生物制品分析

2.安全检查的内容
（ 1 ）过敏性物质的检查
1 ）过敏性试验 采用异体蛋白为原料制成的治疗制剂，需
检查其中过敏源的去除是否达到允许限度。
豚鼠试验
2）牛血清含量的测定
主要用于检查组织培养疫苗，要求其含量不 超过50ng/剂。 3）血型物质的检测 用人胎盘血或静脉血准备的白蛋白和丙种球 蛋白，常有少量A或B型物质，O型血孕妇使用 后，可能引起新生儿溶血症。
七、安全检查 1.安全检查的对象
菌毒种和主要原材料：1）用于生产的菌、病毒种，投产前必须 按药典或有关规定要求，进行毒力、特异性和培养特异性等试 验，检查其生物学特性是否存在异常。2）用于生产血液制品的 血液，采血前必须对献血者进行严格的体检和血样化验，采集 血后还应进行必要的复查。
半成品（包括原液）：在生产过程中，主要检查对活菌、活毒 或毒素的处理是否完善，半成品是否有杂菌或有害物质的污染， 所加灭活剂、防腐剂是否过量等。 成品：成品在分装或冻干后，必须进行出厂前的安全检查。逐 批按药典三部或有关规定要求，进行无菌试验、纯菌试验、毒 性试验、热原试验和安全试验等检查，以确保制品的安全性。
分为： 1、体外诊断制品 2、体内诊断制品
第二节
生物制品分析特点及质量要求
生物制品的质量标准有别于其他商品， 强调其特殊性： 1、安全性：安全使用，副作用小
2、有效性：使用后能产生相应的效力
3、可接受性
第三节 鉴别试验
一、免疫双扩散法 系在琼脂糖凝胶板上按一定距离打数个孔，在相邻 两孔内分别加入抗原与抗体，若抗原、抗体互相对 应，浓度、比例适当，则一定时间后、在抗原与抗
四、重组DNA蛋白制品
1、细胞因子类：重组人干扰素等
2、生长因子类：重组人表皮生长因子等
3、激素类：重组人生长激素等
4、酶类：注射用重组链激酶等 5、疫苗：重组乙型肝炎疫苗等 6、单克隆抗体：注射用抗人T细胞CD3鼠单抗 7、生物类似药：一般指结构和功能明确的治
疗用重组蛋白
五、诊断制品 用于检测相应的抗原、抗体或机体免疫状态 的制品。 毒素、诊断血清、分型血清和因子血清等。
（2）杀菌、灭活和脱毒检查 一些死菌苗、灭活疫苗以及类毒素等制品的毒 种多为致病性强的微生物，若为被杀死或解毒 不完全，就会在使用时发生严重感染，故应做 无菌试验、活毒检查和解毒试验。
（3）残余毒力和毒性物质的检查 1）残余毒力检查
2）残余毒力检查
3）毒性检查
4）防腐剂检查
（4）外源性污染的检查 1）野毒检查
2）热原试验
3）乙型肝炎表面抗原(HbsAg)
八、生物制品的效力测定
1.免疫力试验 1）定量免疫定量攻击法 2）变量免疫定量攻击法（50%有效免疫剂量测定法） 3）定量免疫变量攻击法（免疫指数测定法） 4）被动保护力测定 2.活菌数和或病毒滴度测定 1）活菌数（率）测定 2）病毒滴度测定 3.血清学试验 测定抗体水平或抗原活性
于9来自百度文库.0%。
五、相对分子质量或分子大小测定
对提纯的蛋白质制品如白蛋白、丙种球蛋白或抗毒素，
在必要时需测定其单体、聚合体或裂解片段的相对分
子质量及分子大小；
提纯的多糖疫苗需测定多糖的分子大小及其相对含量。
常用方法：凝胶层析法
SDS-PAGE法 超速离心分析法
六、其他
水分含量测定、酸碱度和氯化钠测定等
抗菌（抗病毒）血清：用细菌、病毒本身免疫马 或其他大动物所取得的免疫血清 抗蝮蛇毒血清、抗五步蛇毒血清、抗银环蛇毒血 清、抗眼镜蛇毒血清、抗炭疽血清、抗狂犬病血清
持续时间短，主要用治疗和紧急预防
三、血液制品 由健康人的血浆或经特异免疫的人血浆 人血白蛋白、人免疫球蛋白、乙型肝炎人免疫球蛋 白等。
体孔之间形成免疫复合物的沉淀线，以此对供试品
