害有哪些？
答: 中毒、营养障碍、机械损伤、遗传疾病、射线伤害，生理障碍
60.为避免蜂群不易患病，你认为在蜂群管理上如何做？
答: ⑴饲养管理：
①饲养强群
②充足优质饲料：蜜蜂饲料的卫生
③优质的蜂王
④抗病育种
⑵蜂场卫生：
①蜂箱蜂具的消毒：巢脾的保存和消毒
61.患蜜蜂球囊菌的病虫症状如何？其菌体的显微结构特征。

答:
62.蜜蜂病理学的重要性？
答：1.蜜蜂病理学研究水平影响与制约蜜蜂病害的科学防治水平。

2.蜂产品品质安全对蜜蜂病理及保护学提出了更高的要求。

3.蜜蜂病理学是昆虫病理学研究的重要组成，丰富了昆虫病理学的内容。

63.哪些知识能帮助你更好掌握蜜蜂病理学？
答：病理研究的常用技术：微生物技术、免疫技术、分子生物学技术
64.蜜蜂疾病发生的物理因素？
答：①机械创伤、温度、湿度、射线等。

②高温：活跃→热昏迷→死亡
③低温
65.蜜蜂疾病发生的原因化学因素？
答：化学杀虫剂中毒
物理性毒剂：如油（窒息）
原生质毒剂：如砷等
胃毒剂
神经毒剂：如胆碱酯酶抑制剂
代谢抑制剂：CO2、CO、SO2
66.蜜蜂病害防治的实际措施？
答：①蜜蜂病害检疫②抗病蜂种的选育③饲养管理技术预防④药物防治
名词解释：
病理：是指“疾病发生和发展的过程和原理”，也指疾病发生与发展过程中有机体细胞、组织、器官的结构、功能、代谢等的变化及其规律，或者说是疾病发生的原因及发展的过程和原理。

蜜蜂病理学：是研究蜜蜂疾病发生的原因、发展过程和规律的学科，并为蜜蜂疾病防治提供基础理论依据。

疾病：偏离了健康的状态。

病原：引起蜜蜂病害的原因。

病原体（pathogen）：病原微生物。

感染（infection）：病原体进入新的寄生状态的过程。

传染病－由病原微生物引起的疾病。

寄生性病（parasitosis）：由寄生动物或原生动物感染引起的病。

病理：疾病引起的机体变化。

症状（symptom）：是表示疾病的任何客观的功能或行为的失常与变化。

传染途径：病原体从传染源侵入感受性个体的途径。

如体壁、口、消化道等
传播途径：病原体在感受性个体中增殖后，再传染到其他感受性个体的途径。

如空气、水、食物、寄生物等。

敌害：指以蜜蜂身体为捕食对象的其他动物。

一些掠食蜂群内蜜、粉及严重骚扰蜜蜂正常生活及毁坏蜂箱、巢脾的动物也属敌害。

荚膜（glycocalyx）or 黏液层（slime layer）:它们使细菌能附着于包括岩石，植物和牙齿等各种不同表面。

菌毛（common pili）：帮助附着，细菌的接合(conjugation）
鞭毛（flagella）：连于细菌壁和质膜上。

芽孢(Spore)：某些杆菌在发育到某一阶段时，会在内部形成圆形或卵形的芽孢，属于细菌的休眠状态。

病原菌：凡能引起机体疾病的微生物,统称为病原微生物或病原物。

致病性：细菌的寄生,增殖并引起疾病的特性称为细菌的致病性或病原性(Pathogenicity)。

细菌的致病性：能否致病,致病程度。

毒力岛：是指编码细菌毒力基因簇的分子质量比较大的染色体DNA片段。

其特点是两侧一般具有重复序列和插入元件，通常位于细菌染色体tRNA位点内或其附近，不稳定，含有潜在的可移动元件，其基因产物多为分泌性蛋白或表面蛋白。

肠细胞脱落位点：造成肠上皮细胞粘附与脱落损伤的致病基因（sep、esp和eaeA基因）均集中在一35kb的区域，称为肠细胞脱落位点(locus of enterocyte effacement)，即LEE 毒力岛。

昆虫的枝原体病：枝原体，又名类菌质体，也是介于细菌与病毒之间的一类最小、最简单的能自身复制的微生物。

最突的特点是没有细胞壁，所以细胞柔软，形态多变，由拟球到丝状，也有分枝的，有时细胞小至直径只有0.2μm，大多可在细菌培养基上生长。

无性繁殖：是指不经过两性细胞的配合便能产生新的个体。

大多数真菌借助无性繁殖产生后代。

有性繁殖：通过配子的融合和减数分裂产生有性孢子而进行有性生殖。

毒力：是昆虫病原微生物的一种本质属性。

是病原微生物不同种或不同菌株间在一定条件下
致病性大小的综合表现。

病毒：是一类比较原始的、有生命特征的、能够自我复制和严格细胞内寄生的非细胞生物。

农药中毒：指杀虫剂引起的中毒
食物中毒：由花蜜或花粉引起的中毒
致死突变：即与生命不相容的缺陷；
不育突变：即与生殖不相容的突变；有雄性不育、雌性不育、间性。

可见突变：即与生命或生殖共存，但可察觉的异常。

如雌雄嵌合体。

肿瘤：与遗传或防卫有关。

曾在果蝇卵中发现遗传性肿瘤，
放射性障碍：引起某些器官的损伤，如神经分泌细胞、中肠皮膜组织等，而引起发育停滞，由于生殖细胞对放射线的感受性高，因此易引起不育，大量照射，则可导致死亡。

营养障害：原因主要有（1）食物中缺少营养要素，或营养比例不当。

（2）摄食、消化、吸收不良时。

或体内消耗过高时。

表现：发育延迟或停止、变态异常、行动不活泼、生殖力下降等。

流行病学：是在时间和空间两方面研究动物种群内疾病动态的科学。

病原的毒力和感染力是影响病害流行的重要因素。

毒力：指的是病原微生物引起疾病的强度，
感染力：指的是病原微生物由一个个体或种群传播到另一个个体或种群的能力。

流行系：既具高毒力又有高感染力的病原微生物。

病害动态：蜜蜂病害的严重程度是因时因地因饲养管理等条件而变动的。

这种情况称为病害动态。