【CN109924073A】一种见血清种子无菌萌发及快速成苗方法【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910233789.8

(22)申请日 2019.03.26

(71)申请人 四川大学

地址 610065 四川省成都市一环路南一段

24号

(72)发明人 李鑫　王姝　谢冰心　刘杨　

陈玉雯　王小沁　孙辉　

(74)专利代理机构 成都方圆聿联专利代理事务

所(普通合伙) 51241

代理人 李鹏

(51)Int.Cl.

A01G 22/00(2018.01)

A01H 4/00(2006.01)

A01G 2/10(2018.01)

A01G 31/00(2018.01)

(54)发明名称

一种见血清种子无菌萌发及快速成苗方法

(57)摘要

本发明属于植物培育技术领域，具体涉及一

种见血清种子无菌萌发及快速成苗方法，血清蒴

果酒精浸泡后消毒，切开均匀撒到见血清种子萌

发培养基表面，直到发芽并分叶，转接到生根培

养，生根植株进行扦插增殖扩繁，然后驯化移栽。

本发明见血青种子的发芽率搞，操作流程简单，

缩短了见血青快繁的周期；还稳定了见血青无菌

苗的性状表现，在见血青无菌苗的增殖过程中，

过多种类的生长激素会造成其性状表达的不稳

定，该发明技术仅用了两个不同种类的培养基配

方，降低了其发生性状变异的可能性，保证了见

血青组培苗中各药性成分的稳定，从源头保证了

药材的质量。权利要求书1页 说明书3页CN 109924073 A 2019.06.25

C N 109924073

A

权　利　要　求　书1/1页CN 109924073 A

1.一种见血清种子无菌萌发及快速成苗方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)种子前处理：采集野生成熟浅黄色的见血清蒴果，密封保存于4℃环境下；接种前取出保存的未裂蒴果，先在自来水流水下冲洗10min以上，于超净台上将蒴果用75％酒精浸泡40～60秒后，再将蒴果转入0.1％的氯化汞溶液消毒处理10～15min，然后取出蒴果用无菌水冲洗5～6次，最后用无菌滤纸吸干蒴果表面水分；

(2)种子无菌萌发：用刀片将消毒完毕的见血清蒴果中部切开，将其中种子均匀撒到种子萌发培养基表面，在室内日温25±2℃、夜温20±2℃、光照强度为2500～4000lx、光照时间为10～14h/d条件下进行培养；60～90天后，种子开始膨大，并形成黄色球状的原球茎，之后逐渐开始转绿并出现芽点；继续培养45～60天后，开始发芽并分叶；

(3)转接生根培养：将萌发培养基上见血清种子培养至发芽，或1片叶展开之后，取出少许见血清幼苗连带发芽培养基，均匀涂抹转接到生根培养基表面，涂抹到生根培养基上面的幼苗及发芽培养基厚度约0.5cm；在培养温度为25±2℃，光照强度2500～3000lx，光照时间10～12h/d的培养条件下培养；培养50～60天后，每株种苗有壮实的2～3条长2～4cm的根长出；

(4)转接扩繁：当生根植株长至7～9cm后，截取植株茎，每两个节剪成一段，在(3)所用生根培养基上，进行扦插增殖扩繁；

(5)驯化移栽：当见血清无菌苗长至6～8cm时，将装有带根无菌苗的组培瓶拧松瓶盖驯化3～5天后，取出无菌苗并洗净根部培养基后，根系蘸消毒液，蘸取特制生根促进剂与黏土混合物之后，移栽到智能温室基质土苗床中炼苗；待幼苗生长2～3个月后，移入大田种植，移栽时蘸取特制生根剂黏土浆后阴天移栽，并搭建遮阳网，防涝保湿；植株大田移栽密度12000株/m2，起垄条栽，移栽成活率大于90％。

2.根据权利要求1所述的一种见血清种子无菌萌发及快速成苗方法，其特征在于，步骤(2)中种子萌发所用的萌发培养基配方为：1/2MS+ZT 0.05～0.08mg/L+NAA 0.8～1.2mg/L+蔗糖3％+琼脂0.6％；pH＝5.8～6.0。

3.根据权利要求1所述的一种见血清种子无菌萌发及快速成苗方法，其特征在于，步骤(3)中，所用的生根培养基配方为：1/4MS+IBA 0.6～1.0mg/L+NAA0.2～0.5mg/L+蔗糖3％+豌豆粉0.8～1.2％+琼脂0.4％；pH5.8～6.0。

4.根据权利要求1所述的一种见血清种子无菌萌发及快速成苗方法，其特征在于，步骤

(5)中，炼苗温度控制在20～25℃；第一个星期需要喷雾保湿，其后逐渐降低喷雾频次和空气湿度，保持基质湿润；将光照时间控制为10～12h/d，强度为3500lx，光照不足时采用人工光源辅助照明。

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