促甲状腺激素(TSH)定量试剂盒(化学发光法)

【概述】

促甲状腺素（TSH）是垂体前叶分泌的一种糖蛋白激素，其主要作用是调控甲状腺的功能活动。测定血清中TSH的浓度是判断甲状腺功能是否正常的首选指标，也是研究下丘脑—垂体—甲状腺轴反馈调节机制等的重要参数，临床上多用于甲状腺功能亢进（甲亢）和减退（甲减）的诊断、原发与继发性甲减的鉴别诊断、监测甲亢和甲减的疗效、亚临床甲亢的诊断、新生儿甲低的筛查以及垂体TSH瘤的实验室诊断等。

【测定原理】

本试剂盒采用双抗夹心法测定血清中TSH水平，用两株不同的单克隆抗体分别与TSH分子上不同的抗原决定簇发生反应。用一株单抗包被微孔板制成固相抗体，用另一株单抗标记酶制成酶标抗体。在包被板微孔中加入校准品或待测血清及酶标抗体，温育后即形成固相抗体—抗原—酶标抗体的复合物，充分洗涤后加入化学发光底物液，于30—90分钟内测定其发光强度（RLU），根据校准曲线即可算出样品中TSH的含量，样品的RLU值随TSH浓度的增加而升高。

【试剂组成和配制】

【样本要求】

病人标本无需特殊处理，采用正确医用技术收集全血标本，离心分离后吸取血清用于检测。待测血清如在24小时之内使用，可于2—8。C保存，若需长期存放应保存在-20。C以下，并避免反复冻溶。请不要使用严重溶血、脂血或黄疸标本。

【测定方法】

自4。C冰箱中取出试剂盒，室温平衡15分钟，然后按下表程序操作：

TSH加样测定程序表单位：ul

包被板空白孔校准孔样品孔

校准品—50 —

待测样品——50

酶标记物—50 50

用微量震荡器充分振荡混匀，用封板膜封板37。C温育2小时。

用稀释后的洗涤液洗板5次，最后在干净的吸水纸上扣干。

发光底物液50 50 50

用微量震荡器充分振荡混匀，室温（20—27。C）避光反应30分钟。

测量必须于加化学发光底物液后的第30—90分钟内测量，在化学发光

测量仪上依序测量各孔的发光强度（RLU），测量时间1秒/孔。注：若室温低于20。C，加入化学发光底物液后应将微孔板置于20~30。C烘箱内温育30分钟后再测量；加入化学发光底物液后其发光强度（RLU）在30—90分钟之间比较稳定，此段时间为可靠测

量期。

【适用仪器】

微孔板光子计数分析仪，微孔板洗板机。

【结果计算】

待测样品的浓度按下方法计算：

用化学发光测量仪中的数据处理程序（拟合类型：线性拟合，坐标选择：log(x)—log(Y),实验方法：夹心法）直接给出校准曲线及样品的浓度值。

【正常参考值】

各实验室应建立自己的临床正常值，下列正常值范围仅供参考。

正常参考值：0.3—5.0uIU/ml

【对实验结果的解释】

本试剂盒的检测结果不是临床诊断的唯一确认指标，应结合临床症状及其它检测指标综合判定。

【方法的局限性】

1、本试剂盒仅限用于血清样本的测定，对于其它体液样本测定的可靠性尚未得到充分的实验确认。

2、本试剂盒准确的测定范围应不超出校准品曲线的浓度范围，超

出曲线范围的样品需要适当稀释后测定结果才能准确。

3、通过其它方法得到的TSH浓度值与本试剂盒的测定结果不具有直接的可比性。

【技术参数】

1、灵敏度：≤0.02uIU/ml

2、精密性：用本方法检测低、中、高三组样品（n=10）。

批内变异系数：CV%＜15.0%；批间变异系数：CV%＜20.0%

3、线性：r＞0.9900

【注意事项】

1、检测必须符合实验室管理规范的规定，严格防止交叉污染。所有样品、洗弃液和各种废弃物都应当按传染物处理。

2、操作前应仔细阅读使用说明书，严格按照说明书的操作程序进行，不同批号的试剂和包被板不能混用。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封严后保存。

3、各试剂必须摇匀后使用，用前应平衡到室温，严格控制每步反应的时间和温度。

4、加样操作应快速准确手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔

壁上，尽量缩短整个加样时间。

5、每次加样完毕后，应用微量震荡器充分振荡混匀，并避免产生气泡防止溶液溅出。

6、以洗板机洗板时，每孔注液量不应少于400ul，洗板次数不少于5次，浸泡时间不短于10秒，并注意检查加液头是否堵塞。洗板完后还应在干净的吸水纸上扣干。

7、以手工洗板时，每次洗液都应加满微孔，最后应在干净的无纸屑吸水纸上扣干以防影响检测结果的准确性。

8、加发光底物液的加样器应专用，加样吸头应确保干净无污染，

在加发光底物液的过程中应避免加样吸头与板孔或手指接触，以防底物爱到污染而造成本底升高。

9、为防止样品蒸发及避免污染，温育时应将反应板放于密闭干净的塑料袋内或用不干胶覆盖。

【概述】

三碘甲腺原氨酸（T3）是含碘的氨基酸衍生物，由一个分子一碘酪氨酸和一个分子二碘酪氨酸偶联而成，分子量651D。血循环中的T3有80%来自游离T4在外周组织脱去一个碘原子而成，直接来自甲状腺的T3只占20%。血中的T3有99.7%与甲状腺结合球蛋白（TBG）等结合。血清T3浓度的测定对甲状腺功能的评价和早期诊断甲亢很有价值，同时对甲亢的疗效观察及判定预后也有重要价值。【测定原理】

本试剂盒采用竞争法测定血清中T3水平。将T3抗体包被微孔板制成固相抗体，用酶标记T3抗原制成酶标抗原。在包被板微孔中

加入校准品或待测血清和酶标记物，温育后即形成固相抗体—非标记抗原或酶标记抗原复合物，充分洗涤后加入化学发光底物液测定其发光强度（RLU），根据校准曲线即可算出样品中T3的含量，样品的RLU值随T3浓度的增加而降低。

【试剂组成和配制】