浙科版生物选修3课件：第2章-第3节 动物的克隆

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2．为什么细胞系或细胞株中有些细胞可无限传代？这些细胞为癌细胞吗？
【提示】 这些细胞往往有异倍体核型，使其能够无限传代。能够无限传 代的细胞有的仍保留接触抑制现象，一般不是癌细胞。
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动物的细胞融合技术及其应用 1.单克隆抗体的制备过程(如图)

B淋巴 骨髓瘤
细细胞胞能能无产限生增抗殖体 用细―灭胞―活融―的― 合病―并毒―筛诱→选导
多种杂种细胞细―胞 筛―培 选→养能产生专一抗体的且可无限
增殖的细胞群。
2．单 体克 的隆 获抗 得体 体外 内培 培养 养： ：从 从细 动胞 物培 腹养 水液 中中 提提 取取 抗抗 体体
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3．应用 在疾病诊断、治疗与预防方面与常规抗体相比具有特异性强、灵敏度高的 特点。单抗可作为特异探针，研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及其功能。
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(3)细胞贴壁和接触抑制
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增 多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现 象称为细胞的接触抑制。当细胞癌变后，就失去接触抑制的特点，而无限增殖。
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动物细胞培养的结果 1．连续细胞系：能连续培养下去的细胞系。是发生转化了的细胞系，大多 数具有异倍体核型。有的是恶性细胞系，具有异体致瘤性；有的连续细胞系获 得了不死性，但保留接触抑制现象，不致癌。 2．有限细胞系：不能连续培养下去的细胞系。二倍体细胞一般为有限细胞 系。 3．连续细胞株：可连续多次传代的细胞株。 4．有限细胞株：可传代次数有限的细胞株。
的克隆繁殖。(重点)
4.结合克隆概念，简述动物的克隆培养法。
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动物细胞培养和克隆的形成 1.过程(如图)
幼龄动物组织 ―用―胰―蛋―白―酶―― 处―理→细胞悬浮液―→原代培养―→传代培养。
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2．细胞株与细胞系 (1)细胞系：原代培养细胞首次传代时就成为细胞系。分为有限细胞系和 连续 细胞系两类。 (2)细胞株：从原代培养物中或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称细胞 株。也分为有限 细胞株与连续 细胞株。 3．克隆培养法 把一个细胞 培养为一个新的细胞群体的技术叫克隆培养法。这样培养获得 的细胞群叫纯系 。
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无菌、无毒的环境 培养营养需要：适宜的培养基、添加血清、激素胰岛素、 4.条件 CO2气体环境、调节pH及滋养细胞等
条件
1．把动物组织块分散成单个细胞所用的胰蛋白酶能否换成胃蛋白酶？ 【提示】 不能。因为胃蛋白酶的最适 pH 呈酸性，环境不适合。
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(3)细胞株与细胞系 ①含义：条件合适时，能连续传代的细胞称为细胞系。通过一定的选择或 纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株， 细胞系细胞的遗传物质若发生了改变，具有癌细胞的特点。细胞株一般具有恒 定的染色体组型、同工酶类型、病毒敏感性和生化特性等。 ②图示：
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课
当
前
堂
自
双
主
基
导
达
学
标
第三节
动物的克隆
课
课
堂
后
互
知
动
能
探
检
究
测
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课标解读
重点难点
1.结合教材图 2-6，简述动物细胞培养与体细
胞克隆。
1.动物细胞组织培养、细胞核移
2.通过实例分析，了解动物组织培养技术的发 植和动物的克隆繁殖。(重难点)
展历程。
2.细胞株系、细胞核移植和动物
3.分析比较细胞系及细胞株的含义。
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(2)原代培养与传代培养：从机体上获取的组织，通过酶或机械方法分散成 单个细胞进行培养，在首次传代前的培养称为原代培养。原代培养的细胞生长、 繁殖一定的时间后，由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭，会影响细胞 的生长，因此需要进行分瓶扩大培养，即传代培养。
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2．应注意的问题 (1)动物细胞培养时可以分散成单个细胞，也可以用细胞群(团)、组织块培养。 分散成单个细胞后培养，细胞易获得所需的营养物质，其代谢废物容易排出； 同时，分散成单个细胞培养，可使得在细胞水平操作的其他技术得以实现。 (2)为了保证细胞培养时满足其营养物质和生长因子的供给，培养基中添加 一定量的血清，因为血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素及一些未知的 营养物质。 (3)由于大多数动物细胞培养的适宜 pH 为 7.2～7.4，而胃蛋白酶发挥活性的 最适 pH 为 2.0 左右，因此不能使用胃蛋白酶使细胞分散开。
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1．细胞株是具有特殊性质(如病毒敏感性、生化特性)的细胞系。(√) 2．有限细胞系易于克隆。(×) 【提示】 有限细胞系不易克隆。相反，无限细胞系易于克隆。 3．动物细胞杂交可利用物理、化学方法进行介导。(√) 4．制备单克隆抗体时使用的免疫细胞为 T 淋巴细胞。(×) 【提示】 应为 B 淋巴细胞。 5．“多莉”的性状与提供乳腺上皮细胞的 6 岁母羊完全相同。(×) 【提示】 “多莉”的性状酷似 6 岁母羊。 6．低等动物的全能性一般较易体现。(√)
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动物细胞培养的相关分析
【问题导思】 ①动物细胞培养的具体过程如何？动物细胞培养与植物组织培养主要有什 么区别？ ②什么是原代培养？什么是传代培养？分别有什么特点？ ③细胞株和细胞系有何区别与联系？
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1．过程 动 组物 织块胰―酶 ―→等分散成单个细胞―→制成细胞悬液―→原代培养―→接触抑 制胰―酶 ―→等传代培养 (1)胰酶的作用：消化细胞间的蛋白(主要为纤维蛋白、层粘连蛋白、纤粘连 蛋白、弹性纤维等)，使组织分散成单个细胞。
3．单克隆抗体生产中两次筛选的目的有何不同？
【提示】 第一次筛选为了选出杂交瘤细胞，第二次筛选是从杂交瘤细胞 中选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞。
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动物的克隆繁殖 1.过程
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2．动物克隆成功证明了 (1)高度分化细胞经一定技术处理，也可回复到类似受精卵时期的功能。 (2)在胚胎和个体发育中，细胞质具有调控 细胞核(包括异源细胞核)发育的作 用。 3．克隆的意义 (1)为遗传病的治疗、优良品种的培育等提供了重要途径。 (2)对物种的进化、濒危动物的保存及对转基因动物的扩群有重要意义。 (3)丰富了人们的物质生活。 (4)缩短育种年限，提高生产效率。