血栓与止血检验的基本方法详解

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(2)减低 ①肝脏疾病:慢性肝炎、肝硬化、急性肝萎缩。 ②砷、氯仿、四氯化碳中毒均可使纤维蛋白原减 少。 ③DIC:因纤维蛋白原消耗及继发性纤溶活性亢进 纤维蛋白原呈进行性下降。 ④原发性纤维蛋白原缺乏症。 ⑤原发性纤溶活性亢进。 ⑥恶性贫血及肺、甲状腺、子宫、前列腺手术。 ⑦天门冬酰胺酶治疗白血病。 ⑧监控:溶栓治疗的监控范围:1.2g/L~1.5g/L, 低于1.2g/L时引起病人出血。
第十三章
血栓与止血检验基本方法
P367
教学要求 1.掌握PT时间、APTT 、3P试验、FDPs、血浆D-二聚 体等试验的检测的原理及临床意义、正常吸附血 浆、正常血清所含的凝血因子、过敏性紫癜、 ITP 、DIC、Even综合征的概念及临床表现,过敏性紫 癜的主要过敏原、ITP的诊断标准,血友病诊断和 分型。 2.熟悉各型血友病及血管性血友病因子检测的意义、 血栓与止血筛选试验的应用,过敏性紫癜、ITP、 血友病、DIC、Even综合征的实验室检查。 3.了解血小板检测、抗凝血酶检测、血浆纤溶活性 检测和血栓前状态检测的意义、其他凝血障碍性 疾病的检验。
参考值因国际敏感度指数[S]而异。
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INR:需先求得所用组织凝血活酶的国际敏感
度指数[S],是所用组织凝血活酶与已知参比品相
比较的一个参数。是用多份凝血因子水平不同的
血浆(包括正常人和口服抗凝剂患者的血浆),
用参比品测得它们的logPT,再用待标定的组织凝 血活酶测得它们的logPT,以前者为纵坐标,后者 为横坐标作图,经回归求得直线斜率。即待标定 的组织凝血活酶的 [S] = 已知 [S] ×斜率。 [S] 值
一、血浆纤维蛋白原
凝血因子的检测
1. 原理:Clauss法以凝血酶作用受检血浆中
纤维蛋白原(Fg),使其形成纤维蛋白而使
血浆凝固,测定凝固时间。纤维蛋白的量
与凝固时间成负相关,检测结果与参比血 浆制成的标准曲线对比,可得出纤维蛋白 原的含量。 2.正常参考值:2—4g/L。
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3.临床意义 (1) 增高 ①机体感染;毒血症、肝炎、轻型肝炎、胆囊炎及 长期局部炎症 ②无菌性炎症:糖尿病、肾病综合症、尿毒症、风 湿热、恶性肿瘤、风湿性关节炎等。 ③糖尿病酸中毒。 ④心血管疾病:动脉硬化症、脑血栓、血栓静脉炎、 心肌梗塞、放射治疗。 ⑤妇女经期、妊趁晚期、妊高症及剧烈运动后。 ⑥放疗后,灼伤,休克,外科大手术后,恶性肿瘤 等。
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例:推测凝血因子缺乏的检测试验 首先:如PT正常,可除外共同凝血途径异常,而内 源性凝血途径中可能出现了Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ缺乏。
管号 吸附血浆 血清 1. 正 + 正 时间 正常 结果推测 正常
2.
3.


+
+


延长 异常 正常:病人有Ⅸ、可能无Ⅷ
异常:病人无Ⅸ 正常:病人有Ⅷ、可能无Ⅸ
4.
血小板增多
血小板减少
某些凝血因子缺乏
血小板功能缺陷 血管性血友病 低(无)纤维蛋白原血症
原发性/继发性 遗传性 / 获得性 遗传性/获得性 遗传性/获得性 血小板减少症 血小板功能缺陷 vWF缺陷 低(无)纤维蛋白原血症
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(二)二期止血缺陷筛检试验
二期止血缺陷:是指血液凝固和纤溶 异常所引起的止血功能缺陷。若临床出现不同程 度的出血时,筛检试验分为以下四种情况:
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第十四章 血栓与止血检验的临床应用
第一节
出血性疾病中的应用
一、血栓与止血筛选检验的应用
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(一)一期止血缺陷筛检试验
一期止血缺陷:是指血管壁和血小板异
常所引起的止血功能缺陷。如临床出现不同 程度的出血时,筛检试验可分为以下四种情 况:
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出血时间延长合并血小板计数
减少 正常 增多 原发性/继发性 血小板增多

