肿瘤多药耐药的逆转策略

肿瘤多药耐药的逆转策略

肿瘤多药耐药的产生是由多因素、多环节介导的，它的机制包括：ABC转运子超家族成员的异常增多；信号传导通路异常；靶酶质和量的改变；药物的活化障碍；耐药基因的异常表达；修复能力增强等。MDR是肿瘤化疗失败最主要的原因。本文就肿瘤多药耐药的发生机制及逆转策略的进展作一全面的综述。

标签：肿瘤；多药耐药；机制；逆转策略

肿瘤细胞在首次或再次接受化疗时，对某种化疗药物产生耐药，且对其他非同类型、结构不同、作用机制相异的药物也耐药的广谱耐药现象即为肿瘤多药耐药。本文就肿瘤多药耐药的发生机制及逆转策略的进展作一全面的综述，整体分析着力于从一条多靶点、高特异性、高效应、毒副作用小的逆转途径。

1 P-糖蛋白（P-gp）介导的MDR及其逆转策略

1.1产生机制P-gp是利用ATP水解释放能量主动将疏水亲脂性的化疗药物转运至胞膜外的药物输出泵，由mdr-1基因编码的，其引起MDR的机制是：导致胞内药物未能达到最小有效浓度而产生MDR。它还抑制Caspase激活，产生凋亡耐受型MDR。相关的耐药蛋白还包括：多发耐药相关蛋白（MRP）、乳腺癌耐药蛋白（BCRP）、肺耐药相关蛋白（LRP）。

1.2逆转策略上述ABC转运蛋白家族成员，P-糖蛋白介导的机制最常见，关于P-gp抑制剂的作用机制有：①与抗肿瘤药物竞争作用于P-gp上的结合位点；

②竞争性作用于P-gp上ATP结合区，阻断ATP水解；③与P-gp上外排功能的变构区域结合，阻断其外排底物。最初的第一代P-gp的逆转剂由于无特异性作用靶点、使用剂量大、毒副作用大等，未能得到广泛使用；第二代逆转剂虽克服了第一代逆转剂的缺陷，但当其与部分抗肿瘤药物合用时，干扰了化疗药物的代谢，增加了化疗毒副反应；具有广泛应用前景的第三代逆转剂中Tariquidar最为值得关注，它在低浓度范围内即能逆转MDR，且不影响抗肿瘤药物的代谢，非竞争性、高亲和力与P-pg结合，抑制作用明显超过第一和第二代MDR逆转剂。例如：Pellicani等设计合成了一系列只保留苯甲酰苯胺骨架结构的化合物，因苯甲酰苯胺骨架结构存在于大多第3代P-gp抑制剂或MRP1抑制剂中，最终活性实验结果显示：大部分合成的化合物都具有较好的P-gp抑制活性。Mandal等应用基因定向突变等技术发现，P-gp上TM11中的Met948以及TM12中的Phe983、Val988、Met986和Ala990等氨基酸残基为cis-Z）flupentixol的作用位点，小分子cis-Zflupentixol可使P-gp变构，阻止底物的释放，抑制P-gp对化疗药物的外排功能。

2 caveolin-1与肿瘤的MDR

Caveolae是胞膜上脂筏表面穴样陷，caveolin-1为骨架分子，与caveolae参与多种细胞过程，caveolin-1在多个MDR的肿瘤细胞系高表达，其原因可能是：

①与MDR有关的胞膜脂质成分改变，将依赖caveolae药物外排泵的药物转移至胞外，使肿瘤细胞内药物未能达到有效杀伤浓度，导致治疗失败；②caveolin-1与P-gp、BCRP/ABCG2、MDR-1基因相互作用，参与耐药的形成；③caveolin-1可能作为抗凋亡的蛋白参与MDR。Tirado等研究发现ESFT细胞中caveolin-1越高，对化疗药物的抵抗就越强，caveolin-1还活化了ESFT细胞PKCα磷酸化，增强其抵抗阿霉素和顺铂所致细胞凋亡的能力。

3 相关信号传导通路介导的MDR及其逆转研究

3.1 MAPK信号通路MAPK是丝/苏氨酸蛋白激酶，MAPK信号转导通路主要有：胞外信号调节激酶（ERK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK/SAPK）、p38丝裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）、ERK5/大丝裂素活化蛋白激酶（ERK5/BMK1）。研究发现这些信号传导通路参与了肿瘤的发生、发展及肿瘤的多药耐药。Kazuhiro等发现内源性和外源性P-gp的表达均由MEK/ERK/RSK信号通路调节，U0126（MEK抑制剂）或者将RSK沉默均促进了P-gp的降解，焦今文等发现上皮性卵巢癌经多个疗程化疗后p38MAPK通路受抑制，出现Survivin、ERCC1、LRP的表达增高，从而产生了肿瘤耐药的现象。

3.2 PTEN/PI3K/AKT 磷脂酰肌醇-3激酶为兼具丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶和磷脂酰肌醇激酶活性的胞质蛋白；AKT是c-AKT基因编码的一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，AKT可激活mTOR，激活的mTOR调控肿瘤细胞的生长增殖、细胞周期、迁移等。活化的PI3K/AKT引起NF-KB中IKB激酶磷酸化，激活NF-KB 而改变基因的表达，促进肿瘤细胞生长、抑制凋亡、促进迁移。PI3K/AKT信号通路还抑制抑癌基因p53表达和凋亡途径caspase活化，打乱细胞增殖、凋亡的平衡，致肿瘤的发生；还参了肿瘤血管的形成，介导肿瘤的多药耐药。

4 基因表达异常介导的MDR及其逆转方向

4.1癌基因或抑癌基因共同参与调节细胞的增殖与凋亡，当两者平衡被打破时就很可能诱发癌症。这些基因包括有突变型P53、BCL-2、Surviving、微RNA、RB、HA117等基因。

4.1.1 P53基因是一种抑癌基因，调节基因组的稳定性。当癌症患者出现P53基因突变时，许多依赖P53基因的反应不能进行，如DNA受损的肿瘤细胞不进入凋亡途径，而是进入细胞周期不断扩增，形成耐药细胞株，产生耐药。

4.1.2 BCL-2作为一种抗凋亡基因能专一性抑制许多刺激导致的细胞凋亡，它能同时抑制p53依赖性和非依赖性凋亡途径，当Bcl-2的过表达时将抑制肿瘤化疗引起的细胞凋亡而产生耐药。

4.2基因靶向治疗基因治疗中，RNA干扰是将外/内源性双链RNA导入细胞，造成目的mRNA特异性降解，使该基因转录后沉默的一种现象。具有高特异逆转耐药、不干扰正常细胞代谢、高效、稳定、作用范围广（沉默凋亡基因、耐药蛋白、酶等）的优势。RNAi的应用：张晔等靶向沉默caveolin-1基因对阿