的特异性进行检查。
二、免疫电泳法
系将供试品通过电泳分离成区带的
各抗原，然后与相应的抗体进行双
相免疫扩散，当两者比例合适时形
成可见的沉淀弧。将沉淀弧与已知
标准抗原、抗体生成的沉淀弧的位 置和性状进行比较，即可分析供试
品中的成分及其性质。
三、免疫印迹法（Western blot）
三、防腐剂和灭活剂含量测定 生物制品在生产中为了脱毒、灭火和防止活菌污染， 常加入适量本分、甲醛、氯仿和汞制剂等作为防腐剂 和灭活剂。 对这些非有效成分，ChP2015中规定其含量应控制在 一定限度内。
四、纯度检查
生物制品在经过精制后，要检查纯度是否达到规定要求，常 用电泳法和高效液相色谱法。 ChP重组人促红素注射液（CHO细胞）纯度测定 1）亲水硅胶体积排阻色谱柱：排阻极限300kD，孔径24nm，
可以直接观察特征颜色变化来测定抗体（抗原）。
第四节
生物制品检查内容
一、理化性质的检查
1、外观 涉及制品的安全和效力问题 通过人工光源目测 2、真空度及溶解速率 真空封口的冻干制品， 瓶内用出现蓝紫色辉光，溶解速度应在规 定时限以下。 3、装量 容量法测试不得少于标示量
二、蛋白质含量测定
常用测定方法 凯氏定氮法（钨酸沉淀法和三氯乙酸沉淀法）、酚 试剂法（Loery法）和双缩脲法（紫外-可见分光光 度法）等。
生物制品分析概论
生物制品: 以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等 为原料，应用传统技术或现代生物技术制成。
第一节 生物制品的分类
一、疫苗类药物
用病毒或立克次体接种于动物、鸡胚，或经 组织培养后加以处理制造而成。
1、细菌类疫苗
由有关细菌、螺旋体或其衍生物制成的减毒活疫
苗、灭活疫苗、重组DNA疫苗、亚单位疫苗。
九、杂质与检查
1.宿主细胞（菌）蛋白残留量的检查 ChP2015中均采用酶联免疫法 2.外源DNA残留量的检查 第一法 DNA探针杂交法 第二法 荧光染色法 3.残余抗生素的检查 4.产品相关杂质的检查
粒度10μ m，直径7.5mm,长30cm；
2）流动相：3.2mmol/L磷酸氢二钠-1.5mmol/L磷酸二氢钾 -400.4mmol/L氯化钠，pH7.3； 3）上样量：20-100μ g； 4）在波长280nm处检测，以人促红素色谱峰计算旳理论板
数不低于1500。按面积归一化法计算人促红素纯度，不低
两种或两种以上疫苗原液按特定比例配制成的具
有多种免疫原性的灭活疫苗或活疫苗。 伤寒副伤寒甲乙联合疫苗、吸附百白破联合疫苗、 麻疹腮腺炎联合减毒疫苗等。
4、双价疫苗及多价疫苗
两种或两种以上同一种但不同型（或群）抗原合
并组成的疫苗。
双价肾综合症出血热灭活疫苗等。
二、抗毒素及抗毒血清（免疫血清类） 抗毒素（抗毒血清）：用细菌类毒素或毒素免 疫马或其他大动物所取得的免疫血清 破伤风抗毒素、白喉抗毒素和肉毒抗毒素等
系以供试品与特异性抗体结合后，抗体再与酶
标抗体特异性结合，通过酶学反应的显色，对 供试品的抗原特异性进行检查。
四、免疫斑点法 原理同免疫印迹法 以供试品与特异性抗体结合后抗体再与酶 标抗体特异性结合，通过酶学反应的显色， 对供试品的抗原特异性进行检查。
五、酶联免疫法:
利用酶标记抗原（抗体），通过酶促显色反应，
皮内注射用卡介苗、伤寒Vi多糖疫苗、吸附破伤
风疫苗、乙型脑炎灭活疫苗、乙型脑炎减毒活疫苗、 人用狂犬疫苗等。
2、病毒类疫苗
由病毒、衣原体、立克次体或其衍生物制成的减毒
活疫苗、灭活疫苗、重组DNA疫苗、亚单位疫苗。
口服脊髓灰质炎减毒活疫苗、麻疹减毒活疫苗、风
疹减毒活疫苗、腮腺炎减毒活疫苗等。
3、联合疫苗