+
正 异常:病人无Ⅷ
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临床常用PT、APTT、TT组合,作止 血与血栓性疾病的筛选试验:
1.PT延长,APTT、TT正常:外源途径异常, 进一步作PT延长纠正试验鉴别。 2.APTT延长,PT、TT正常:内源途径异常, 进一步作凝血活酶生成试验。 3.PT、APTT延长,TT正常:共同途径异常, 肝病、vitk↓。 4.PT、APTT、TT延长:抗凝物质增多或纤 维蛋白(原)缺乏。
(1)减低:见于血管性血友病(von willebrand disease .vWD),是vWD的诊断及分型的重要指标。
(2)增高:vWF是一种急性反应蛋白,在很多情况下 都可增高,常见于血栓性疾病,如心肌梗死、心 绞痛、脑血管病变、肾小球疾病、糖尿病、妊娠 高血压综合征、大手术后等。
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第三节
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(一)血浆凝血酶原时间测定(PT) 1.原理
在受检血浆中加入足量组织凝血活酶
(即TF)浸出液和和适量Ca2+离子后,血 浆凝固所需的时间称为血浆PT。
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2.参考值
(1)平均为12s±1s,男性:11s~13.7s;
女性:11s~14.3s,超过对照3s以下为异 常。 (2)PT时间比值(PTR)=被检血浆PT(s) /正 常参比血浆PT(s),宜用多份正常血浆PT 的几何均数参考值为1.00±0.15 (3)国际标准化比值(INR)=PTR[S]
1.原理:在试管中,血浆凝血因子、PF3、钙可形 成凝血活酶(凝血酶原酶),使正常血浆凝固, 将病人与正常人标本进行不同组合,测定凝固 时间,可检出病人缺乏何种凝血因子。
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2.要求 (1)吸附血浆:含Ⅰ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅺ、Ⅻ。(注意: 有Ⅷ、无Ⅸ) (2)血清:含Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ。(注意:有Ⅸ、 无Ⅷ) 3.临床意义 (1)PT正常,可确定是否有:Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、 Ⅻ、 PF3缺乏或抗凝物质存在。 (2)Ⅷ/Ⅴ缺乏的结果:PT延长,推测可能有Ⅴ 缺乏。 (3)Ⅸ/Ⅹ缺乏的结果:PT延长,推测可能有Ⅹ 缺乏。
纤维蛋白(原)降解过程及产物
凝血酶 XIIIa 纤维蛋白(原) 可溶性纤维蛋白 交联纤维蛋白
纤 溶 酶
FPA、FPB (Aα1-6 ) (Bβ1-14)
纤 溶 酶 Bβ15-42 Aα极附属物 (A、B、C 、H) X ’、 Y ’、 D 、 E ’
纤 溶 酶 Aα极附属物多聚体 D-二聚体 DD/E复合物 X ’、 Y ’、 D 、 E ’
protamine paracoagulation test,3P test ),
是在待测血浆中加入硫酸鱼精蛋白,可使可溶性纤维
蛋白单体(FM)与FDP(主要是X片段)形成可溶性复合
物解离,游离的FM之间自行聚合呈肉眼可见的纤维絮
状或胶冻状沉淀。
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2.参考值:阴性
3.临床意义
(1)原发性纤溶时:阴性。 (2)继发性纤溶时早期:阳性。 (3)DIC的晚期因FgDP或FbDP(X、Y)被降解为低 分子量小碎片(D、E):阴性。
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同时检测APTT和PT对二期止血缺陷的应用
APTT(N) PT(A) 外源途径
缺陷
APTT(N) PT(N) 因子Ⅷ定性
试验阳性
APTT(A) PT(N) 内源凝血途径缺陷
APTT(A) PT(A) 共同途径缺陷
有出血
无出血
因子Ⅶ 缺陷症 (遗传性 /获得性)
因子Ⅷ 缺陷症 (遗传性 /获得性)
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二、FⅧ、FⅨ、FⅪ、FⅫ凝血活性测定
1.原理:将病人血浆与缺乏因子 Ⅷ:C ; Ⅸ : C ;Ⅺ: C ;Ⅻ: C 基质血浆混合

