微柱凝胶法血型鉴定操作规程

微柱凝胶法

1标本：EDTA-K2 抗凝血2.0ml

2原理：

2.1人红细胞抗原与相应抗体发生特异性免疫反应（其本质为血凝反应）；

2.2检测系统是在微柱中（载体）装有的介质凝胶；

2.3凝胶间隙具有分子筛作用。凝集的红细胞（结合的）被留在微柱上面成带状或凝集颗粒散布凝胶中间。未凝集的红细胞（即未结合、游离的）通过离心后沉入微柱的底部；

2.4微柱凝胶中所含的特异性单克隆抗A、抗B试剂检测红细胞上相应的血型抗原，从而鉴定红细胞的血型。

3操作：

3.1在A1孔悬空加入50ul标准A1红细胞，在B孔悬空加入50ul标准B红细胞，再在两孔中各加入50ul样品血浆。3.2在A、B、D、C、E、Ctrl六个孔内分别悬空加入5%病人红细胞悬液10ul

3.3将卡放到戴安娜专用离心机中离心9分钟

3.4离心结束后在白色背景前观察结果

4结果判断：

A孔阳性B孔阴性为A型;A孔阴性B孔阳性为B型;

A孔阴性B孔阴性为O型;A孔阳性B孔阳性为AB型。

5.注意事项

5.1严格按操作规程操作，认真核对标本并作好标记。

5.2应先加红细胞悬液，然后再加血浆。

5.3为了防止冷凝集现象的干扰，一般应在室温下进行试验。

5.4严格控制离心速度和时间，防止假阳性或假阴性结果。

5.5未用的微柱凝胶免疫检测卡应入室温保存，用完后放4℃冰箱保存1周。

5.6判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。

6.方法评价

卡式法定型使用安全，操作简单，结果稳定可靠，灵敏度高，重复性好，但费用昂贵，需要特殊的仪器设备。