作APTT,计算病人血浆中所含因子含量占 正常人的百分率。 2.优点:方法简便,可分型。 3.缺点:缺乏因子Ⅷ:C等基质血浆,来源
困难。
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三、 Bigg’s凝血活酶生成试验
因子Ⅷ、Ⅸ 因子Ⅶ、PK 因子Ⅹ、Ⅴ Ⅺ缺陷症 HMWK、Ⅺ Ⅱ、Fg缺陷症 (遗传性 缺陷症 (遗传 或存在血液凝 /获得性) 性/获得性) 固调节异常
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二、
过敏性紫癜 (P315)
(一)概念:本病是一种变态反应性疾病,主 要是由于机体对某些致敏物质(过敏原)发生变态 反应而引起全身性毛细血管壁的通透性和(或)脆 性增加,导致以皮肤和粘膜出血为主要表现的临床 综合征。好发于儿童和青年人,并且在20岁以前发
越低,试剂对有关凝血因子降低的敏感度越高。
再按下式求得INR: INR=PTR[S]
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3.临床意义:是外源性凝血途径的筛选试验。 (1)PT延长 ①Vitk缺乏:Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ统称为依赖Vitk凝 血因子。Vitk↓、因子↓→ PT↑。 ②抗凝治疗,香豆素类抗凝药物与Vitk化学结 构相似,竞争性拮抗,使PT↑。 ③肝病:肝脏是合成除组织因子(Ⅲ)、钙(Ⅳ) 及Ⅷ因子外其他因子的主要场所,肝受损→凝 血因子合成↓→PT↑。 ④先天性凝血因子缺乏症:Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ。 ⑤抗凝物质增多。 (2)PT缩短:常见于血栓前状态和血栓性疾病。
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(二)活化部分凝血活酶时间测定
1. 原理:37℃条件下,以白陶土激活因子Ⅻ和
Ⅺ,以脑磷脂(部分凝血活酶)代替血小板 3
因子,在Ca2+参与下,观察贫血小板血浆凝固 所需的时间,即为活化部分凝血活酶时间 (APTT)。
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2.参考值 男:37s±3.3s 女:37.5s±2.8s 超过正常对照10s以上为异常。
1.原理:血浆中的血管性血友病因子(vWF)是一种多
聚体大分子蛋白,血浆浓度为7~10g/L。vWF具有 与胶原、肝素、FⅧ轻链、GPⅠb/Ⅱb-Ⅲa、瑞斯 托霉素等结合的多个功能区。因此vWF的分析包括
含量、活性、功能、多聚体等多功项检测。
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2.参考值:检测的方法同其值也不同,一般大于
50%。 3. 临床意义:vWF:Ag检测是临床常用的较为敏感 和实用的试验之一,是研究和诊断vWD 的重要指 标。
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3. 临床意义:是内源性凝血系统敏感而简便的筛
选试验。
(1)APTT时间延长:
①内源性凝血途径因子缺乏:Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ。 ②外源性凝血途径因子缺乏:Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ。 ③血中抗凝物质增多。 (2)APTT时间缩短:可见于高凝状态及血栓形成 性疾病。
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三、纤溶活性的筛查试验
血浆纤溶活性增强的筛查,一般选用能
直接或间接检测出血浆纤溶酶降解纤维蛋白
(原)降解产物(FDPs)的试验,临床常用
的有:凝血酶时间(thrombin time,TT)、
血浆鱼精蛋白副凝固试验(plasma protamine pracoagulation test ,3P
test)。
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(一)凝血酶时间测定
1.原理:受检血浆中加入“标准化”的凝血酶溶液 后、血浆凝固所需要的时间,即为凝血酶时间。 2.参考值:16s~18s。超过对照3s以上为异常。
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Baidu Nhomakorabea 第一节
血栓与止血的筛选试验
一、一期止血缺陷的筛选试验 临床上常作的试验:主要有出血时间 (bleeding time,BT)、血小板计数(platelet count,PLT)和血块收缩试验(clot retraction test,CRT)。
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二、二期止血缺陷的筛选试验
主要涉及凝血因子和抗凝血物质的异常,用 于凝血与抗凝血功能筛查的试验较多,常用的有: 凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化 部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、试管法凝血时间 (clotting time,CT)。
Bβ1-42 Aα极附属物 (A、B、C、H) X、Y、D、E
3.意义
参考值阴性,在继发纤溶时(DIC)阳性; 原发纤溶时阴性。常作为鉴别原发性纤溶与继发 性纤溶的可靠指标,也是溶栓治疗的有效观察指 标。D-二聚体阳性或增高是诊断DIC的重要依据 之一。
第二节
血管壁(内皮)的检验
一、血管性血友病因子检测
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(三)血浆D-二聚体检测
——乳胶颗粒浊度分析法
1.原理:受检血浆中加入标有D-二聚体单抗的胶乳 颗粒悬液,如果血浆中D-二聚体含高于0.5mg/L 时即可与胶乳颗粒上的抗体结合,发生胶乳颗 粒凝集。
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2.血浆D-二聚体 是交联纤维蛋白降解产物之一,为继发 纤溶特有的代谢物。
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3.临床意义
(1)TT延长: ①肝素及肝素类抗凝物增多。 ②FgDP(FbDP)↑→DIC(消耗Fb 或Fg)。 ③先天性纤维蛋白(原)异常或缺乏症。
(2)TT缩短:极罕见,主要见于某些异常蛋
白血症如巨球蛋白血症。
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(二)可溶性纤维蛋白单体试验:3P试验
1.原理:血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验( plasma
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